小鼠β-防御素-3基因表达调控的初步研究

目的 研究小鼠 β 防御素 3(mBD 3)基因的表达及其调控因子。方法 通过腹腔注射内毒素 (LPS)建立小鼠急性时相反应 ,经Northern blot检测mBD3mRNA表达的组织特异性并分析在肝脏中表达的剂 效和时 效关系 ,EMSA和South westernblot分析细胞核蛋白中的转录因子。结果 内毒素注射后仅在肝脏组织中检测到mBD3mRNA并存在最小诱导剂量 ,本实验确定的最小诱导剂量为 1 .5 μg/ g(剂量 /体重比 )。以 1 .5 μg/g为诱导剂量 ,在注射后 6h才出现mBD3mRNA的表达 ,8h、1 0h达峰值 ,1 2h后表达水平下降。肝脏细胞核蛋白中有与mBD3基因调节区特异DNA片段结合的转录因子 ,分子量在 4 3.0～ 6 6 .2kD之间。结论 小鼠急性时相反应时mBD3基因在肝脏中表达上调 ,具有剂量和时间依赖性 ;NF κB参与β 防御素 3基因在肝脏中表达的转录调节。

白藜芦醇对活化小鼠T淋巴细胞IL-2和CD25表达的影响

目的:研究白藜芦醇(RSV)对活化的小鼠T淋巴细胞分泌IL 2和CD2 5的影响,并探讨其免疫抑制机制。方法:无菌分离小鼠淋巴结细胞,与不同浓度的白藜芦醇共同孵育1小时后,用多克隆刺激剂佛波醇酯和离子霉素刺激T细胞活化,继续培养6小时后收获细胞,进行胞内细胞因子染色,流式细胞仪检测IL- 2的分泌情况,RT- PCR检测IL -2mRNA的表达;2 4小时后检测CD2 5表达。结果:RSV对IL 2的分泌具有抑制作用,并呈剂量依赖性,同时RSV也能抑制T细胞表面活化分子CD2 5。结论:RSV对活化T细胞分泌的细胞因子IL- 2及IL- 2α链CD2 5的表达可能是RSV对T细胞具有免疫抑制作用的机制之一,并可能与T细胞活化通路的PKC NF -κB信号传导途径相关。