咪唑安定对机械通气患者长程镇静的疗效观察

目的 :观察咪唑安定在机械通气患者中的应用 ,评价其长程镇静效果。方法 :2 0例符合纳入和排除标准的长程机械通气患者 ,给予咪唑安定静脉注射泵持续泵入 ,负荷剂量 0 1～ 0 15mg/kg ,维持量 0 0 5～0 15mg/kg/h ,观察镇静评分 (Ramsayscore,RS)、血压、脉搏、脉搏血氧饱和度 (SpO2 )及呼吸频率的变化。结果 :所有对象在给予咪唑安定负荷剂量后 ,RS从 1级下降至 3～ 5级 ,达到很好的镇静要求 ,且在维持量下能保持镇静水平的稳定 ,总有效率 10 0 % ,患者循环系统各指标在用药前后和维持过程中均无明显差异 (P >0 0 1) ,自主呼吸频率用药后 (平均 18 0± 6 7次 /分 )与用药前 (平均 2 5 4± 10 7次 /分 )相比有明显改善 (P <0 0 1)。结论 :咪唑安定静脉持续注射对机械通气患者有很好的长程镇静效果 ,循环影响小 ,能很好地保持患者的自主呼吸与机械通气协调 ,减少人机对抗。

院前急救风险现状分析与管理对策

院前急救主要是指医护人员到达事发地对患者进行现场抢救、监护以及运送的医疗过程,其在日常急救、突发公共卫生事件救援以及重大活动保障等情况下承担着重要的救援职责,是保障人民生命安全、城市健康发展的重要环节之一,是急症医疗服务系统的首要环节,因此保障院前急救救治效果是社会及国家关注的重点。本文对当下国内院前急救模式、院前急救存在的风险现状进行分析,并提出具体的管理建议对策,旨在推动我国医疗事业进步,保障民生健康。

人骨髓、脐血CD34^+干细胞体外扩增的树突状细胞的表型及其T细胞刺激活性分析

目的:从人骨髓造血前体细胞体外培养扩增树突状细胞(dendritic cells,DCs),测定其表型及T细胞刺激活性.方法:采用Mini-MACS分离技术,从正常人骨髓、脐血分离CD34^+造血干细胞,体外以重组hGM-CSF,hTNF-α,hIL-3诱导培养2周,流式细胞术检测扩增细胞的表面表型及细胞内IL-12的表达,体外同种混合淋巴细胞反应检测扩增DCs的T细胞刺激活性.结果:从正常人骨髓、脐血分离得到高纯度(>90%)的CD34^+造血干细胞,经重组hGM-CSF,hTNF-α的共同诱导培养,扩增得到大量DCs,加人hIL-3可以进一步增加DCs产量;FACS检测表明,扩增的DCs表达HLA-DR,CD40,CD54,CD80,CD86分子,细胞内有hIL-12的P35,P40亚基的表达;与外周血单核细胞培养生成的DCs相比,由CD34^+干细胞扩增的DCs具有更强的激发同种T细胞增殖的能力.结论:人CD34^+干细胞体外经诱导培养,可以生成大量功能成熟的DCs,从而为进一步开展DCs的基础及临床研究打下了基础.

流式细胞术计数CD34阳性细胞的标准化与质量控制

用流式细胞术计数脐带血 ,外周血及其采集物中的CD34+ 细胞数已被普遍采用。然而 ,不同实验之间的CD34+ 细胞计数差异非常大。本文就影响结果的主要因素 ,目前国际上采用的标准化方案和不同方案之间的比较进行综述。我们实验室应用ProCOUNT试剂盒检测了 4 5例脐带血 ,12份正常骨髓和 4例外周血采集物中的CD34+ 细胞的数量 ,结果表明ProCOUNT为标准化程度较高的方法 ,有利于减少不同实验之间CD34+

复苏压力对大鼠未控制出血性休克早期复苏效果的影响

目的比较不同的复苏压力对大鼠未控制出血性休克（uncontrolled hemorrhagic shock，UHS）早期复苏效果的影响。方法采用脾脏损伤的未控制出血性休克模型。48只SD大鼠根据早期复苏压力的不同分为6组：不复苏组（对照）和40、50、60、70、80mmHg复苏组，每组8只。伤后平均动脉压（mean arterial pressure，MAP）降至40mmHg时开始低压复苏，用乳酸林格液加羟乙基淀粉（2：1比例）复苏，使MAP维持在各组设定的水平，持续1h，对照组此期不输注任何液体，然后结扎脾动脉止血，各组均行充分复苏2h。记录各组血流动力学、失血量、血细胞比容、血气、肝功及存活时间。结果60、70、80mmHg复苏组的出血量显著高于另3组（P〈0．05），50mmHg复苏组的存活时间显著长于对照组和80mmHg复苏组（P〈0．05）。40mmHg复苏组和80mmHg复苏组的血流动力学指标显著低于50、60、70mmHg复苏组（P〈0．05）。70、80mmHg复苏组的酸中毒显著轻于40mmHg复苏组（P〈0．05）。40～60mmHg复苏组的血细胞比容显著高于80mmHg复苏组（P〈0．05）。40mmHg复苏组的肝功指标显著高于50、60、70mmHg复苏组（P〈0．05）。结论未控制出血性休克的早期复苏中，血压过高会增加出血量，缩短存活时问；血压过低则抑制心功能，加重肝功能损害。血压在50～60mmHg较为合适。

逆转录病毒载体介导的人多药耐药基因(mdr-1)导入小鼠造血细胞的实验研究

本文利用逆转录病毒介导的基因转移方法，将人多药耐药基因ｍｄｒ－１导入小鼠造血细胞，并对转基因造血细胞的耐药性及移植特性进行了初步研究。含人ｍｄｒ－１ｃＤＮＡ的重组逆转录病毒载体质粒，经脂质体介导的基因转移方法导入包装细胞ＰＡ３１７，再经秋水仙素筛选。获得产逆转录病毒的包装细胞，其病毒滴度可达１．２×１０５ｃｆｕ／ｍｌ。在含小鼠骨髓贴壁细胞层的长期培养体系中，利用逆转录病毒上清对造血细胞进行转染。通过抗性ＣＦＵ－ＣＭ检测，其基因转移效率可达７．０％。将转基因造血细胞移植经照射预处理的小鼠，可重建受体小鼠造血功能。小鼠造血重建后４个月，其骨髓造血细胞与外周血细胞可检测到人ｍｄｒ－１ｃＤＮＡ。

异基因造血干细胞移植并发致死性间质性肺炎

目的探讨小儿异基因造血于细胞移植并发间质性肺炎（IP）的发病病因、临床特点、危险因素及防治措施。方法根据尸解病理检查及聚合酶键反应技术对病毒病原学检测结果，结合临床移植资料综合分析。结果14例移植患儿中并发IP3例（3／14），分别死于十19天、＋76天、＋150天;3例IP中2例移植前后外周血及尸解肺组织直到CMV包涵体;4例3～4应急性GVHD患儿中3例并发IP，10例0～2度急性GVHD无1例并发IP。结论IP是移植早期死亡的重要原因之一，巨细胞病毒感染是IP的主要病原，GVHD严重程度与移植后并发IP密切相关.

用微血管内皮细胞体外扩增的骨髓造血干细胞重建大剂量化疗后的小鼠造血功能

目的探索造血干细胞体外培养扩增的新方法。方法采用磁性细胞分离技术纯化小鼠骨髓血管内皮细胞，将其与骨髓造血细胞一起培养。培养的骨髓细胞移植给大剂量化疗后的小鼠，观察其造血重建功能。结果纯化的血管内皮细胞具有鹅卵石样细胞形态，表达多种内皮细胞相关抗原如ＣＤ３１，ＣＤ３４，ＩＣＡＭ１，ＶＣＡＭ１和凝集素ＢＳ１结合位点。将内皮细胞与骨髓造血细胞共同培养后，骨髓细胞数明显增加，其中６０％为原始的造血细胞，后者移植后能有效重建血功能。结论骨髓微血管内皮细胞能促进造血干细胞体外扩增，并有效阻止其分化。扩增的造血干细胞具有造血重建功能。

脐血HLA分型的影响因素

脐血含丰富的造血干细胞，造血干细胞移植是治疗多种危重疾病患者的有效手段。收集脐血造血干细胞移植自１９８９年第１例ＨＬＡ全相合同胞获成功起，至今全世界已超过２３８例。脐血移植前的ＨＬＡ分型是决定其移植成功的重要环节之一。然而由于脐血在收集过程中时间、部...

HGFs联合对体外人脐血造血干细胞及SCID小鼠体内扩增作用的研究

本实验应用外源性重组人多种造血生长因子(rhHGFs)处理人HSC/SCID小鼠模型,以体外半固体培养法及FCAS检测CFU-GM、CFU-GEMM及CD34^+细胞。从而评价HGFs对受鼠体内人造血干细胞的扩增作用。结果:人脐血及骨髓MNC经孵育24小时后CD34^+细胞含量,CFU-GM、CFU-GEMM产率皆得到明显扩增(P<0.01),且脐血组优于骨髓组(P<0.01)。输脐血MNC+HGFs组小鼠骨髓MNC中人CD34^+细胞含量、CFU-GM及CFU-GEMM产率皆明显高于单输脐血MNc组(P<0.01)及输骨髓MNC+HGFs组(P<0.01),表明脐血造血干细胞对HGFs作用更敏感,扩增潜能更强。

非冷冻保存外周血干细胞移植的初步研究(附2例病例)

外周血干细胞移植（ＰＢＳＣＴ）以其重建造血迅速等优点，正逐渐受到重视，但是ＰＢＳＣＴ需要繁琐的低温冷冻保存技术及昂贵的冷冻设备，限制了其广泛应用。笔者用４℃保存的外周血干细胞进行自体移植，现报告如下。１材料与方法１．１细胞因子粒－巨噬细胞集落刺激因子...

肠外营养支持在造血干细胞移植中的应用

目的：观察造血干细胞移植中应用肠外营养支持以补充口服营养不足的疗效。方法：对１０例造血干细胞移植病人于移植后第２天开始给予肠外营养支持治疗，并观察临床症状改善、体重及血清白蛋白增加、骨髓造血恢复等情况。结果：全组病人使用肠外营养后临床症状缓解，体重及血清白蛋白较前明显增加，均获造血重建及造血干细胞移植成功。结论：肠外营养支持加口服饮食是造血干细胞移植中迅速改善病人的营养状况、顺利度过骨髓空虚期、促进骨髓造血重建、确保移植成功的重要措施。

脐血造血细胞体外集落培养最佳收获时机的探讨

目的探讨脐血(CB)多系造血集落培养在不同培养条件下脐血造血细胞体外扩增的最佳收获时机。方法将从新鲜CB标本中分离出的单个核细胞(MNC)分别接种于已建立的无血清培养基,该培养基分别含单用人骨髓基质细胞、单用细胞因子及细胞因子联合入骨髓基质细胞(HBMSC)支持培养体系。在0、6、10及14d各时间点分别取细胞进行巨细胞集落形成单位(CFU-MK)、红系爆式集落形成单位(BFU-E)及粒单细胞集落形成单位(CFU-GM)培养。结果在体外培养过程中,第10d时各组CFU-MK、BFU-E及CFU-GM数均高于组内其它时间点(P<0.05);在含HBMSC支持培养的组集落生成数优于其它组(P<0.05)。结论脐血MNC体外培养过程中,第10d可能是收获的最佳时机。FIBMSC能更好地维持造血干/祖细胞的活性,使其集落形成能数得到有效扩增。

复合扩增STR位点的DNA分型技术在异基因造血干细胞移植植活证据的研究进展及其应用

异基因造血干细胞移植植活证据研究近年已取得了重要进展 ,从免疫分型到DNA分型均有长足的发展。分型方法包括红细胞血型、HLA抗原、性别鉴定、人类DNA指纹图和复合扩增STR位点的DNA分型等。本文综述了复合扩增STR位点的DNA分型方法的特点及近年来研究进展及临床应用情况。

不同造血生长因子对脐血有核细胞体外扩增作用的实验研究

目的：探讨造血生长因子不同组合方式对脐血有核细胞的扩增作用以及脐血扩增后Ｔ淋巴细胞和ＨＬＡ－ＡＢ、ＤＲ阳性细胞变化情况。方法：在脐血有核细胞体外培养体系中分别加入不同组合的细胞因子，观察细胞数、ＣＤ３４＋细胞、ＣＦＵ－ＧＭ、Ｔ４（ＣＤ４＋ＣＤ８－ＣＤ３＋）细胞、Ｔ８（ＣＤ４－ＣＤ８＋ＣＤ３＋）细胞以及ＨＬＡ－ＡＢ、ＤＲ阳性细胞的变化。结果：脐血有核细胞在体外液体培养体系中，经重组人干细胞因子（ｒｈＳＣＦ）、白细胞介素（ＩＬ）－３、ＩＬ－６、粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）、粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）和红细胞生成素（Ｅｐｏ）的作用下扩增效果最佳。结论：脐血有核细胞在各种造血生长因子的协同作用下可以在体外扩增。脐血扩增后Ｔ４、Ｔ８细胞减少，可能会降低脐血移植急性ＧＶＨＤ发生，但ＨＬＡ－ＡＢ和ＨＬＡ－ＤＲ阳性细胞数急剧上升，增加了免疫排斥的可能性。

HX-97方案对外周血造血干细胞动员、采集和移植后造血重建的作用

为提高外周血造血干细胞动员、采集、和移植后造血重建的效率，作者从１９９７ 年４ 月至１９９９ 年６月，进行了２２ 例异基因或自体外周血造血干细胞移植，对外周血造血干细胞动员、采集和移植后造血重建方案（ＨＸ－９７ 方案）作了系统观察。ＨＸ－９７方案的主要内容是：①外周血造血干细胞动员，采用ｒｈＧ－ＣＳＦ３００μｇ／天，皮下注射，共６ 天，第６ 剂在干细胞采集前９０分钟用； ②自体外周血造血干细胞动员采用大剂量化疗加造血刺激因子，化疗强度务必使外周血ＷＢＣ计数＜ １．０×１０９ ／Ｌ，待外周血ＷＢＣ计数从最低点刚显示回升时，开始使用ｒｈＧ－ＣＳＦ；③移植后恢复造血序贯使用ｒｈＧＭ－ＣＳＦ和ｒｈＧ－ＣＳＦ。造血干细胞动员后用ＣＯＢＥＳｐｅｃｔｒａ 血细胞分离机连续采集外周血单个核细胞。结果：２２ 例移植中１６ 例一次采集即成功，６ 例作了第二次采集。按受者体重计，采集后计数ＭＮＣ细胞数２．５～１０．７×１０８／ｋｇ；ＣＤ３４＋ 细胞２．５～２０．０×１０６／ｋｇ；ＣＤ３４＋ ＣＤ３３－ 早期造血干细胞１．８～７．５×１０６／ｋｇ；ＣＤ３４＋ ＣＤ３３＋ 晚期造血祖细胞０．７～１２．５×１０６ ／ｋｇ；ＣＦＵ－ＧＭ 集落３．５～６．

联合使用MACS、FACS富集纯化造血干/祖细胞及其亚群

目的建立获得高纯度ＨＳＣ／ＨＰＣ细胞群的方法，用于研究造血干／祖细胞（ＨＳＣ／ＨＰＣ）的功能与生物学特性。方法利用免疫磁珠分选法（ＭＡＣＳ）从新鲜脐血和骨髓穿刺液中富集ＣＤ３４＋细胞，再用荧光激活细胞分选术（ＦＡＣＳ）分选纯化ＣＤ３４＋／ＣＤ３８－和ＣＤ３４＋／ＣＤ３８＋细胞亚群。结果ＭＡＣＳ分选的ＣＤ３４＋细胞群纯度可达９５％；ＦＡＣＳ分选的ＣＤ３４＋／ＣＤ３８－和ＣＤ３４＋／ＣＤ３８＋两细胞亚群纯度均可达９９％以上。结论联合使用ＭＡＣＳ和ＦＡＣＳ可在数小时内大量纯化ＨＳＣ／ＨＰＣ及其中重要细胞亚群。