SARS病毒BJ01株空斑测定方法的建立

目的 建立SARS病毒空斑测定方法 ,为SARS病毒生物学研究提供手段。方法 将不同稀释度SARS病毒BJ0 1株分别接种Vero细胞单层 ,然后加营养琼盖。按DullbeccoR的方法计算空斑滴度。结果 SARS病毒BJ0 1株加营养琼盖后 ,3天即可出现空斑 ,形态呈圆形 ,直径 2 .5～ 3mm ,大小均匀。结论 建立的SARS病毒的空斑方法稳定 。

严重急性呼吸综合征康复者冠状病毒特异性抗体定量检测与分析

目的 检测SARS患者体内冠状病毒特异性抗体IgG、IgM的含量。方法 抽取 2 2例SARS康复者不同康复时期的血液 ,经病毒灭活后分离血清 ,用ELISA法对SARS病毒特异性抗体IgG、IgM进行检测。结果 IgG类抗体在所有康复者体内都呈阳性 ,且检测到康复 71天的患者该类抗体仍然没有衰减 ;IgM类抗体在康复 5 0天的部分患者 (5 / 2 2 ,2 2 73%)中仍呈阳性 ,而在 6 5天时则全部为阴性。对照组 2 2例 ,两类抗体全部为阴性。结论 可能所有SARS康复者体内都产生了冠状病毒特异的IgG类抗体 ,并且这种抗体可能持续较长时间。

严重急性呼吸综合征患者血清性激素水平的测定和评价

目的 观察严重急性呼吸综合征 (SARS)患者性腺是否受到损害。方法 采用电化学发光免疫技术检测 6 6例男性SARS患者的血清雌二醇 (E2 )、孕酮 (PROG)、促卵泡激素(FSH)、黄体生成素 (LH)和催乳素 (PRL)水平 ,并与 40名健康对照者进行比较。结果 SARS患者血清E2、PROG含量明显低于对照组 (P <0 0 1) ,FSH、LH和PRL含量明显高于对照组(P <0 0 1)。重型SARS患者血清E2含量显著低于普通型。激素水平恢复要慢于临床症状的改善。结论 SARS患者中性激素含量异常 ,提示性激素水平改变有可能是SARS发病过程中的环节之一 ,SARS病程中性激素水平的恢复可能是一个缓慢的过程。

SARS-CoV病毒结构蛋白的融合蛋白及其高量表达与纯化和用途

本发明中融合蛋白的结构表示为X-Y-Z，其中X选自SARS-CoV病毒结构蛋白S或M或E或N，或它们的任意截短形式；Y是由O～20个氨基酸组成连接部分；Z是Fc及其变体或其它蛋白标签。本发明还提供了在哺乳动物细胞中高量表达和纯化此融合蛋白的方法，使其可进行批量制备或产业化生产。本发明所得的融合蛋白可制备预防SARS-CoV病毒感染的基因工程疫苗，SARS-CoV病毒检测试剂盒，及筛选可抑制S蛋白与其受体ACE2结合的抗SARS-CoV病毒感染的药物。本发明发现SARS-CoV病毒的的S蛋白与ACE2的结合，引起ACE2表达下调，从而导致或加剧急性肺损伤，对S蛋白与ACE2结合的片段进行改造，可增加预防SARS-CoV病毒疫苗的安全性。