阻断IFN-β改善脂多糖所致T淋巴细胞增殖抑制的实验研究

目的:探究细胞因子在脂多糖所致脓毒症T淋巴细胞免疫抑制中的作用。方法:以革兰阴性细菌成分脂多糖诱导脓毒症T淋巴细胞免疫抑制,采用流式细胞分析检测对照组和模型组树突状细胞的细胞因子白介素-1α(IL-1α)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)、干扰素-α(IFN-α)、IFN-β的表达情况。然后分别阻断树突状细胞的细胞因子进行混合淋巴细胞共培养实验,采用BrdU细胞增殖检测试剂盒检测阻断后T淋巴细胞的免疫增殖抑制的逆转情况。结果:与对照组相比,模型组树突状细胞的细胞因子IL-1α、IL-6、TNF-α、TGF-β、IFN-β阳性百分比显著升高,IL-10、IFN-α阳性百分比无统计学差异。阻断细胞因子后,与模型组相比,αIFN-β+模型组T淋巴细胞增殖反应显著升高。结论:脂多糖所致脓毒症过程中树突状细胞的细胞因子IL-1α、IL-6和TNF-α表达上调可能参与促炎反应过程。细胞因子IFN-β表达上调可能参与淋巴细胞凋亡的免疫抑制过程。阻断IFN-β可改善脂多糖诱导的脓毒症T淋巴细胞增殖抑制现象。

人类微小病毒B19感染在桥本甲状腺炎发生中的作用

目的探讨人类微小病毒B19感染(parvovirus B19,B19)在桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT)发生中的作用。方法对32例手术切除的HT患者甲状腺组织及16例甲状腺腺瘤患者腺瘤旁正常甲状腺组织,分别用原位杂交法(ISH)和免疫组化(IHC)SP法检测B19病毒DNA和病毒蛋白的表达。结果B19ISH阳性信号同时来源于甲状腺滤泡上皮细胞和间质浸润的淋巴细胞,而IHC阳性信号大多表达于增生甲状腺滤泡上皮细胞,少数表达于间质浸润的淋巴细胞。在HT中,ISH和IHC阳性率分别为71·9%(23/32)和56·3%(18/32),而腺瘤旁正常甲状腺组织中,阳性率分别为12·5%(2/16)和6·25%(1/16),两者比较差异有统计学意义(ISH:χ2=12·783,P=0·000;IHC:χ2=9·158,P=0·001)。结论HT患者甲状腺组织B19感染率明显高于腺瘤旁正常甲状腺组织,提示HT可能是一种新的B19相关性人类疾病,B19感染在桥本甲状腺炎的发生中可能起重要的作用。

鼻NK/T细胞淋巴瘤中组织蛋白酶D和E-选择素的表达及意义

目的:探讨组织蛋白酶D(CD)和E-选择素(E-selectin)在鼻NK/T细胞淋巴瘤中的表达及意义.方法:采用免疫组化SP法检测41例鼻部非霍奇金恶性淋巴瘤CD45RO,CD3ε,CD20,CD79α,CD56和TIA-1的表达;EBER原位杂交法检测EB病毒感染情况,根据最新WHO分类及诊断标准诊断鼻NK/T细胞淋巴瘤;对完全符合诊断标准的21例鼻NK/T细胞淋巴瘤和10例鼻咽增生淋巴组织活检标本,用免疫组化方法检测CD和E-选择素的表达.结果:鼻NK/T细胞淋巴瘤间质中组织细胞CD阳性信号的表达明显高于增生淋巴组织组(t=39.12,P=0.000);E-选择素表达于血管内皮细胞,鼻NK/T细胞淋巴瘤与鼻咽增生淋巴组织中E-选择素平均血管阳性率差异无统计学意义(t=0.688,P=0.497).结论:鼻NK/T细胞淋巴瘤间质中CD的表达明显增高,与该肿瘤高度侵袭性相关;E-选择素与鼻NK/T细胞淋巴瘤恶性生物学行为无直接相关性.

人微小病毒B19感染与Kikuchi病的相关性

目的:研究人微小病毒B19感染与组织细胞性坏死性淋巴结炎(KFD)的相关性.方法:采用双盲法在32例KFD患者及13例正常对照淋巴结活检组织中用原位杂交和免疫组织化学染色方法检测B19病毒基因组DNA和病毒蛋白.并采用原位杂交和免疫组化双标记法确定病毒感染的细胞类型.结果:在32例KFD患者淋巴结中,B19病毒DNA和病毒蛋白阳性率分别为71.9%和59.4%,而在对照淋巴结中,二者阳性率分别为30.8%和23.1%.统计学分析显示B19病毒基因组DNA和病毒蛋白在KFD中有更高感染率(P值分别为0.011和0.027).病毒感染的细胞大部分为淋巴细胞,少数组织细胞也是病毒感染的靶细胞.结论:微小病毒B19在KFD中有更高的感染率,微小病毒B19与KFD的发病有密切关系.

北京某医科大学台湾省籍学生孤独、交往焦虑和心理健康状况分析

目的调查北京市某高等院校台湾省籍学生孤独、交往焦虑和心理卫生状况,研究该群体的心理行为特点,为心理健康教育工作提供依据。方法分层整群抽取某高校台湾省籍学生30名,内地学生(对照组)49名,以UCLA孤独问卷、交往焦虑量表和症状自评量表(SCL-90)作为测量工具,进行孤独、交往焦虑和心理卫生状况问卷调查,并作比较分析。结果台湾省籍学生与内地学生的交往焦虑、心理卫生水平差异无统计学意义,孤独水平差异有统计学意义。结论台湾省籍学生的交往焦虑、心理卫生整体水平处于正常范围,孤独水平偏高。走出孤独对提高台湾学生心理健康水平有重要意义。

凋亡相关蛋白Apr-2的克隆、测序及初步表达

目的 :从HL 6 0细胞凋亡模型中克隆凋亡相关蛋白Apr 2编码区基因 ,并对其进行表达 ,为进一步研究Apr 2的结构功能及多克隆抗体的制备奠定基础 .方法 :建立HL 6 0细胞凋亡模型 ,提取HL 6 0凋亡细胞总RNA ,以RT PCR方法获取Apr 2cDNA编码区全序列 ,将其与PGEM TEasy载体连接 ,转化E .coliDH5α ,构建重组克隆载体PGEM TEasy/apr 2 ,测序正确后 ,将目的片段亚克隆入PGEX 4T 2原核表达载体 ,并转化大肠杆菌 ,IPTG诱导重组蛋白质表达 ,分析蛋白质在细菌中的表达分布 ,进行凝胶自动扫描分析 .结果 :序列分析表明 ,与GenBank中已登录的Apr 2cDNA编码区序列比较 ,完全一致 .表达的融合蛋白占菌体总蛋白质的 4 0 %以上 ,主要以包涵体的形式存在 .结论 :成功的获得了细胞凋亡模型HL 6 0中Apr 2cDNA编码区的克隆及其融合蛋白表达产物 .

广西医学贫困生心理健康状况分析

目的了解广西医学院校贫困大学生心理健康状况,为在医学院校开展贫困生心理健康教育提供理论依据。方法采用症状自评量表(SCL-90)和大学生人格问卷(UPI)对我区三所医学院校455名贫困生进行心理健康状况调查。结果贫困生的各因子得分均显著高于国内青年组常模(P<0.01);除躯体化、敌对因子外,贫困生SCL-90其它因子得分均显著高于非贫困生(P<0.01);贫困生UPI一、二类学生检出率明显高于非贫困生(χ2=14.76,P<0.01)。结论广西医学院校贫困生的心理健康水平不高,需学校、社会及家庭各方面的共同努力方能最终解决问题。

TGFβ1对肺成纤维细胞中转录因子SP1、AP1和Smad3-Smad4活性的影响

目的:检测转化生长因子β1(TGFβ1)对大鼠肺成纤维细胞(RLF)中转录因子SP1、AP1和Smad3-Smad4活性的影响并探讨其意义。方法:进行大鼠肺成纤维细胞的原代分离培养,应用10μg/L TGFβ1进行处理,通过凝胶阻滞电泳(EMSA)、免疫印迹和免疫组化染色等方法,检测照射后转录因子SP1、AP1和Smad3-Smad4活性的变化及Ⅰ型胶原和Ⅰ型组织纤溶酶原激活物抑制剂(plasminogen activator inhibi-torⅠ,PAI-1)表达的变化。结果:正常RLF中AP1和Smad3-Smad4形成弱阻滞条带,SP1无阻滞条带形成。以10μg/LTGFβ1处理后,3种转录因子所形成的阻滞条带明显增强,PAI-1和Ⅰ型胶原的表达增多。结论:一定浓度的TGFβ1可促进RLF中转录因子SP1、AP1和Smad3-Smad4的活化,并进而增加PAI-1和Ⅰ型胶原的表达。

九项呼吸道病原体IgM检测500例分析

上呼吸道病原体90％以上为病毒，其次为支原体、衣原体和细菌等。呼吸道感染起病较急，进展快，需及时明确病原微生物种类，以便临床进行针对性治疗。

母婴血型不合新生儿溶血病及其血型血清学检测的临床意义

新生儿溶血病(HDN)由母婴血型不合而引起。可造成胎儿流产或新生儿黄疸、贫血、肝脾肿大、水肿等,是一种免疫性溶血性疾病。本文简述了HDN的致病机制与临床表现及血型血清学检测在HDN预防及诊断中的价值。

中国人群RhD阴性个体中D基因多态性的研究

目的 建立 RHD基因分型技术 ,分析中国人群 Rh D阴性个体的 RHD基因多态性分布状况。方法 设计 8对特异性引物扩增 RHD 7个外显子 ( 3 ,4,5 ,6,7,9,1 0 )和内含子 4,应用 PCR-SSP技术 ,对 1 1 5例经常规血清学试验和吸收放散试验鉴定的“Rh阴性个体”,进行 D基因多态性的研究。结果 1 1 5例 Rh D阴性个体 ,用吸收放散试验检测后分成 2组 ,一组被确认为 Rh D阴性表现型共 88例 ( 76.5 % ) ,另一组是 Del(放散 )表现型共 2 7例 ( 2 3 .5 % )。应用 PCR-SSP法对1 1 5例 Rh D阴性个体作 RHD内含子 4检查 ,结果 Del型个体都显示有 RHD内含子 4;对 1 1 5例中的 1 7例进一步作 RHD的 7个外显子的鉴定 ,其中 6例 Del带有完整的 RHD基因 ,1 1例经吸收放散试验确认为 Rh D阴性表现型的个体则显示 4种情况 :7例全部缺失 RHD基因 ,2例 ( 1例 cc Ee和 1例 Ccee)带有完整的 RHD基因 ,1例缺失 RHD的第 5外显子和 1例仅携带第 1 0外显子。结论 PCR-SSP技术可用于 RHD基因的研究。常规血清学鉴定的 Rh D阴性者中存在较高比例的 Del型 ,且有可能带有完整的 RHD基因。而被吸收放散试验确认为 Rh D的阴性个体有可能携带 RHD基因并显示出多态性 ,这些个体中有 Rhc抗原表达者 ,有别于文献中认为全属 Rh C抗原表达者的报?

γ射线对C57BL/6J和C3H/HeN小鼠肺成纤维细胞生物学行为影响的比较研究

目的比较C57BL/6J和C3H/HeN两种小鼠肺成纤维细胞以不同剂量的60Coγ射线照射后生物学行为的异同。方法原代分离培养C57BL/6J和C3H/HeN两种小鼠肺成纤维细胞(LF),应用2、4、6和8Gy的60Coγ射线照射后,通过MTT比色法、流式细胞术、AgNOR染色和免疫荧光细胞化学染色法,检测照射后两种LF的增殖活力、细胞周期以及a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)表达的变化。结果以2~8Gy照射后,C57BL/6J和C3H/HeN小鼠的LF增殖活力与正常对照组相比较未见明显增强。照射后,C57BL/6J小鼠的LF非整倍体增多,a-SMA高表达,MMP-1的表达呈弱阳性,TIMP-1的表达呈增强趋势。照射后,C3H/HeN小鼠的LF出现G2-M期阻滞,a-SMA的表达减弱至消失,MMP-1和TIMP-1的表达均呈增强趋势。结论以60Coγ射线照射后,C57BL/6J和C3H/HeN两种小鼠的LF生物学行为不同,C57BL/6J小鼠的LF呈“活化”状态,为该种小鼠易发生肺纤维化的细胞学基础提供了实验依据。

Ag43/FGFR-1嵌合蛋白疫苗抗小鼠纤维肉瘤血管生成的实验研究

目的:利用Antigen43(Ag43)/成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR-1)重组嵌合蛋白作为疫苗,了解其是否具有抑制小鼠肿瘤生长的作用,并初步探讨其作用机理。方法:40只BALB/c雌性小鼠接种Meth A细胞后第7天,随机分为Ag43/FGFR-1蛋白免疫组(AF组)、Ag43蛋白免疫组(Ag43组)、FGFR-1蛋白免疫组(FGFR-1组)和生理盐水对照组(NS组)4组,每组10只,观察免疫治疗后的荷瘤小鼠肿瘤体积和生存曲线,分别用免疫组织化学方法检测肿瘤组织微血管密度(MVD),免疫印迹(W est-ern blot)方法检测抗自身FGFR-1的抗体,酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测分泌抗自身FGFR-1抗体的B淋巴细胞的数量。结果:Ag43/FGFR-1组与FGFR-1蛋白、Ag43蛋白、生理盐水对照组肿瘤组织MVD计数分别为11.9±2.3、59.6±3.8、60.6±1.2和61.9±3.4(P<0.01);与对照组相比,Ag43/FGFR-1组肿瘤体积明显变小(P<0.01),存活时间明显延长(P<0.01),血清中发现含有抗自身FGFR-1的抗体且发现小鼠脾脏中分泌抗自身FGFR-1抗体的B淋巴细胞数目明显增多(P(0.01)。结论:Ag43/FGFR-1蛋白质疫苗能够诱导荷瘤鼠产生特异性免疫反应,从而抑制肿瘤血管生成和肿瘤的生长。

VEGF、PCNA在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)、增殖细胞核抗原(PCNA)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测了40例非小细胞肺癌和10例正常肺组织中VEGF、PCNA的表达情况,并分析其与临床病理分期的关系。结果:40例非小细胞肺癌的VEGF阳性表达率为72.5%,明显高于正常对照组(20%),差异有统计学意义(P<0.05),但临床Ⅲ～Ⅳ期的VEGF阳性表达率(80%)与Ⅰ～Ⅱ期的表达率(65%)相比,差异无统计学意义(P>0.05)。PCNA在非小细胞肺癌中的阳性表达率为62.5%,明显高于正常对照组(20%),差异有统计学意义(P<0.05),但临床Ⅲ～Ⅳ期的PCNA阳性表达率(65%)与Ⅰ～Ⅱ期的表达率(60%)之间无明显差异(P>0.05)。结论:VEGF和PCNA可以作为评价非小细胞肺癌预后的重要指标。

鸡CAPN1基因多态性及其与肉质性状的关联分析

采用聚合酶链式反应-单链构象多态(PCR-SSCP)方法对147只寿光鸡CAPN1基因第4外显子进行多态性检测,分析其与部分肉质性状的关系。在CAPN1基因第4外显子上共检测到3种基因型AA、AB和BB,它们的基因型频率分别为0.286、0.510和0.204。方差分析结果表明:在寿光鸡群体中,BB基因型个体的胸肌pHu值显著高于AA基因型个体(P<0.05);AA基因型个体的肌内脂肪含量显著高于BB基因型个体(P<0.05)。

238例女性T_1期乳腺癌临床特征分析

目的分析T1期(肿瘤直径<2cm)原发性乳腺癌女性患者绝经前后在肿瘤大小、病理分类、淋巴结转移率和数目以及相关因子中存在的差异。方法常规病理检验以及应用免疫组化分别测定绝经前乳腺癌患者(118例)和绝经后乳腺癌患者(120例)的ER、PR。结果两组患者在肿瘤大小上无明显差异。但绝经前乳腺癌患者浸润导管癌的百分比为83.9%,绝经后乳腺癌患者的浸润导管癌百分比为62.5%(P<0.01);两组淋巴结转移率分别为48.3%和25.8%(P<0.05);两组ER和PR阳性伴淋巴结转移的比例比较(P<0.05)。结论绝经前乳腺癌患者和绝经后乳腺癌患者在病理分类、淋巴结转移率及数目、ER、PR阳性伴淋巴结转移上差异有显著性。对于T1原发性乳腺癌患者不论有无淋巴结转移,均应行癌肿切除伴Ⅰ、Ⅱ级淋巴结清扫。

人肥大细胞类糜蛋白酶序列结构分析及B细胞表位预测

根据肥大细胞Chymase的氨基酸序列，借助ProScale服务器，采用Hopp＆Woods的亲水性方案、Janin可及性参数、Welling抗原性参数及吴氏综合预测方法对肥大细胞类糜蛋白酶的二级结构及B细胞表位进行预测．结果推测最有可能的B细胞表位位于类糜蛋白酶的N端第5～12区段、第94～101区段、第172～179区段和第199～206区段内或它们的附近．本研究结果有助于确定肥大细胞类糜蛋白酶的B细胞表位，可为深入研究类糜蛋白酶的结构与功能及新型抑制剂的设计提供线索．

广西百色市3个民族人群RhD阴性和弱表达D表型分布的比较研究

目的对广西百色市壮、汉、苗族人群的Rh血型分布进行调查并与弱表达D表型的分布进行比较研究。方法 ABO血型采用正定玻片法,Rh血型采用Rh抗D单克隆抗体测定,另外对RhD阴性个体应用聚合酶链反应(PCR-SSP)技术检测RhD基因外显子和RhCE基因。结果居住在广西百色市的壮、汉、苗族人群RhD阴性率分别为3.86%、0.93%、8.79%,d基因频率分别为0.187、0.079、0.215。壮族人群RhD阴性血清学表型分布极不平衡,以cde多见,占56.1%,Ccde次之,占29.1%,其他表现型频率较低;34例弱D标本血清学表型主要为cDEe(47.1%)和CcDe(38.2%),其他表型所占频率较少。结论广西百色市壮、苗族等少数民族人群的Rh血型比例较高,可能与本地区Rh溶血症发生率相对较高相关,因此常规检查Rh血型对避免Rh血型不合引起的溶血性输血反应、新生儿溶血具有重要意义。

PI3K抑制剂对正常人外周血单个核细胞糖皮质激素抵抗的作用

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonarydisease，COPD）是以气流受限为特征的全身慢性进行性疾病，炎症是重要的发病机制之一，糖皮质激素作为一种有效的抗炎药物，在炎症性疾病的治疗中起着至关重要的作用，但由于COPD患者体内存在糖皮质激素抵抗，使激素对COPD慢性炎症的疗效较差[1]。