军团菌双重PCR检测方法的建立及其应用研究

目的 建立一种双重PCR方法 ,用于简便 ,快速检测军团菌。方法 根据军团菌 16SrRNA基因和mip基因序列设计合成引物 ,可以扩增 386bp 16SrRNA基因和 2 0 6bpmip基因片段。用该方法对军团菌标准参考菌株和 47份临床标本进行了检测。结果 通过一次PCR反应 ,不仅能够检测嗜肺军团菌 ,而且能够检测非嗜肺的军团菌 ,从而克服了单一引物应用时的不足。 2 1株对照菌株扩增阴性 ,最小检出限为 2× 10 1 cfu/ml。 47份临床标本 (包括 12份血 ,2 0份支气管肺泡灌洗液 ,7份胸水 ,8份痰 )PCR检测的阳性标本为 2 8份 (2 8/4 7) ,在临床上均支持为军团菌感染 ,高于血清抗体检测的阳性标本数 (2 4/4 7)。结论 该方法用于军团菌的检测简便、快捷 ,具有很高的特异性和敏感性 。

双重PCR法检测痰标本对早期诊断军团菌肺炎的意义

为探讨双重PCR方法 (DPCR)检测痰标本中军团菌DNA在早期诊断军团菌肺炎方面的意义 ,采用DPCR方法对军团菌肺炎组、临床疑似军团菌肺炎组、普通肺炎组和肺结核组 4组患者留取的痰标本进行检测。DPCR过程采用根据军团菌 1 6SrRNA基因和mip基因设计的 2对引物 ,同时扩增军团菌 3 86bp 1 6SrRNA基因片段和 2 0 6bpmip基因片段。结果 :军团菌肺炎组的DPCR阳性检出率为 1 0 0 % ,明显高于其他 3组 (分别为 1 7.2 4%、0、0 ,P均 <0 .0 1 )。模拟痰标本DPCR的最低检出限为 1× 1 0 3 cfu/mL。初步研究表明 ,DPCR方法检测痰标本中的军团菌DNA具有较好的敏感性、特异性和稳定性 。

聚合酶链反应检测痰样品中军团病杆菌核酸

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对４０例有军团病杆菌（ＬＤＢ）培养和／或血清学阳性证据，临床诊断为军团菌肺炎患者急性期的痰样品中军团菌巨噬细胞感染增效基因（ｍｉｐｇｅｎｅ）的６３０ｂｐ片段进行ＤＮＡ扩增，诊断阳性率为８２．５％（３３／４０）。同时用ＰＣＲ检测了收集的其中２９位患者的急性期支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）样品，ＢＡＬＦ诊断阳性为８９．７％（２６／２９），急性期痰样品与ＢＡＬＦ样品中ＬＤＢ的ＰＣＲ检出率之间无显著性差异（χ２＝０．６９，Ｐ＞０．２５）。

军团菌病81例肺部影像学分析

为探讨军团菌病（ＬＤ）肺部Ｘ线、ＣＴ表现特点，回顾性研究了１９９３年１月至１９９６年４月军团菌病肺部影像学等资料齐全的连续性病例，共８１例。其中胸部Ｘ线６０例，胸部Ｘ线＋ＣＴ２１例。所有病例均符合军团菌病诊断标准。本组军团菌病肺部影像学表现出以下特点：①多样性；②胸水多见（２６／８１，３２％）；③游走性（１２／８１，１５％）；④周边分布（２４／８１，３０％）；⑤临床症状影像变化分离（１４／８１，１７％）；⑥病变吸收慢。本病影像学表现缺少特异性，但有一定特点。军团菌病肺部影像学以上特点，对于本病的诊治有实用价值。

幽门螺杆菌感染、胆汁反流对胃黏膜损伤的影响60例分析

目的:探讨幽门螺杆菌感染、胆汁反流对胃黏膜损伤的影响。方法:60例病理性DGR患者,行24 h胃内胆汁监测,取胃窦小弯处黏膜4块,分别行快速尿素酶试验及病理检查。结果:60例患者中Hp的感染率是23.3%,胃内Abs≥0.14的时间百分比是(30.64±14.67)%,Hp阳性组与Hp阴性组相比差异有显著性(P<0.05)。结论:胆汁反流可以抑制Hp在胃内的定植,胆汁反流是胃黏膜损伤的危险因素。

军团菌感染的实验室诊断

自1976年费城暴发军团菌感染并确诊以来,世界各地均有发病报道,国外资料表明军团菌在院外感染的肺炎中居肺炎双球菌肺炎、支原体肺炎之后的第3位,我国亦有散发及小规模暴发流行的报道。本病临床表现分肺炎型和庞提亚克热(Pontiac fever)型两种。肺炎型主要侵犯肺部,并可累及多个系统。

军团菌肺炎胸部影像学24例分析

本文对２４例军团菌肺炎患者的胸部影像学表现进行分析，发现其主要表现为：小叶渗出性病变，大叶性实变和肺间质性病变，可伴有空洞形成和胸水。１材料和方法收集１９９０年１月～１９９８年３月影像学、临床资料齐全的军团菌肺炎患者共２４例。年龄１６～７０岁，男１７...

左氧氟沙星四联根除幽门螺杆菌疗效观察

目的:探讨左氧氟沙星在根除幽门螺杆菌(Hp)中的效果。方法:选择242例Hp阳性胃、十二指肠溃疡患者,随机分为观察组和对照组各121例,观察组给予泮托拉唑、阿莫西林、左氧氟沙星、枸橼酸铋钾口服,2次/d。对照组给予泮托拉唑、阿莫西林、甲硝唑、枸橼酸铋钾口服,2次/d。疗程均为7 d。结果:观察组与对照组的Hp根除率分别为92.3%和71.9%,两组有显著性差异(P<0.05);溃疡愈合率分别为94.2%和93.4%,两组无显著性差异(P>0.05)。结论:左氧氟沙星四联根除Hp疗程1周,Hp根除率可达90%以上,疗效好,副作用低,是值得考虑的根除Hp的药物选择。

应用PCR方法检测军团菌病

自从1976年在美国宾西法尼亚州费城爆发军团病以来,全世界已有许多散发和流行报道,我国也有爆发流行并分离到军团菌。本文应用PCR方法检测了40例临床诊断为非典型肺炎的病人及10例无呼吸道及发热症状的正常人痰液,并对PCR结果阳性病人进行了抗体追踪调查,现将结果报告如下。

聚合酶链反应技术检测临床标本中军团病杆菌

探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测临床标本中军团病杆菌（ＬＤＢ）对军团菌病的诊断价值。用ＰＣＲ技术对３１例ＬＤＢ培养和（或）血清学阳性、临床诊断为军团菌病患者急性期的临床标本中，军团菌巨噬细胞感染增效基因（ｍｉｐｇｅｎｅ）的６３０ｂｐ片段进行ＤＮＡ扩增，并与军团菌培养和血清学诊断（间接荧光抗体检查法）比较。结果：ＰＣＲ技术诊断军团菌病的阳性率为９０．３％（２８／３１），比培养的阳性率（６２．６％，１７／２７）高（χ２＝８．２３，Ｐ＜０．００５），与血清学检测阳性率（８６．２％，２５／２９）之间无显著性差异（χ２＝０．８９，Ｐ＞０．２５）。在ＬＤＢ培养阴性、血清学阴性的４０例肺部感染患者中３例ＰＣＲ法检测结果阳性。

用DNA杂交技术检测产β-内酰胺酶的临床分离菌株的TEM-1基因

为了探求院内感染革兰氏阴性杆菌产生超广谱β内酰胺酶的基因决定机制，我们采用ＤＮＡ斑点杂交技术对所选临床分离的产β内酰胺的大肠埃希氏菌、克雷伯氏菌等进行了其质粒介导的β内酰胺酶基因类型分析。对２０株菌质粒用ＴＥＭ１探针检测的结果如下：１１株大肠埃希氏菌全与ＴＥＭ１探针杂交；６株肺炎克雷伯氏菌有３株与ＴＥＭ１探针杂交；１株已证明含有ＳＨＶ２超广谱β内酰胺酶的日勾维肠杆菌未与ＴＥＭ１探针杂交；２株不动杆菌有１株（溶血不动杆菌）与ＴＥＭ１探针杂交。

9例军团菌肺炎临床观察

军团菌肺炎的临床表现无特异性，容易误诊。当患者出现呼吸困难、腹胀腹痛、神经系统症状等时是重要线索。低钠血症、谷丙转氨酶和谷草转氨酶异常升高是重要肺外表现。动态观察血清抗体滴度变化是诊断要点。本文误诊５例，死亡２例。提示：及早诊断、及时应用足量红霉素或红霉素加利福平是降低死亡率的关键。

我国首例约丹军团菌肺炎的诊断学研究

１例病原体未明的肺炎患者，发病第８、１３、１６周以微量凝集试验检测血清，约丹军团菌抗体滴度为１∶１２８、１∶１２８、１∶２５６，分别高于当地正常人群几何平均滴度的１４倍及２８倍，ＥＬＩＳＡ法检测第一、二份血清，结果亦为阳性。综合本例临床经过、影象学所见、抗生素疗效及血清学试验结果，对比国外文献中约丹军团菌感染病例的诊断依据，诊断为我国首例约丹军团菌感染。

反向血凝法检测嗜肺性军团病杆菌可溶性抗原

军团病实验诊断最可靠的手段是病原菌的分离培养,但本菌培养较为困难。鉴于此,我们对反向血凝法(RPHA)检测嗜肺性军团病杆菌(LDB)可溶性抗原的方法进行了初步的探索。结果如下。 1 材科与方法 1.1 材料兔抗LDBⅠ型抗体(血凝效价1∶8192)及双醛化绵羊红细胞(SRBC)均为本室自制。LDB1～6血清型标准菌种,由美国疾病控制中心提供。LDB可溶性抗原:用无菌蒸馏水分别洗下生长于LCVB培养基中的1～6型LDB菌苔,按每0.1ml压积菌体补蒸馏水至10ml,隔水煮沸30min后。

29例军团杆菌病的影象学分析

本文总结了29例军团杆菌病的胸部X线片与CT的影象学特点,即多样性与多发性,可呈大片状、斑片状、增殖样小结节状及条索状与肺纹理增重紊乱等,部分病例可发生脓肿形成空洞,空洞单发或多发,内有液平面或无,空洞形成快,闭合慢,有的伴有胸膜肥厚或胸腔积液。CT检查更有利于对病变的研究观察。

肺部感染78例血清嗜肺军团菌抗体测定

本文应用微量凝集试验(MAT)对我院78例肺部感染患者进行了嗜肺军团菌血清杭体的测定,结果表明本地区确有嗜肺军团杆菌感染,以LP_6为多见。并与本地区同期无呼吸道感染的正常人嗜肺军团菌血清抗体测定结果对比发现两者阳性率无明显差别(P>0.05)