套式PCR和DNA探针技术检测Q热立克次体

目的 建立套式PCR(NPCR)和DNA探针技术用于检测Q热立克次体。方法 依据已知的Cb 2 3srRNA基因序列 ,设计两对引物用于建立套式PCR技术 ,并将扩增片段制成探针进行斑点杂交。结果 9株Cb分离株均可扩增出阳性产物带 ,而对照菌均为阴性 ,扩增灵敏度可达 0 .1pgCbDNA ,实验感染第 6天的豚鼠血、小鼠血、小鼠脾脏均可扩增出阳性带 ;用七医株扩增片段制成的探针与 9株Cb分离株的全DNA呈阳性杂交 ,对照菌为阴性 ,探针杂交灵敏度为 0 .5ngCbDNA ,感染的豚鼠血、小鼠血、小鼠脾脏均可呈阳性反应。结论我们的NPCR和DNA探针技术具有很好的特异性和灵敏度 。