二种纯系小鼠动物模型应用于布鲁氏菌病传染免疫的研究

以细菌学、血清学、细胞免疫学及病理组织学等方法,较系统地应用牛、羊和猪布鲁氏菌毒种建立二个纯系小鼠(BALB/c及C57/BL)布鲁氏菌病动物模型。发现BALB/c感染布鲁氏菌的过程较明显,尤其用牛种544A皮下感染时更为明显,表明BALB/c小鼠可作为慢性感染动物模型。抗体形成细胞(PFC)的动态观察表明,三种布鲁氏菌对小鼠PFC的形成均有不同程度的抑制作用,其中以羊种布鲁氏菌的抑制作用最为明显。用布氏菌素进行皮内变态反应的观察发现,BALB/c小鼠对布氏菌素的皮内变态反应不敏感;而C57/BL小鼠则较为敏感,但在感染后第45天左右有一免疫抑制阶段。本研究为国内外广泛利用纯系小鼠作为布鲁氏菌传染免疫的研究提供了基础。

免疫抑制在布鲁氏菌病发病机理中的作用

以纯系小鼠为模型,细胞免疫学方法表明布鲁氏菌病(布病)具有免疫抑制作用,且此抑制作用可被左旋咪唑、白细胞介素-2,猪苓多糖及Bestatin等免疫调节剂缓解,提示免疫抑制作用参与布病的发病过程,为改进布病临床治疗方案,筛选治疗慢性布病药物的动物模型及客观疗效指标提供了依据。

牛种布氏菌单克隆抗体的研究

应用酚杀死的光滑型牛种布氏菌544A抗原免疫的BALB/C小鼠,融合前一周用超声波处理后高速离心制备的可溶性抗原加强免疫,腹腔内注射3次,以无菌手术取脾,制备成免疫脾细胞悬液,取10~8个免疫脾细胞与10~7个SP^2/0小鼠骨髓瘤细胞混合,在分子量4000的PEC 0.8ml(w/v)融合剂的作用下,两分钟后速加无血清的1640液25ml,离心沉淀再悬浮于20%FBSHAT1640培养基中,分装六块96孔细胞培养板,定期补加培养液。10天后开始测其孔上清,其检出阳性孔44孔(ELISA OD值>0.3),初步筛选出11株效价较高、特异性较好者,经反复检测,抗体分泌水平比较稳定,扩大培养,冻存液氮中。克隆后的细胞染色体计数平均为94条/细胞,无血清培养的细胞上清液在PAGE中呈现一条带,符合Mc.cell株仅分泌一种抗体的特性。

羊牛布鲁氏菌对C_(57)BL小鼠的自然杀伤细胞活性的影响

通过应用~3H—TdR 释放法检测了羊、牛两种布鲁氏菌感染后 C_(57)BL 小鼠的 NK 细胞活性。发现用5×10~4菌量的羊种布鲁氏菌16M 皮下途径感染小鼠后第1天和第3天时 NK 细胞活性明显降低(P<0.01),感染后5～30天时的 NK 细胞活性与对照组相比无显著性差异(P>0.05)。16M 引起小鼠的 NK 细胞活性的降低与感染菌量的大小有关。16M 通过皮下和腹腔两种途径感染小鼠均能引起其 NK 细胞活性的降低(P<0.01)。弱毒牛种布鲁氏菌104M 5×10~4菌量接种后第3天时,小鼠的 NK 细胞活性与对照组相比无显著性差异(P>0.05)。

牛布鲁氏杆菌抗独特型抗体苗对实验性豚鼠兔抗体的研究

用牛布鲁氏杆菌抗独特型兔源抗体（简称二抗）苗免疫实验动物豚鼠１～３次后，采用琼脂扩散的方法检测抗兔抗体的产生。初步实验结果表明：免疫一次来检出抗兔抗体，免疫２次后检出了抗兔抗体。

牛布鲁氏杆菌抗独特型抗体苗的实验动物免疫病理学观察

本文以小鼠牛布鲁氏杆菌抗独特型抗体苗（简称二抗苗）的足掌肿胀反应为迟发性超敏指标，比较了二抗苗与羊型布鲁氏杆菌Ｍ５号活菌苗引起的昆明、ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的足掌反应。然后以接种１～３次二抗苗的豚鼠为模型动物作病理切片与Ｍ５号菌苗的豚鼠免疫作比较，观察其病理组织学变化。初步结果表明：（与Ｍ５号菌苗相比）１．二抗苗接种引发的足掌迟发性超敏反应弱；２．二抗苗接种不造成免疫病理性的组织损伤。

布氏菌BSAg抗原对豚鼠的免疫效果观察

提高机体免疫力是预防人、畜布氏菌病重要手段之一。长期以来,国内外都是采用活菌苗免疫接种预防人、畜布氏菌病。但是活菌苗的广泛应用,暴露出其本身的诸多缺陷,如活菌均保留一定的毒性,可致敏接种者,产生与自然感染相似的血清学反应及皮肤变态反应,在防治监测工作中无法鉴别。因此,国内外许多学者都在研究非完整菌体的布氏菌组份苗(化学疫苗)预防布氏菌感染的可能性。 作者将布氏菌特异性抗原BSAg免疫豚鼠,观察BSAg的免疫效果。

抗个体型抗体的抗布氏菌感染作用

在许多传染病的预防工作中,首要解决的问题是疫(菌)苗来源,目前所采用的疫(菌)苗主要有三种,一是直接从病原体来;二是通过DNA重组技术获得;三是人工合成的方法获得。但是,就布氏菌病的人群免疫而言。

纯化布氏菌素现场应用的标准化

对纯化布氏菌素首次用同体双臂法在布病患者、免疫人群及流调人群中进行了现场标化及考核。确定了使用的适宜剂量单位为1．0U／0．1ml／人，观察时间为48h，阳性结果判定标准为局部红肿均径≥10mm。

布鲁氏菌病流行病学及分子生物学研究进展

几年来,我曾在有关杂志先后发表了“布病诊断中的非特异性反应”、“布病的防治研究进展”、“布病的监测与技术”、“布病的自然疫源性”、“布病的地理流行病学”以及“布氏菌分子生物学研究进展”等。鉴于近年来布病流行病学出现了某些新的发展趋向,尤其是布氏菌的分子生物学研究突飞猛进,日新月异。故对这两个方面的某些问题再作一次概述。

抗粗糙型布氏菌血清的研究——两种不同的抗绵羊附睾种血清的研制

作者用绵羊附睾种布氏菌国际株及地方株各一,进行生物型特性鉴定。发现国际株必须在含有5～10%CO_2条件下才能生长,而地方株在无CO_2条件下亦可生长。二菌株分别注射家兔腘窝淋巴结获得高效价血清,与犬种菌相互间有共同的交叉凝集反应。经犬种布氏菌吸收后,能突出单相特异性,但地方株抗血清对犬种布氏菌交叉反应明显低于国际株。初步看来二菌株不但生物型特性有别,在抗原结构上亦有异。该血清可用于绵羊附睾种布氏菌的鉴定。

急性期布氏菌病豚鼠(雄性)性腺轴功能状态的观察

布氏菌所致人及豚鼠布氏菌病(简称布病),对肾上腺皮质及甲状腺系统功能状态的影响已见报道。为揭示布病对机体内分泌系统的影响,本文对布氏菌感染豚鼠(雄性)性腺系统的功能状态进行了观察。1 材料及方法1.1 试验动物 选用重350～450g(5～8月龄)健康雄性豚鼠72只,由长春生物制品所动物室提供。1.2 布氏菌株 本所实验室冻干保存的羊种菌16M(批号92,1)、牛种菌BA19(批号92,1)标准菌株。均经1‰的三胜黄素凝集试验检查无变异。

布鲁氏菌病流行病学及分子生物学研究进展

3 布病诊断与分子生物学 由于现代分子生物学的发展,布病诊断除采用血清学、细菌学、变态反应等技术外,现已开展利用分子生物学技术探索在布病诊断中的价值。3.1 PCR 技术的采用 自1985年Saiki等首创该项技术以来,迅速得到推广应用。在布病诊断中已在国内外进行探索。 1995年唐浏英等按B.abortus的Omp36KD蛋白基因设计引物,并对不同种布氏菌的遗传物质进行扩增试验,结果见表12。

不同病程的慢性布氏菌病患者免疫学检查报告

布氏菌病(简称布病)为人兽共患传染病,且具有体液和细胞双重免疫改造的特点。为了解不同病程布病患者的免疫学变化和监床疗效判定、发病机理研究提供科学依据,作者对不同病程的慢性布病患者进行了有关的免疫学检查。

分泌抗猪种布氏菌S_2单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

牛、羊和猪种布氏菌与耶氏菌小肠结肠炎09型菌在血清学上存在交叉反应,给布病的诊断、布氏菌菌型的鉴定等带来一定困难。对此,抗布氏菌单克隆抗体（McAb）将要成为有效的鉴别诊断工具。本试验用B淋巴细胞杂交瘤技术建立了一株分泌抗猪种布氏菌S2单克隆抗体的杂交瘤细胞,

抗牛布鲁氏菌独特型抗体在牛体中的免疫反应

众所周知，布鲁氏菌病是一种人畜共患传染病。近年来，羊布鲁氏菌病得到控制，但牛布鲁氏菌病日趋严重，新疆则更为突出，有些牛场发病率高达３３％以上。为了尽快控制本病，我们在研制出牛种５４４Ａ布鲁氏菌单抗的基础上，又将新疆分离的布病牛强毒Ｓ８５Ａ研制成单抗，并选用ＥＬＩＳＡ高效价中和性单抗－Ａ７免疫家兔，经提纯制成抗独特型苗，免疫杂种牛和土种黄牛。通过平板凝集，试管凝集和Ｃｏｏｍｂ＇ｓ试验证明，凝集抗体消失很快，不完全抗体则可维持一年以上。这表明抗细菌性抗体在体内存在时间较长，这为抗独特型抗体苗的研究和应用提供了很好的依据。

用羊种布鲁氏菌外膜蛋白作抗原的ELISA调查血清抗体的初步结果

酶联免疫吸附试验(ELISA),因其敏感性较高已广泛地应用于布病的检测。使用的抗原多为光滑型牛种布鲁氏菌1生物型如104M的培养物或是其脂多糖(LPS)。其和光滑型布鲁氏菌产生的血清抗体可呈现阳性反应,但对布鲁氏菌粗糙性抗原产生的抗体则不能发生可见的阳性结果。

延边牛布病免疫效果统计方法探讨

一、基础数据15年来延边地区有关部门对布病作了大量防治工作,牛的免疫率在上升,犊牛布病阳性率在下降,效果是显著的。有数据为证(表1)。

布氏菌苗滴鼻免疫效果观察及其经济效益分析

对布病活跃疫区的１５００ 名健康易感人群和以１５ 亿布氏菌活菌苗滴鼻，免疫后于３ 、６ 、９ 、１２ 个月以皮内变态反应试验和血清凝集试验观察其效果。结果：发现皮试阳转率分别为９９４０ ％ 、８７３４ ％ 、９０００ ％ 、９２２４ ％ ；血清阳转率分别为９５２４ ％ 、９３９４ ％ 、５９７０ ％ 、５９０８ ％ ；同期观察的２００ 名健康学生对照则未见阳转。发病动态显示，我省有关活动疫区布病疫情呈大幅度下降趋势。经济效益分析显示，该免疫途径可大幅度降低直接经济投入。结论：布氏菌苗滴鼻免疫具有简便、易行、经济、安全。