泡球蚴病和棘球蚴病患者血清IgG、IgA和IgM水平的比较

比较测定了91例泡球蚴病患者和83例棘球蚴病患者血清中IgG、IgA和IgM水平。泡球蚴病患者IgG、IgA和IgM水平及棘球蚴病患者IgG、IgM水平均非常显著地高于健康人。泡球蚴病患者IgG和IgM水平的几何均数各为棘球蚴病患者的1.67和1.25倍。IgG浓度在200IU/ml以上者,泡球蚴病患者非常显著地高于棘球蚴病患者,而IgM浓度在100IU/ml以上者,前者也显著地高于后者。用PPA-ELISA和ABC-ELISA检测的抗体效价中,只有IgG浓度和ELISA抗体效价间有显著相关(0.05>P>0.02)。

多房棘球绦虫原头节抗原的等电聚焦分析

[目的 ]了解多房棘球绦虫 (E.m.)原头节粗抗原的组成成分。 [方法 ]多房棘球绦虫原头节粗抗原经等电聚焦法分离、制备得到等电点各不相同的组分 ,各组分再通过 SDS- PAGE电泳、考马斯亮蓝染色、凝胶分析仪分析其主要蛋白条带。 [结果 ]所分离的 2 0份组分 p I值范围为 4.0～ 8.5 ,主要蛋白条带有 72 / 73、 6 2 / 6 3、 42 / 44、35 / 36、 34及 2 1/ 2 2 k Da。 [结论

单克隆抗体Dot－ELISA检测包虫病人循环抗原的研究

用单克隆抗体－斑点酶联免疫吸附试验（ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）检测４６例确诊包虫病患者血清循环抗原，３５例呈阳性反应，阳性率为７６．０９％。１４例猪囊虫病人，５０例健康人血清均为阴性，上述结果表明本方法具有较好的敏感性和特异性，而且操作简便，试剂用量少，肉眼判断结果，可用于包虫病的诊断和疗效考核。

细粒棘球蚴囊液抗原的研究 Ⅰ.抗原的纯化及其免疫诊断价值

依次用硫酸铵分段盐析、超滤、凝胶过滤及等电聚焦电泳方法,从棘球蚴囊液中分离出一组抗原,用PPA—ELIsA法对包虫病患者进行检测,阳性率为81.1%,对其它寄生虫病患者、非寄生虫病患者、健康者检测,结果均为阴性。表明该组抗原有较高的特异性,而灵敏度比粗抗原(91.9%)仅略有降低。

肝包虫病患者血清可溶性白细胞介素2受体的研究

应用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定38例肝包虫病患者和41例健康人血清可溶性白细胞介素2（sIL－2R）。结果：健康人血清slL－2R平均值为239．2±81．1U／ml，肝包虫病患者血清sIL－2R平均值为770．8±369．7U／ml，明显高于健康对照组（P＜0．01）。血清sIL－2R水平的增高与肝包虫病密切相关。

细粒棘球绦虫原头蚴抗原对犬的免疫效果和抗原组份分析

分别用细粒棘球绦虫活原头蚴勾浆抗原和分泌抗原2ml(蛋白含量2mg/ml),加完全佐剂和不完全佐剂,免疫犬2次,每次间隔21d,可使犬获得不完全抗攻击感染的能力.匀浆抗原的免疫效果优于分泌抗原,感染率为25%,与对照组90%比有显著差异,并对体内虫体的发育有明显抑制作用,孕卵率为0;分泌抗原组的感染率、孕卵率与对照组相比差异不大.经抗原蛋白组份分析,原头蚴匀浆抗原显示14条蛋白组份,分别为22.5、31.0、36.0、40.0、42.1、46.5、5l.0、57.6、66.2、74.4、83.1 KD,94.0 KD以上有3条蛋白组份.其中83.1KD和 94.0 KD以上3条蛋白组份可被免疫犬和对照阳性犬血清识别.

包虫病患者唾液中特异性抗体的检测

目前在人体包虫病诊断中普遍为大家所公认的较好方法是Ｂ型超声波和血清学诊断，后者尤以经济，简便的特点而适宜基层。然而该方法也存在一些尚待改进的问题。目前使用的血清学方法需静脉抽血，对受检者有一定痛苦，因而在包虫病流行病学调查中，不易为人们所接受，幼儿采...

三株分泌抗细粒棘球蚴囊液抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞的建立和初步鉴定

以羊肝细粒棘球蚴囊液抗原免疫BaLb/c鼠脾细胞与SP2/o骨髓瘤细胞常规方法融合。用人肝棘球蚴囊液抗原间接ELISA法检测,获得3株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,2G_4、2F_1和2F_(10)。对人肝包囊液抗原ELISA的终点分别为1∶204800,1∶819200和1∶3200。对纯化羊肝包囊液抗原致敏羊血球IHA的终点均为1∶512,但3株单抗等量混合后IHA滴度达1∶4096。对猪囊尾蚴抗原的ELISA滴度分别为1∶4000、1∶2000和1∶2000。对泡球蚴抗原ELISA滴度分别为1∶2000、1∶1000和1∶2000。交叉阻断ELISA试验的结果初步显示此3株单抗可能识别不同的抗原表位。3株细胞在液氮中冻存两年复苏后,仍继续稳定分泌抗体。

影响包虫病人体液免疫应答相关因素的实验研究

本文报道了应用ELISA法对影响包虫病人体液免疫应答的相关因素进行的实验研究。结果表明，包虫在人体不同病理生理状态、不同寄生部位及血清循环免疫复合物的形成，均可影响抗E．g．特异抗体的免疫应答，表现为抗体反应性低及假阴性反应。对特异性抗E．g．抗体全部阴性包虫病人检测结果证实．确有包虫病患者血清内缺乏可测出的特异抗体，可能由于CIC的存在而造成血清中可检测的游离抗体耗竭。提示检测CIC有辅助和提高包虫病人免疫诊断的价值。

包虫病抗体免疫应答与包虫大小和数量关系的实验观察

本文报道检测126例原发包虫病人血清特异抗体．对免疫应答与包虫大小和数量之间关系进行的实验观察。结果表明，包虫患者特异抗体阳性率随包虫直径增长和寄生数量的增多而升高；抗体吸光度值的高低与包虫直径和数量显著相关（P＜0．001）；IHA抗体阴性35例包虫患者中，单发包虫占68．57％，变性坏死包虫占34．29％．肺包虫占28．57％。实验说明，包虫病病人的抗体免疫应答程度与包虫生活状态和寄生部位有关．而与包虫大小和寄生数量呈正相关。

包虫病人特异性IgM型和IgE型循环免疫复合物的初步研究

应用ABC-捕获ELISA法研究了包虫病人血清中特异性IgM型和IgE型循环免疫复合物(IgM-CIC,IgE-CIC)。IgM-CIC的检出率为47.6％,IgE-CIC为64.3％。肺包虫病人中CIC的检出率略高于肝包虫病,但无显著性差异。特异性IgE抗体阴性的包虫病人中,IgE-CIC检出率达89.5％,而抗体阳性者中为57.7％。在5例特异性IgM抗体阴性的肺包虫病人中,有4例IgM-CIC阳性,而4例IgM抗体阳性者中仅1例CIC阳性。表明由于CIC的形成可造成特异性IgM和IgE游离抗体的“耗竭”。用8M尿素处理后,三种特异性CIC均可被解离。用单克隆抗体检测解离抗原的阳性率在IgG-CIC中为51.3％,在IgM-CIC中为75.0％,在IgE-CIC中为75.9％,证明解离效率与相应抗体的亲和力呈反比。作者认为,包虫病人特异性抗体的检出,不能反映抗体应答的真正水平,抗体阳性加上抗体阴性而CIC阳性者,才能完全反映抗体应答的频率:在IgG为95.2％,IgM为85.1％,IgE为95.6％。提示包虫病人IgM-CIC和IgE-CIC的检测可大大提高免疫诊断的价值,有实际意义。

用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳对人、沙鼠、小鼠泡球蚴抗原的比较研究

用SDS-PAGE对不同宿主泡球蚴抗原进行了比较分析。6种泡球蚴的蛋白质带数各为36、15、22、23、36和23条。主带均分布于84kD以下,19、22、29、30、31、32、34、41、42、60～62和67kD为共同具有的带。三种宿主的蛋白质带数和带形不尽相同。沙鼠泡球蚴蛋白质带数最多为36条,人泡球蚴为22和23条。小鼠泡球蚴以传种二代小鼠带数最少仅15条,且各带淡染,68kD以上无带,以虫卵感染小鼠23条,且各带均较清晰。在使用的三种离心速度和时间以及用或不用超滤膜超滤的蛋白质带数未见明显不同。

人体包虫病主要特异性免疫球蛋白的水平及其临床意义

本文报道了应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测包虫病人血清中抗包虫特异性免疫球蛋白(IgG和IgM)的水平并对其临床意义进行了初步探讨。48例正常人血清特异性IgG和IgM的假阳性检出串均为0％;24例囊尾蚴病人血清特异性抗包虫IgG和IgM的假阳性检出效分别为:33.4％;4.16％;42例包虫病患者血清特异性IgG和IgM的阳性检出率分别为:80.95％,66.67％;两者之差经统计学处理具有显著意义(p<0.05)。肝包虫特异性IgG的阳性检出率较肺包虫高,肺包虫特异性IgM的阳性检出率较肝包虫高。这提示患者对包虫的免疫应答和其寄生的位置有关;诱导产生的特异性免疫球蛋白主要为IgG类,特异性IgM的水平与包虫囊壁的完整与否以及检测方法的灵敏性、特异性有关。

免疫亲和层析纯化棘球蚴囊液特异性抗原的研究

应用兔抗健康人血清球蛋白吸附柱、兔抗猪囊尾蚴血清球蛋白吸附柱分别对人棘球蚴囊液粗抗原进行了免疫亲和吸附，制得纯化抗原，并用ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法检测其抗原性。试验表明：经兔抗猪囊尾蚴血清球蛋白吸附柱纯化的抗原与人猪囊虫病血清的交叉反应为０，表明基本去除了粗抗原中所含的与猪囊尾的交叉成份。经兔抗健康人血清球蛋白吸附柱吸附后的抗原，并不影响对棘球蚴病人的阳性检出率，并在琼脂扩散试验中与兔抗人血清球蛋白之间没有出现沉淀线，这表明基本除去了粗抗原中的宿主成分。

棘球蚴病患者血清特异性IgE免疫应答的研究

以纯化的棘球蚴抗原对棘球蚴病患者、非棘球蚴病患者和健康人血清进行斑点免疫结合试验,以检测棘球蚴病患者特异性IgE抗体。当血清稀释度为1:100时,79例棘球蚴病患者血清的阳性符合率为94.9％,69例非棘球蚴病患者血清和119名健康人血清的假阳性率为3.2％,标准误差为2.79％。不同部位的棘球蚴病患者血清的阳性符合率分别为:肝肺并发棘球蚴病100.0％,肝棘球蚴病97.5％,肺棘球蚴病93.5％,腹腔棘球蚴病75.0％。阻断试验、替代试验和诊断试验结果提示棘球蚴病患者特异性IgE免疫应答检测试验可以作为棘球蚴病血清学诊断的参考试验之一。

泡球蚴病人血清贮于-20℃不同时间抗体效价变化研究

用小鼠泡球蚴(MAH)和沙鼠泡球蚴(GAH)抗原ELISA对-20℃贮存3.5～6年的泡球蚴患者抗体作了检测。结果两种抗原敏感性各为98.1％和100％,与3.5～6年前的敏感性100％无统计学差异。用GAH抗原检测,50％病例抗体滴度下降,但38.5％病例抗体滴度增加,还有11.5％抗体滴度相同。在滴度下降病例中,76.9％下降1～2个滴度。贮存3.5～6年的抗体,其滴度在1:1600以上者仍占71.2％,且几何均数为原来用细粒棘球蚴液的1.1746倍,说明沙鼠泡球蚴抗原是检测泡蚴病的最适抗原。

包虫病人血清中的IgG、IgA和IgM水平

比较了83例包虫病患者和104例健康人血清中的IgG、IgM和IgA水平。包虫病人的IgG和IgM水平(iu/ml)均非常显著地高于健康人,而IgA水平与健康人无显著差别。肺包虫患者的IgG、IgA和IgM水平均与健康人无显著差别。以几何均数计,腹腔包虫患者的IgG、IgA值最高,肺包虫患者的IgG和IgA、IgM值最低。

新疆不同宿主来源细粒棘球蚴囊液可溶性蛋白质组分抗原性分析

应用免疫印渍法对新疆羊、人、牛、骆驼源细粒橡球蚴囊液可溶性蛋白质组分的抗原性进行比较分析。十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)显示羊、人、牛、骆驼源细粒棘球蚴囊液各含有多个蛋白质组分,免疫印渍法显示包虫病人血清主要识别囊液中65、56、38、35、30、25、23、16、12和10KD蛋白质抗原成分,以38KD蛋白质抗原组分反应性最强。泡球蚴病人、绦虫病人和一些非寄生虫病患者血清可广泛地与38KD组分发生交叉反应。16、12和10KD蛋白质抗原组分敏感性较弱但特异性较强,仅与泡球蝴病人血清发生交叉反应,是棘球属特异的。

肝包虫病患者血清中IL-6和TNF-a水平的研究

为了探讨肝包虫病患者血清白细胞介素6（IL－6）和肿瘤坏死因子a（TNF－a）水平及其与肝包虫病的关系，应用ELISA法检查42例正常人、27例肝包虫病人血清TNF－a水平，其中20例病人同时检测IL－6水平，结果显示肝包虫病患者血清IL－67水平为0．1626±0．100ng／ml，显著高于正常人0．0191±0．0168ng／ml（P＜0．001），TNF－a水平为8．9946±5．3112ng／ml，也显著高于正常人2．2967±0．9317ng／ml（P＜0．01），作者认为对IL－6和TNF－a水平的检测可作为肝包虫病患者免疫功能检查指标之一，对肝包虫病的发病机制并对疾病的严重程度、疗效及预后的判断具有重要意义。

肝细粒棘球蚴病肝组织细胞免疫及体液免疫反应的免疫组化定量研究

本研究用OK系列单克隆抗体对肝包虫患者肝组织的B、T淋巴细胞及其亚群进行免疫组化染色,且对其细胞密度、比值进行定量分析。发现肝包虫患者肝组织(距病灶>5cm),外囊及毗邻肝组织中CD_3^+、CD_(19)^+、CD_4^+及CD_8^+细胞密度均较对照组显著增高(P<0.01),外囊及毗邻肝组织CD_4^+/CD_8^+细胞的比值较肝包虫肝组织及对照组均有显著降低(P<0.01)。肝包虫肝组织内CD_(19)^+细胞与CD_3^+细胞密度间无显著性差异(P>0.1)。在肝实质区的灶状坏死区内,CD_8^+细胞占优势。实验结果表明,在肝包虫感染时体液免疫及细胞免疫均增强,局部组织反应中CD_8^+细胞占优势提示细胞免疫以抑制性免疫为主,且此抑制性免疫反应有梯度变化,距包虫囊越近则免疫抑制越强,CD_4^+细胞与CD_8^+细胞密度改变可能与肝组织纤维化有关。包虫病时体液免疫与细胞免疫为两个独立的免疫系统,无相关关系。本文研究结果可为包虫病患者化疗、预后提供科学依据。