抑制PI3K/AKT/GSK-3β信号通路对冈田酸诱导原代星形胶质细胞衰老情况的影响

目的研究冈田酸(OA)诱导的原代星形胶质细胞中通过抑制磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/糖原合成激酶(GSK)-3β信号通路对p21、p53衰老蛋白表达水平和衰老阳性细胞表达的影响,探讨OA诱导星形胶质细胞衰老情况及相关机制。方法免疫荧光鉴定原代星形胶质细胞,CCK8法筛选OA药物浓度,然后用LY294002、OA分别处理或联合处理细胞,Western印迹测定细胞中p-PI3K、p-AKT、p-GSK-3β、p21、p53蛋白表达水平的变化及β-半乳糖苷酶染色检测衰老阳性细胞。结果免疫荧光鉴定原代星形胶质细胞结果显示其纯度达到95%以上,CCK8法筛选出OA药物处理浓度为30 nmol/L,OA组中p-PI3K、p-AKT、p-GSK-3β、p21、p53蛋白表达较正常对照组显著升高(P<0.05),衰老阳性细胞数明显增加,但LY294002+OA组p-PI3K、p-AKT、p-GSK-3β、p21、p53蛋白表达水平较OA组明显降低,并且衰老阳性细胞数也明显减少(P<0.05)。结论通过OA处理能使星形胶质细胞发生衰老,LY294002处理能通过抑制PI3K/AKT/GSK-3β信号通路缓解细胞的衰老情况,提示高磷酸化Tau诱导星形胶质细胞衰老可能与PI3K/AKT/G3K-3β信号通路密切相关。

基于T1纹理特征的阿尔茨海默病性别差异研究

目的探讨阿尔茨海默病(AD)进程中3D T1纹理特征的性别差异,以及对不同性别AD患者诊断的预测能力。方法招募77例AD患者(男34例,女42例),74例遗忘型轻度认知障碍aMCI患者(男35例,女39例)及75例健康对照组(HC)(男35例,女40例),采集高分辨3D T1结构像。选取与AD脑损害关系密切的脑区作为感兴趣区域(ROI),进行纹理特征提取和特征筛选,分性别进行分析,利用支持向量机(SVM)进行分类和预测。结果AD组、HC组、aMCI三组不同性别进行两两比较,不同分组得出一些识别指数相对较高的脑区,并且发现女性患者与男性患者中识别指数较高的脑区存在明显差异,且女性患者分类的识别指数(曲线下面积、准确率、灵敏度、特异度)普遍高于男性。结论AD进程中纹理特征存在明显性别差异,女性患者的分类预测能力更好,提示了AD性别差异研究的重要性。本研究为AD性别特异性的早期识别提供了一些可靠的生物标记,可能为AD的早期诊断及治疗提供帮助。

人苯丙氨酸羟化酶基因克隆及其原核表达质粒的构建

【目的】克隆健康人苯丙氨酸羟化酶基因全长cDNA序列,构建并鉴定其原核表达质粒pTrcHisB/PAH。【方法】采用RT-PCR方法从人肝组织中扩增PAH基因全长cDNA,T/A克隆到pMD18-T载体中,双酶切后将cDA亚克隆入pTrcHisB载体,构建pTrcHisB/PAH质粒,经限制性内切酶鉴定并测序。【结果】人PAH基因cDNA正确克隆入pTrcHisB表达载体,与Genebank中PAH基因序列一致。【结论】成功构建pTrcHisB/PAH表达质粒,为进一步进行研究PAH蛋白表达和重组蛋白活性鉴定奠定基础。

有氧体操运动对社区轻度认知障碍老年人认知功能的影响

目的探讨有氧体操运动对社区轻度认知功能障碍(MCI)老年人认知功能的影响。方法 2016年5～9月,便利抽样法选取大庆市五湖社区和黎明社区居住的MCI老年人,随机分为干预组(41例)、对照组(42例)。对照组进行常规社区健康教育;干预组在对照组基础上实施有氧体操运动,每次≥45 min,每周≥5次,共3个月。结果干预后,干预组血压和总胆固醇明显低于对照组(P<0. 05);蒙特利尔认知评估量表总分、视觉网与执行功能、注意力、语言和延迟记忆明显高于对照组(P<0. 05)。结论有氧体操运动可以改善MCI老年人的认知功能,延缓老年痴呆的发生。其具有简单易行、不受器械和场地限制的特点。

PKA、GSK-3β和cdk5对微管相关蛋白tau的位点特异性磷酸化

目的:研究cAMP依赖的蛋白激酶(cAMPdependentproteinkinase,PKA)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和细胞周期依赖性蛋白激酶5(cyclin-dependentkinase5,cdk5)在体外和培养的细胞中对tau蛋白位点特异性磷酸化的调节作用。方法:以人最长的异构体tau441作为底物,通过蛋白质印迹分析,观察以上3种酶对tau蛋白位点特异性磷酸化的调节作用。结果:PKA在体外能够磷酸化Ser214、Ser262、Ser409,但在培养的细胞中,PKA的激活仅使得tau蛋白在Ser214位点的磷酸化增加,而不能磷酸化Ser262和Ser409。在体外和培养的细胞中,GSK-3β和cdk5均能磷酸化tau蛋白许多位点,包括Thr181、Ser199、Ser202、Thr205、Thr212、Thr217、Ser396、Ser404,使得tau蛋白的迁移减慢。结论:在培养的细胞中,PKA的激活使得tau蛋白在Ser214位点的磷酸化增加。GSK-3β能更好地磷酸化tau蛋白微管结合域下游的磷酸化位点,而cdk5则更容易磷酸化其上游的位点。

无痛胃镜检查患者术前的护理干预

目的:探讨护理干预在无痛胃镜检查患者术前准备工作中的重要性。方法:实施3种护理干预及健康教育指导。结果:有效地消除了患者恐惧、紧张、焦虑的心理,使患者在最佳心理状态下接受检查。结论:护理干预对无痛胃镜患者检查的顺利进行具有重要意义。

基于子波变换阿尔茨海默病脑电信号多尺度定量特征的研究

目的：研究阿尔茨海默病（AlzheimerDisease，AD）脑电信号的多尺度定量特征和相位平均波形。方法：采集32例重度AD患者，30例轻度AD患者和30例正常对照的清醒安静闭目状态下的脑电信号，进行Gauss连续子波变换，提取脑电信号的时频分布特征和多尺度功率谱分布特征；应用条件采样和相位平均的方法提取脑电信号分尺度相位平均波形。结果：AD脑电信号的时频结构特征表现为尺度单一，节律性活动紊乱，而正常对照脑电信号尺度结构丰富，在0．1Hz、1Hz和10Hz频带上形成稳定的节律性活动。AD患者脑电信号的多尺度功率谱分布特征表现为在1Hz附近出现窄而高的功率峰，而正常对照老年人脑电信号表现为在0．1Hz、1Hz和10Hz附近出现三个宽而低的功率峰。多尺度相位平均波形的结果显示，不同导联脑电信号第9尺度（频率中心10Hz）的相位平均波形的波长在重度AD组、轻度AD组和正常对照组三组之间比较存在显著差异（P〈0．01），组间两两比较也存在显著差异（P〈0．05）。不同导联脑电信号第9尺度的相位平均波形的波长与简易智能精神状态量表（MMSE）评分之间存在负相关（P〈0．01），说明这一参数与病情严重程度相关。结论：子波分析适用于痴呆病人脑电信号的定量分析，研究表明脑电信号的时频结构、多尺度功率谱分布和第9尺度相位平均波形的波长可以作为AD诊断和评估的定量电生理指标。

言语交流对阿尔茨海默病患者的智能状态和生活质量的影响

目的从言语交谈护理角度探讨能够延缓阿尔茨海默病进展的措施。方法收取门诊阿尔茨海默病患者资料,随机分为组,给予言语干预。结果言语交谈护理干预组在生活质量上优于对照组,且两组相比有统计学意义(P<0.05)。结论言语交谈能够改善阿尔茨海默病的智能状态及生活质量,减慢病情进展。

老年阿尔茨海默病患者生活方式中危险因素的病例对照研究

目的调查老年阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)患者的生活方式,以期为老年AD的防治提供依据。方法便利抽样法选取在宁波市康宁医院门诊就诊和住院治疗的AD患者240例为病例组;对照组按照性别、年龄(±3岁)、文化程度作为配对条件,1∶2配比在病患同社区选择非AD老年人为对照组(n=480)。两组患者均采用一般情况调查表和自制的生活方式调查表进行调查,并分析结果。结果发现吸烟为AD的危险因素,居住情况、社会活动、体育锻炼、食用蔬菜水果、休闲活动和饮茶则为保护因素,差异有均统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论舒适休闲的生活方式、规律的体育锻炼、良好的社会支持和健康合理的饮食是AD的保护因素。