Hendra病毒一步法Real-time RT-PCR检测方法的建立

目的建立针对Hendra病毒N基因的一步法RealtimeRT-PCR检测方法，用于Hendra病毒感染样本的快速检测和准确定量。方法针对Hendra病毒的保守基因N设计引物和探针，构建体外转录的RNA片段作为标准品，建立一步法Real-timeRT-PCR反应方法并分析敏感性和特异性。结果所设计的引物经Blast检索可以用于检测所有已知的Hendra病毒株。本研究建立的一步法Real-timeRT-PCR方法可以特异性检测出Hendra病毒，不与Nipah病毒产生交叉反应。检测灵敏度为2．6×10^0～2．6×10^1 copies／μl。标准曲线的线性范围为2．6×10^1-2．6×10^7 copies／μl。结论本研究建立的一步法Real-time RT—PCR方法敏感性和特异性较高，且不易出现污染引起的假阳性结果，适合用于Hendra病毒感染样本的检测。