中国人冠心病载脂蛋白B基因EcoRI酶切多态性的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）研究１００例正常人和１０３例冠心病人载脂蛋白Ｂ（ａｐｏＢ）基因ＥｃｏＲＩ酶切位点的限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）。结果表明：（１）正常人和冠心病人均以Ｅ＋等位基因为主，绝大数为纯合子Ｅ￣＋Ｅ￣＋基因型；（２）冠心病组中少见Ｅ等位基因相对频率为０．１１，明显高于正常对照组的０．０４（Ｐ＜０．０１）；（３）冠心病组中脂蛋白（ａ）水平≥０．３ｇ／Ｌ者，Ｅ￣－等位基因频率明显高于相应的低水平者，两者间关联的机制还不明了；（４）对ＥｃｏＲＩ酶切位点的核苷酸序列分析，Ｅ－等位基因系ｃＤＮＡ１２６６９位核昔酸Ｇ→Ａ突变所致，原有的ＥｃｏＲＩ酶切点消失。

免疫与冠心病

冠心病是一种与高血压、高血脂、吸烟、衰老等多种因素有关的严重威胁人类健康的疾病。本病的病理基础是动脉粥样硬化(AS),其发生机理尚不清楚。近年来,由于免疫学基础研究的进展,特别是单克隆抗体和脱氧核糖核酸(DNA)重组技术在这一领域研究中的应用,发现免疫系统的改变在AS的发病机理中有重要作用。据此,有作者提出了AS发病机制的自身免疫概念,得到了大量实验和临床研究的支持。一、免疫组织病理学变化应用细胞类型特异性单克隆抗体对AS斑块的细胞成分进行免疫组织化学分析。

冠心病患者的免疫学变化及临床意义

免疫反应在血管内皮损伤中起着重要作用,而冠状动脉粥样硬化的始动因素即为血管内皮损伤。所以有人认为,免疫反应参与了动脉粥样硬化的形成。本文观察117例冠心病患者血清中IgG、IgA、IgM以及C_3水平,进一步探讨免疫反应在冠心病中的重要作用。

冠心病患者红细胞免疫功能的变化

本文测定了正常人及冠心病患者的红细胞免疫功能。结果表明,冠心病患者的红细胞C_3b受体花环率(RBC-C_3bRR)降低,红细胞免疫复合物花环率(RBC-ICR)及循环免疫复合物(CIC)增高;且CIC与RBC-C_3bRR呈负相关,与RBC-ICR呈正相关;RBC-C_3bRR与RBC-ICR呈负相关,提示冠心病患者存在红细胞免疫功能低下,可能为继发性改变。

老年人冠心病载脂蛋白E基因多态性的临床意义

目的 :载脂蛋白 E (Apo E)基因的多态性对老年冠心病发病的意义。方法 :选择 10 0例老年冠心病患者 (CHD组 )及 10 0例键康者。测定其血清血脂及脂蛋白 [(L P(a) ]。应用聚合酶链反应法 (PCR) ,Hhal内切酶消化法确定 Apo E基因多态性。结果 :在冠心病组和对照组间 Apo E基因频率及 E2 、E3、 E4等位基因频率有显著差异 (P<0 .0 5 ) ;本组 E4/ 3、 E3/ 3基因组间比较 ,冠心病组 TC、 TG、 Apo B、 L P (a)较对照组高 (P<0 .0 5 ) ,HDL、 Apo A较对照组低 (P<0 .0 5 ) ,差别均有显著性 ,E2 / 4、E3/ 2型间比较 ,冠心病组 HDL、Apo A低于对照组 (P<0 .0 5 )。结论 :Apo E基因多态是影响血清 TC、 L DL - C、 L P (a)水平的重要遗传因素之一。 Apo E基因与动脉粥样硬化相关。E4等位基因是老年 CHD的危险因素。Apo E基因检测从人的遗传因素着手分析冠心病发病内在因素 ,给

重组腺病毒介导的人p27kip1基因高表达对体外培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞迁移的影响

目的 探讨重组腺病毒介导的p2 7kip1基因及其蛋白产物高表达对血管平滑肌细胞 (VSMCs)迁移的抑制作用。方法 将含人p2 7kip1cDNA的重组腺病毒 (Adhp2 7kip1)及含 β 半乳糖苷酶基因的重组腺病毒 (AdLacZ)在体外转染原代大鼠主动脉VSMCs,用Westernblot及Boyden趋化小室检测外源性p2 7kip1蛋白在细胞内的表达及对VSM Cs迁移的影响。结果 转染后 2 4h ,Adhp2 7kip1转染的VSMCs内p2 7kip1蛋白高表达 ,而AdLacZ转染的VSMCs内仅显示极低水平的内源性p2 7kip1蛋白表达 ;Boyden趋化小室检测显示未转染的VSMCs、AdLacZ及Adhp2 7kip1转染的VSMCs血清诱导后的迁移细胞数分别为 139± 2 6、10 6± 16及 6 8± 14。结论 外源性p2

冠心病患者中性粒细胞和单核细胞CD11b/CD18表达的研究

目的 :探讨不同类型冠心病患者中性粒细胞和单核细胞膜 CD11b/CD18表达的变化。方法 :选择经冠状动脉造影确诊的 49例心绞痛患者 ,30例急性心肌梗死患者和 2 0例正常人 ,用流式细胞仪直接免疫荧光法检测中性粒细胞和单核细胞膜 CD11b/CD18表达。结果 :冠心病患者中性粒细胞和单核细胞膜 CD11b/CD18表达较正常对照组均显著增加 (P<0 .0 1) ;不稳定性心绞痛和急性心肌梗死患者中性粒细胞和单核细胞膜 CD11b/CD18表达显著高于稳定性心绞痛患者 (P<0 .0 1)。与正常对照组比较 ,心绞痛患者组中性粒细胞和单核细胞计数无变化 (P>0 .0 5 ) ,而急性心肌梗死组明显增加 (P<0 .0 1)。急性心肌梗死患者中性粒细胞和单核细胞膜 CD11b/CD18表达与梗死范围无关。结论 :冠心病患者中性粒细胞和单核细胞膜 CD11b/CD18表达明显增加 ,其增加程度与心肌缺血的类型有关。

兔实验性动脉粥样硬化血浆脂蛋白脂酶和肝脂酶活性的变化

初步建立了兔肝素化血浆脂蛋白脂酶(LPL)和肝脂酶(HL)活性的测定方法,两种脂酶活性以水解三油酸甘油酯(TG)生成游离脂肪酸(FFA)的含量表示。测得雄性日本大耳白兔肝素化后15min血浆LPL、HL活性最大,批内差异分别为4.96%、3.26%;正常兔LPL、HL分别为12.15±4.07μmol·L^(-1)FFA/h·ml、17.11±6.80μmol·L^(-1)FFA/h·ml;实验兔喂饲胆固醇12wk形成动脉粥样硬化(AS)时LPL、HL活性分别为7.94±3.36μmol·L^(-1)FFA/h·ml、4.54±1.52μmol·L^(-1)FFA/h·ml,两者均较正常兔明显降低(P<0.005)。提示:在高胆固醇负荷时,LPL、NL活性降低可能促进了AS的形成。

过氧化物酶增生物激活受体γ在ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞凋亡中的作用

目的探讨氧化修饰的低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的机制和过氧化物酶增生物激活受体(PPARγ)特异性激动剂对培养的VSMC凋亡的影响,评价PPARγ在动脉粥样硬化(AS)发生和发展中的作用。方法培养的鼠VSMC中加入不同浓度ox-LDL和PPARγ的两种激动剂———环格列酮(ciglitazone)和15脱氧-前列腺素J2(15d-PGJ2),孵育24 h,用透射电镜观察细胞凋亡的特征性形态学改变;流式细胞仪测定细胞凋亡率。另外,在给予ox-LDL、ciglitazone和15d-PGJ2的同时,加入PPARγ的抑制剂PGF2α,比较未加和加入抑制剂PGF2α组之间VSMC的形态学改变、凋亡率。结果ox-LDL及ciglitazone、15d-PGJ2均可诱导VSMC凋亡,且凋亡率增加与3种物质的剂量变化有关;PGF2α能降低ox-LDL、ciglitazone和15d-PGJ2诱导的VSMC凋亡率。结论PPARγ内源性的配体ox-LDL诱导VSMC凋亡的作用是通过激活PPARγ途径实现的;PPARγ内源性的配体和特异性激动剂过度激活PPARγ途径有促进细胞凋亡而导致AS斑块不稳定性增加的可能。

肺炎衣原体感染与急性冠脉综合征的相关性

目的 :测定急性冠脉综合征 (ACS)患者阿奇霉素治疗前后血肺炎衣原体 (Cpn) DNA及 Ig G抗体滴度 ,探讨肺炎衣原体感染与 ACS发生的相关关系。方法 :选择 ACS95例 (观察组 )及冠状动脉造影正常的 5 5例非冠心病 (对照组 )。观察组采用随机双盲安慰剂对照的方法分别给予阿奇霉素及安慰剂治疗 6个月 ,治疗前后应用巢式 PCR法测定外周血单核细胞中 Cpn- DNA,用间接微量免疫荧光法测定 Ig G抗体滴度。结果 :Cpn- DNA阳性率及 Ig G抗体滴度观察组较对照组比较阳性率明显增高。治疗后 DNA转阴率阿奇霉素治疗组明显优于安慰剂组 ,Ig G抗体滴度治疗后无明显变化。结论 :ACS患者肺炎衣原体感染率高 ,检测 DNA临床价值更大。

免疫功能低下患者巨细胞病毒性肺炎的诊断和治疗

目的:探讨免疫功能低下患者巨细胞病毒(CM V)肺炎的诊断和治疗。方法:对31例免疫功能低下患者CM V肺炎的临床资料进行回顾性分析。结果:均接受免疫抑制剂治疗。接受移植手术者27例,死亡7例,CM V肺炎相关病死率22.2%;患有免疫系统疾病者4例,死亡3例,CM V肺炎相关病死率75%。结论:对器官移植患者和长期接受免疫抑制剂治疗的免疫功能低下患者应加强对CM V的监测,早期诊断,及时应用以更昔洛韦为主的综合治疗。

IL－6、TNF调节冠心病人单个核细胞CD11b抗原表达的研究

采用免疫组织化学碱性磷酸酶标记ＡＢＣ（ＡＢＣ－ＡＰ）法显示。并用图像分析仪进行定量分析，研究了冠心病人和正常人单个核细胞ＣＤ１１６抗原表达及白介素－６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）对白细胞分化抗原ＣＤ１１６表达的调节作用。结果表明，冠心病人ＣＤ１１６表达高于正常人，ＩＬ－６和ＴＮＦ对ＣＤ１１ｂ均有上调作用，且其对冠心病人ＣＤ１１ｂ的上调作用明显高于正常人，表明冠心病人ＣＤ１１ｂ表达对细胞因子的敏感性增强。

冠心病病人血清可溶性白细胞介素－2受体水平及T淋巴细胞亚群的变化

采用双抗体夹心法和碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法检测了８４例冠心病病人血清可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平和外周血Ｔ淋巴细胞亚群（ＣＤ４，ＣＤ８）的变化。结果显示，冠心病病人血清ｓＩＬ－２Ｒ水平明显高于对照组（Ｐ＜０．００１）；ＣＤ４，ＣＤ４／ＣＤ８明显降低，而ＣＤ８明显增高，与对照组相比差异有极显著意义（Ｐ＜０．００１），且急性心肌梗塞（ＡＭＩ）的变化较不稳定心绞痛（ＵＡ）和陈旧性心肌梗塞（ＯＭＩ）更明显。１周内病死的ＡＭＩ病人ｓＩＬ－２Ｒ和ＣＤ８的增高及ＣＤ４和ＣＤ４／ＣＤ８降低较存活者更明显（Ｐ＜０．００１）。提示血清ｓＩＬ－２Ｒ水平和Ｔ淋巴细胞亚群异常与冠心病的病情和预后有密切关系。

冠心病与血清可溶性白介素2受体的关联研究

目的：探讨冠心病患者可能的免疫学变化及免疫学发病机制。方法：用酶联免疫吸附方法测定了２０例心肌梗死、２０例心绞痛及２０例对照者的血清可溶性白介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）、免疫复合物（ＩＣ）、免疫球蛋白（Ｉｇ）及血脂水平。结果：冠心病患者的ｓＩＬ－２Ｒ较对照组明显升高，ＩＣ、ＩｇＧ水平亦升高，但ＩｇＭ降低。结论：研究结果揭示冠心病的发生发展确与机体免疫状态有密切关系，对阐明冠心病免疫学发病机制，利用免疫调节药物防治冠心病可能有一定的帮助。

冠心病患者血清中 CMV 抗体水平的研究

冠心病患者血清中ＣＭＶ抗体水平的研究赵丽１邵丽华２杨燕平３姜维林４黄涛５（１山东医科大学分子生物学实验室２山东医科大学卫生化学教研室３山东医科大学诊断学教研室４山东医科大学分析化学教研室５山东省卫生防疫站病毒室）我们用固相酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ...

家族性载脂蛋白B-100缺陷症(FDB)

家族性载脂蛋白B-100缺陷症(FDB)是近年研究较多的一种引起高胆固醇血症和未成年期心血管病变的常染色体显性遗传性疾病,它是由于载脂蛋白B-100基因的第26位外显子上一个点突变(G→A)引起的低密度脂蛋白与受体结合下降,使胆固醇于体内堆积所致。本文综述载脂蛋白B-100的结构、功能以及FDB的分子生物学基础、临床表现、检测方法、流行病学调查、治疗等国内外研究现状,以利于我们探索动脉硬化的发病机理,达到早期诊治目的。

老年肾虚证冠心病患者T淋巴细胞及其亚群的变化

以抗人Ｔ淋巴细胞ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８抗原的单克隆抗体检测６１例肾虚证老年冠心病患者外周血Ｔ细胞及其亚群，并与高血压病患者、健康老年人作比较。结果表明，老年冠心病患者ＣＤ３￣＋％、ＣＤ４￣＋％均较健康与老年高血压病人显著下降，各型肾虚冠心病患者ＣＤ３￣＋％均显著下降，而ＣＤ４￣＋％下降则随肾虚证的发展逐渐加重，在肾阳虚时ＣＤ８￣＋％亦显著下降。

热启动PCR结合限制性酶切分析检测冠心病患者载脂蛋白…

将传统聚合唱 酶链反应条件加以改进。

动脉粥样硬化病变的免疫组化研究——病变中T淋巴细胞亚群的分布

用单克隆抗体、免疫组化方法(ABC)对10例人动脉粥样硬化(AS)病变中T淋巴细胞亚群进行分析。观察结果发现:早期病变中总T淋巴细胞多于晚期,但各期病变中抑制性淋巴细胞(Ts)皆明显多于辅助性T淋巴细胞(T_H),T_H/Ts分别为1:1.8和1:2.3,其比值分别为0.36和0.43。这一结果表明:在AS病变中,Tu/Ts比值是降低的,这一变化是否与AS发生、发展有关,本文对其进行初探。