核酸定量检测用于优化艾滋病“一站式”诊断流程的研究

目的探讨联合应用HIV核酸定量检测(病毒载量,viralload,VL)与HIV抗体确证试验(Western-blotting,WB)优化艾滋病“一站式”诊断流程,建立有效可行的补充试验检测方案。方法2014年3—9月,收集广西6个现场点县医院常规HIV-1抗体筛查试验有反应的样本,同时进行VL和WB检测,比较不同补充试验检测方案的诊断效果与检测成本。结果6个现场点共有185例新发现HIV抗体筛查试验有反应,以男性为主(占74.6%),年龄中位数为52岁。在WB方法中,HIV-1抗体阳性有174例,占94.1%;在VL方法中,VL>5000拷贝/mL有181例,占97.8%。在174例HIV-1抗体阳性的样本中,VL为20、20~5000、5001~100000及>100000拷贝/mL分别有2例(1.1%)、2例(1.1%)、51例(27.6%)及130例(70.3%)。10例HIV-1抗体不确定的样本,其VL均为100000拷贝/mL。WB、VL、WB/VL和WB+VL四种补充试验方案可明确诊断HIV感染的比例分别为94.1%、97.8%、99.5%和99.5%,其检测成本分别为112750、146050、116380和17300元。结论艾滋病“一站式”诊断流程以WB/VL检测方案为最优,即WB检测结果为HIV-1抗体不确定或阴性的样本再做VL检测,该方案可以提高HIV感染诊断的准确性和减少检测成本。

EasyQ方法检测HIV-1病毒载量的质量控制

目的探讨采用NucliSens EasyQ核酸扩增检测分析系统检测HIV-1病毒载量的可行性和质量控制,分析提高检测质量而采取的措施。方法采用NucliSens EasyQ核酸扩增检测分析系统检测HIV-1病毒载量,汇总和分析检测情况。结果检测了2 090例血浆标本,第1次检测结果为有效结果的有1 992例,占95.3%;第1次检测结果为无效结果的有98例,占4.7%。在98例第1次检测结果为无效结果中,错误编码1(1例,1%),错误编码3(1例,1%),错误编码4(37例,38%),错误编码8(1例,1%),错误编码9(50例,51%),错误编码10(8例,8%)。结论NucliSensEasyQ核酸扩增检测分析系统是检测HIV-1病毒载量的一种可靠方法之一,严格执行质量控制措施可大大提高检测的准确度和有效性。

以多肽为抗原的HIVELISA检测试剂的影响因素分析

目的探讨以化学合成多肽为抗原的HIV ELISA检测试剂制备过程中的影响因素。方法分别采用链霉亲和素、牛血清白蛋白偶联剂偶联HIV多肽抗原后包被经紫外线处理或未经紫外线处理的酶标板,同时检测HIV阳性、阴性标本,阳性血清OD>1.0,阴性血清OD<0.1为检测成功,分别重复24孔,计算成功率。结果链霉亲和素偶联的HIV多肽抗原包被经紫外线处理后的酶标板成功率最高,为100.0%(48/48),且显色本底最低。结论采用链霉亲和素偶联HIV多肽抗原及紫外线预处理酶标板对提高检测效果具有很大的帮助。