McAb-ELISA检测丝虫特异IgG_4的应用研究

目的 探讨McAb -ELISA检测丝虫特异IgG4在丝虫感染监测中的应用价值。方法 利用生化免疫技术 ,经细胞融合 ,建立起 7株对IgG4表现为单一反应性的单克隆抗体 (McAb)。以此为探针 ,采用ELISA方法检测丝虫特异IgG4。结果 检测班氏微丝蚴血症者血清的敏感性为 96 3% (10 4 / 10 8) ,测得IgG4的最低限量为 0 0 1ul/ml;检测丝虫病非流行区健康者、肠道线虫感染者、华支睾吸虫感染者和囊虫病患者等血清均呈阴性 ,未出现交叉反应 ,特异性为 10 0 %。经现场应用研究 ,同样获得良好的实用性 ,有效地反映出当地丝虫病流行与感染状况。结论 该技术是监测丝虫感染的理想方法。

单克隆抗体免疫放射测定法检测丝虫抗原

应用抗马来丝虫成虫单克隆抗体（ＭｃＡｂ）结合免疫放射测定法（ＩＲＭＡ），对马来丝虫成虫抗原、马来丝虫成虫排泄－分泌抗原（ＥＳ抗原）、马来微丝蚴抗原及班氏丝虫病病人血清中循环抗原进行了检测。马来丝虫成虫抗原检出的最低含量为０．４８ｐｇ，ＥＳ抗原、马来微丝蚴抗原可测得抗原结合量分别为０．３５μｇ和０．０６５μｇ，班氏丝虫病人血清中循环抗原的检测结果阳性率为８０％（４０／５０），丝虫病流行区５０份微丝蚴阴性血清及丝虫病非流行区５０份肠道蠕虫感染者血清全部为阴性。

淋巴丝虫感染中T淋巴细胞的免疫应答──白细胞介素2和γ干扰素的体外诱生分析

目的：探讨淋巴丝虫感染中Ｔ淋巴细胞的免疫应答机制。方法：检测安徽省班氏丝虫病流行区人群及感染马来丝虫的长爪沙鼠体外诱生的白细胞介素２（ＩＬ－２）和γ干扰素（ＩＦＮ－γ）。结果：对非特异性有丝分裂原ＰＨＡ及ＣｏｎＡ的刺激，各组人群外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）产生ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ水平无显著差异。对马来丝虫成虫抗原的刺激，微丝蚴血症者ＰＢＭＣ产生ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ水平比流行区无症状、无微丝蚴血症者显著低下，长爪沙鼠实验结果与人群的相似。结论：本实验提示，班氏丝虫病流行区微丝蚴血症者及马来丝虫微丝蚴血症长爪沙鼠的Ｔ细胞对丝虫抗原处于一种低应答状态，且这种受抑制的Ｔ细胞主要是Ｔｈ１亚群细胞。

感染丝虫的母亲对子代免疫应答的影响─丝虫循环抗原检测比较

应用抗牛丝虫多抗ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法检测皖北丝虫病流行区１１９对产妇及其婴儿脐带血清和１７０对妇女及其子女血清中丝虫循环抗原（ＦＣＡｇ），其中阳性２３１例，阳性率为４０．０％（２３１／５７８）。８３例微丝蚴（ｍｆ）阳性者中６７例检出ＦＣＡｇ，阳性符合率为８０．７％（６７／８３）。５４例ＦＣＡｇ阳性产妇中３３例婴儿脐带血清中检出ＦＣＡｇ，阳性符合率为６１．１％（３３／５４）。表明母体ＦＣＡｇ有可能通过胎盘屏障进入胎儿体内。８４例ＦＣＡｇ阳性妇女中３５例子女血清中检出ＦＣＡｇ，阳性符合率为４１．７％（３５／８４）。肺吸虫病和日本血吸虫病患者假阳性率分别为２．５％和１６．７％。５０名健康大学生的ＦＣＡｇ检测均为阴性。

马来丝虫和牛腹腔丝虫抗原的限定组分蛋白及其反应性研究

应用免疫酶印渍技术(IEBT)检测马来丝虫成虫可溶性抗原(FMW)和牛腹腔指状丝虫可溶性抗原(SSW)组分蛋白与几种蠕虫免疫兔血清和蠕虫感染兔及病人血清之间的反应性,结果FMW及SSW的限定组分蛋白的分子量分别为17kD和32kD及16.5kD。马来丝虫、牛愎腔指状丝虫和犬恶丝虫成虫之间存有16.5kD～32kD的共同组分蛋白,其中17kD和32kD组分蛋白与几种蠕虫免疫兔血清和蠕虫感染兔及病人血清显示特异的反应性。

马来丝虫和牛指状腹腔丝虫抗原化学及免疫学特性的分析

应用ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）和酶联免疫印迹（ＥＬＩＢ）技术，分析了马来丝虫成虫抗原（ＢｍＡ－Ａｇ）、微丝蚴抗原（ＢｍＭｆ－Ａｇ）及牛指状腹腔丝虫成虫抗原（ＳｄＡ－Ａｇ）化学及免疫学特性。结果表明三者分别有６条、４条和２条丝虫抗原特异性组分，这些丝虫特异性组分与肠道线虫病人血清及健康人血清均无交叉和假阳性反应，而ＳｄＡ－Ａｇ价廉易得，用于丝虫病免疫诊断和人群血清学监测可望获得较好效果。

母亲感染丝虫后其子代对丝虫免疫关系的观察

目的了解母亲感染丝虫后，对其婴幼儿免疫应答会产生怎样关系及导致何种结局。方法用抗牛丝虫多抗ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法与马来丝虫成虫切片抗原免疫酶染色技术（ＩＥＳＴ）分别检测淮北班氏丝虫流行区微丝蚴（ｍｆ）阳性、阴性的母亲及其１～１０岁子女、产妇及其婴儿血清中丝虫循环抗原（ＦＣＡｇ）与ＩｇＭ抗体。另对细胞免疫等作了检测。结果在５４例ＦＣＡｇ阳性产妇中有３３例其婴儿亦为阳性，二者符合率为６１．１％。乳汁４份ＦＣＡｇ皆阳性。ｍｆ阳性产妇及其婴儿血ＩｇＭ阳性率分别为７０．８％（１７／２４）和８．３％（２／２４），ｍｆ阴性组的分别为１０．６％（１０／９４）和３．２％（３／９４），其二组婴儿血ＩｇＭ水平经χ２检验差异无显著意义（Ｐ＞０．０５）。结论提示ＦＣＡｇ能经胎盘进入胎儿体内。从ＩｇＭ水平看，母亲感染丝虫与否，对其子代先天免疫耐受的产生和抗感染均无明显影响。

检测IgG、IgM抗体对考核丝虫病疗效的观察

用马来丝虫成虫冰冻切片抗原作IEST,对海群生治疗后18个月的班氏微丝蚴血症和症状体征阳性者进行了复查,结果显示治后IgG和IgM的总GMRT,均分别低于治前IgG和IgM的总GMRT;IgG和IgM的治后转阴率分别为15.1%和80.3%,差异具有显著性(P<0.01)。表明IgG抗体水平在治后18个月虽有下降。但仍有较高的抗体阳性率,而IgM抗体已大部转阴,转阴速度较快,提示在丝虫病防治后期检测IgM抗体的转阴率,可以作为考核疗效和疫情监测的一种方法。

鼠类实验模型感染周期型马来丝虫后血清特异性抗体水平的变化

本文报道用酶联免疫吸附试验检测长爪沙鼠及BALB/cCR小鼠经不同途径感染周期型马来丝虫3期幼虫、微丝蚴和成虫后,血清特异性IgM、IgG抗体的变化规律,以及抗体水平变化与感染虫期的关系。实验鼠在感染后IgM出现及达到高峰的时间较IgG为早,IgM和IgG在达到高峰后,在较长时间内保特一定水平,这可能是寄生蠕虫感染的共同免疫特征。小鼠产生的抗体水平较沙鼠高。

马来丝虫抗原组分分析的实验研究

血清免疫学诊断实验效果的好坏,所用抗原的特异性与纯度有着重要作用。SDS—PAGE和酶联免疫印迹试验在进行抗原分析和寻找与患者血清具有免疫活性的抗原组分方面有着灵敏度高、分辨率和特异性强的优点。目前国内在日本血吸虫、盘尾丝虫等抗原的分析方面已有材料报道。为通过对不同生活阶段马来丝虫抗原的分析比较。

抗丝虫感染的抗体依赖细胞介导的细胞毒作用

对丝虫微丝蚴和感染期幼虫的抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC)可能是宿主抗丝虫感染的主要免疫效应机制。参与作用的抗体类型和效应细胞可因虫种而异。效应细胞通过其细胞膜上的Fc受体与结合于虫体表面的抗体Fc段桥连,进而释放各种毒性物质作用于虫体,导致虫体死亡。抗体和补体同时存在时,效应细胞能对虫体发挥最大的杀伤效应,效应细胞表面的补体受体在其中起了重要作用。另外,补体还能单独介导效应细胞实施对虫体的攻击。

淋巴丝虫感染的细胞免疫研究进展

淋巴丝虫感染者的细胞免疫功能低下,可能与多种因素有关,如粘附细胞、抑制性T细胞(Ts)、血清抑制因子、丝虫抗原等,也可能与宿主对特异抗原产生“免疫耐受”有关。细胞免疫在丝虫感染免疫病理损害中起作用。

不同人群丝虫抗体水平的间接荧光抗体试验观察

为了解不同人群的丝虫抗体水平,我们于1989～1991年间选择微丝蚴血症者、晚期体征患者微丝蚴血症经海群生治后转阴不同时间者以及基本消灭丝虫病不同时间地区的居民进行了 IFAT 检测与观察,结果报告如下。

抗独特型抗体对马来丝虫感染沙鼠的保护性免疫效果观察

目的 :研究抗丝虫抗独特型抗体 (抗 fil-抗 Id- Ab)对丝虫感染沙鼠的保护性免疫作用。方法 :从班氏丝虫病乳糜尿和鞘膜积液患者血清中分离含有高滴度的 Ig G,免疫家兔 ,获得兔抗 fil-抗 Id- Ig G,免疫沙鼠 ,再用马来丝虫感染期幼虫攻击 ,观察其免疫效果。结果 :抗 fil-抗 Id- Ig G一次脾内注射或多次皮下及腹腔内免疫后 ,50 %和 80 %沙鼠产生保护性免疫效果 ,沙鼠体内查不到微丝蚴和成虫 ,而从马来丝虫成虫可溶性抗原或兔抗正常人 Ig G为对照组的沙鼠中 ,80 %沙鼠感染丝虫 ,与正常感染组相近似。结论 :用抗 fil-抗 Id- Ab对马来丝虫感染沙鼠 ,证实有保护性免疫作用。

DNA探针聚合酶链反应免疫发光技术鉴定蚊体内班氏丝虫幼虫

在丝虫病防治和监测过程中,对蚊体内幼丝虫的感染率和感染度的检测,从而了解丝虫病传播强度和动态,评价丝虫病防治效果,是流行病学研究中非常重要的内容之一。传统鉴定蚊媒体内幼丝虫的方法是以形态学为依据,往往不易鉴别动物丝虫或人丝虫(特别Ⅰ、Ⅱ期幼虫)。近年来由于分子生物学和基因工程技术的发展,对丝虫生物学的研究开始进入基因水平。DNA 重组技术是鉴定寄生虫的基因,了解丝虫病的发病机制,传播规律,虫种鉴定,诊断及丝虫病防治与鉴测评价具有重要实用价值的新技术。我们应用非放射性同位素标记物标记实验室内制成的班氏丝虫种特异性 DNA 探针,通过聚合酶链反应(PCR)以便增加要分解出靶 DNA 量。在最初实验中。

班氏丝虫微丝蚴周期性与致倦库蚊吸血和传播的观察

我国流行的班氏丝虫为夜现周期型,致倦库蚊和淡色库蚊为主要传播媒介,微丝蚴(mf)在外周血液中周期性出现的机理虽然有不少学说,至今未完全阐明。我们在贵州省思南县华溪沟村对12例班氏mf血症者的mf在人体外周血液中出现的时间与当地传播媒介致倦库蚊叮人吸血活动规律,以及不同mf密度患者对致倦库蚊幼丝虫的感染情况等有关参数进行观察,结果如下。

淋巴丝虫病和盘尾丝虫病的免疫应答调节

本文讨论丝虫感染中IL-4,IL-5和IFN-γ诱导速发型变态反应的分子机理与变态反应在对丝虫抗原的免疫及免疫耐受中的作用,并借此解释某些个体对丝虫感染削弱的免疫应答和持续的微丝蚴状态。

免疫耐受:人体丝虫病的重要特征

在人体内由丝虫的微丝蚴和成虫诱导的免疫耐受,既阻止清除虫体又阻止病情发展,这种无应答性的终止则是发病的重要环节。丝虫病保护性免疫力的靶是感染期幼虫,有望作为有效安全的抗丝虫疫苗。

班氏丝虫宿主循环抗原的检测

应用兔抗牛丝虫抗体ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测安徽流行区人体班氏丝虫循环抗原。微丝蚴血症者血清总阳性率９６％（２４／２５），尿液总阳性率为６０％（１５／２５），４份乳汁阳性率均为１００％。１５份尿液阳性和４份乳汁阳性者与血清阳性结果的符合率分别为１００％（１５／１５）和７５％（３／４）。检测江苏非流行区正常人血清、尿液、乳汁共４３份，全部阴性。１１份肠道线虫感染者尿液全为阴性，血清Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阴性。１０份肺吸虫感染者血清Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阴性。结果表明，班氏丝虫循环抗原不仅存在于血清而且存在于尿液和乳汁中。

感染丝虫的母亲对其子代丝虫免疫应答的影响

探讨丝虫病流行区居民感染丝虫后广谱性临床特征的原因，了解母体感染丝虫对其子女丝虫免疫应答的影响。方法应用固相抗原免疫酶染色技术检测了班氏丝虫微丝蚴（Ｍｆ）阳性的母亲及其１～１０岁子女５８对，Ｍｆ阴性妇女及其子女１１９对，Ｍｆ阳性产妇及其婴儿２４对，Ｍｆ阴性产妇及其婴儿９４对的外周静脉血及脐带血血清中丝虫特异性ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体。结果Ｍｆ阳性妇女及其子女的ＩｇＧ抗体阳性率分别为９１．４％（５３／５８）和６５．５％（３８／５８），ＩｇＭ抗体阳性率分别为８１．０％（４７／５８）和２０．７％（１２／５８）；Ｍｆ阴性妇女及其子女的ＩｇＧ抗体阳性率分别为２８．６％（３４／１１９）和２４．４％（２９／１１９），ＩｇＭ抗体阳性率分别为１１．８％（１４／１１９）和１０．９％（１３／１１９）；Ｍｆ阳性产妇及其婴儿ＩｇＧ抗体阳性率分别为９１．７％（２２／２４）和７５．０％（１８／２４），ＩｇＭ抗体阳性率分别为７０．８％（１７／２４）和８．３％（２／２４）；Ｍｆ阴性产妇及其婴儿组ＩｇＧ抗体阳性率分别为２０．２％（１９／９４）和１６．０％（１５／９４），ＩｇＭ抗体阳性率分别为１０．６％（１０／９４）和３．２％（３／９４）。结论无论母?