猪丙型肝炎病毒核心蛋白结合蛋白6同源基因的克隆化研究

利用不同种属动物之间重要基因序列高度同源的理论 ,应用分子生物学与生物信息学技术和方法 ,克隆猪丙型肝炎病毒 (HCV)核心蛋白结合蛋白 6(HCBP6)的同源基因。首先应用酵母双杂交技术 ,以表达HCV核心蛋白的表达载体作为诱饵 ,对于百万级的肝细胞cDNA文库酵母进行配合、筛选 ,首先获得人HCBP6的全长编码基因 ,然后应用美国国立生物工程中心 (NCBI)建立的核苷酸序列数据库 (GenBank)的同源基因的检索 ,搜索与之同源的来源于猪的表达序列标签 (EST)。然后根据基因同源性的原则 ,确定猪HCBP6的同源基因。获得了与HCV核心蛋白结合蛋白的 3 6个基因片段 ,其中之一命名为HCBP6。根据基因同源性搜索 ,获得了来源于猪的EST基因序列片段 ,最终确立了猪HCBP6的同源基因。利用不同物种之间基因同源性的原理、NCBI数据库GenBank同源基因的搜索 ,获得了猪HCBP6同源基因。