烹调油烟冷凝物对小鼠细胞免疫及免疫监视功能的影响

昆明种雌性小鼠皮下注射经动式染毒装置制备的豆油、菜籽油以及精炼色拉油油烟冷凝物。发现当皮下注射菜籽油油烟冷凝物后，与溶剂对照组相比，低剂量（１．１３ｇ／ｋｇ）菜籽油油烟冷凝物使动物迟发型变态反应明显下降。高剂量使小鼠迟发型变态反应和自然杀伤细胞活性明显下降。皮下注射高剂量（２．２６ｇ／ｋｇ）豆油油烟冷凝物后，小鼠迟发型变态反应、自然杀伤细胞活性和钙调素水平下降，并均具有显著性意义。动物在皮下注射低剂量色拉油油烟冷凝物后，与对照相比动物迟发型变态反应和自然杀伤细胞活性明显下降。本文结果表明。

从西藏微小牛蜱检出类查菲埃立克体和边缘无形体16S rDNA

目的 鉴定微小牛蜱 (Boophilusmicroplus)所携带的埃立克体病原体。方法 依据蜱传埃立克体 16SrDNA序列设计引物 ,建立埃立克体属特异性套式PCR检测微小牛蜱DNA样本 (每份DNA由 2个蜱提取 ) ;克隆DNA样本中的埃立克体 16SrDNA的 5′末端片段并测定其序列。结果 西藏某地的 4 3份蜱DNA样本中有 16份 (37% )经套式PCR扩得阳性片段 ,而四川某地的 2 7份蜱DNA样本扩增结果均为阴性。测定 16SrDNA的 5′末端片段 (～ 4 5 0bp)的序列 ,发现两种序列 ,一种与边缘无形体 16SrDNA完全一致 ,另一种与查菲埃立克体 16SrDNA最相关 ,但它们之间有 7个碱基 (～ 1 6 % )的不同。结论 西藏某地的微小牛蜱中携带有类查菲埃立克体和边缘无形体 。

查菲埃立克体120000表面抗原蛋白基因的克隆与表达

目的 构建查菲埃立克体特异性表面抗原 Ｐ１２０基因的原核表达质粒，并使该基因在 Ｅ．ｃｏｌｉ中高效表达。方法 依据查菲埃立克体Ｐ１２０基因序列设计一对特异性引物，用ＰＣＲ从查菲埃立克体的基因组中扩增含有编码Ｐ１２０抗原决定簇的基因片段，而后将ＰＣＲ产物用Ｔ载体克隆。用酶将ＰＣＲ产物从Ｔ载体切下，将它定向插入原核表达质粒ＰＥＴ１１Ｃ构建ＰＥＴ１１Ｃ／ｐ１２０重组质粒；用重组质粒转化Ｅ．ｃｏｌｉ ＢＬ２１（ＤＥ３）。结果 从ＤＮＡ片断中扩增出一约１１１９ ｂｐ产物，经测序为查菲埃立克体ｐ１２０基因。ＰＥＴ１１Ｃ／ｐ１２０重组质粒转化的 Ｅ．ｃｏｌｉ在 ＩＰＴＧ的诱导下产生一分子量为４１０００的天然蛋白，它的产量占细菌蛋白总量的 ２８％，用免疫印迹分析证明它能特异地与查菲埃立克体感染病人血清反应。结论 查菲埃立克体特异性的Ｐ１２０抗原在原核表达系统被高效表达，该抗原的研制成功为制备人单核细胞埃立克体病诊断抗原和疫苗奠定了基础。

分子生物学技术在人欧利希氏体病研究中的应用

人欧利希氏体病是一种新被认识的自然疫源性疾病。本文综述了分子生物学技术在人欧利希氏体的分类鉴定、临床样本和蜱媒中病原体的橙测以及在抗原结构分析中的应用。

多聚酶链反应检测恙虫病立克次体核酸

作者设计合成一对恙虫病立克次体ｓｔａ５８基因的ＤＮＡ引物，分别从恙虫病立克次体ｋａｒｐ、Ｇｉｌｌｉａｍ及ＣＭＹ株基因组中扩增出１ｋｂ片段，普氏及莫氏立克次体、西伯利亚立克次体和贝氏柯克斯体则不能，表明该引物为恙虫病立克次体种特异。以含ｓｔａ５８基因片段的重组质粒为模板作敏感性鉴定，表明ＰＣＲ可检测到１０ｐｇ的靶ＤＮＡ。用该引物作ＰＣＲ检测实验感染恙虫病立克次体的小鼠血、腹水及脾标本均获满意结果。

恙虫病立克次体sta58主要抗原基因片段的克隆及表达

作者设计合成一对ＤＮＡ引物，经ＰＣＲ扩增出Ｋａｒｐ及ＣＭＹ株恙虫病立克次体ｓｔａ５８主要抗原基因片段，分别建立其无性繁殖系，构建了表达质粒ｐＢＶＲＫ５和ｐＢＶＲＣ４５，在国内首次应用大肠杆菌成功表达了恙虫病立克次体抗原。其意义在于为我国恙虫病立克次体研究提供特异性核酸探针，为恙虫病基因工程诊断试剂的研制奠定物质基础。