肝纤维化发病机制及中医药抗肝纤维化的研究进展

肝脏疾病已经成为当今影响人类身体健康和生活质量的重要因素,也是全球健康领域所面临的重大挑战,需要引起足够的重视。肝纤维化的进一步发展可导致肝硬化、肝癌等重症肝病。虽然许多科学研究都表明,肝纤维化早期具有可逆性,但这个逆转过程非常缓慢,甚至在并发症影响下,其逆转显得极为渺茫。因此,深入研究其发病机制并积极寻找有效药物对肝纤维化的治疗具有深刻意义。肝纤维化的病因主要包括慢性病毒性肝炎、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝病、胆汁淤积、寄生虫病以及自身免疫性疾病等。目前,其发病机制尚未完全明确,关键环节表现为肝星状细胞活化,并进一步转化为肌成纤维细胞。特征表现为大量细胞外基质过度增生与异常沉积,导致肝脏结构破坏和假小叶生成。同时肝纤维化伴随着多种细胞因子的紊乱与氧化应激反应等,这一过程涉及机体内多条重要的信号传导通路。在治疗肝纤维化方面,由于其复杂的发病机制,目前尚未找到确切有效的西药。而传统中医药,因其具有多靶点、辨证论治的优势,在肝脏疾病包括肝纤维化的研究与治疗方面已经取得了较为不错的进展。部分单味中药、中药复方以及中药单体在抗肝纤维化治疗中发挥了积极作用,但其抗肝纤维化具体的药理作用机制仍有待进一步探索。就肝纤维化的病因、发病机制以及中医药抗肝纤维化的研究进展进行了综述。

芪参软肝胶囊联合恩替卡韦对活动性乙型病毒性肝炎肝硬化肝纤维化指标及肝功能的影响

肝硬化是多种原因引起的慢性、进行性、弥漫性肝病，临床表现为恶心、呕吐、腹胀、肝脾大、蜘蛛痣、面色黧黑、腹水及出血倾向等，患者病情危重，病程漫长，自我感觉生活压力大，存在着焦虑、紧张、孤独和无耐等情感障碍，生存质量低下。据统计我国约有2000万慢性乙型病毒性肝炎患者，每年约9％以上可进展为肝硬化［1］。2012－04—2014－01，我们应用芪参软肝胶囊联合恩替卡韦治疗活动性乙型病毒性肝炎肝硬化45例，并与西医常规治疗45例对照，观察对肝纤维化指标及肝功能的影响，结果如下。

肝纤维化诊断与治疗的某些进展

肝病是危害我国劳动人民最严重、最常见的疾病之一,不论是病毒性,还是寄生虫性(主要是血吸虫)肝病的患病率均占全世界之冠.随着分子生物学技术在肝病研究中的应用,业已证明不同的致肝损伤的病因.均可引起肝纤维化.抗肝纤维化已成为治疗各种慢性肝病的中心问题,虽然肝纤维化发生机理尚不清,但肝纤维化的诊断与治疗已有较大的进展.本文扼要介绍这方面的研究进展.

血清Ⅳ型胶原、透明质酸及板层素对肝纤维化的诊断价值

本文用放射免疫法检测了２２０例各型肝病患者血清Ⅳ型胶原（Ⅳ－Ｃ）、透明质酸（ＨＡ）及板层素（ＬＮ）水平。结果显示各类肝病患者血清Ⅳ－Ｃ、ＨＡ及ＬＮ水平随病情进展而逐渐升高，以Ⅳ－Ｃ≥１３０μｇ／Ｌ、ＨＡ≥２６０μｇ／Ｌ、ＬＮ≥１６０μｇ／Ｌ为诊断肝纤维化的临界点，其敏感度、特异性、准确率分别达８０％以上，联合检测以Ⅳ－Ｃ与ＨＡ联合较为理想，说明三者可作为肝纤维化诊断较为敏感的指标，其中Ⅳ－Ｃ对早期肝纤维化的诊断优于ＨＡ和ＬＮ。

四氯化碳诱导小鼠肝纤维化模型的建立

目的 建立四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化动物模型。方法 用体积分数为 2 0 %四氯化碳皮下注射 3mon ,诱导昆明种小鼠肝纤维化形成。在造模 30d、6 0d、90d时 ,检测肝纤维化程度、肝脏羟脯氨酸和丙二醛含量、以及血清氨基转换酶和血清白蛋白水平。结果 小鼠肝脏纤维化程度和肝脏羟脯氨酸含量随造模时间延长而逐渐增加 (P <0 0 5～0 0 1) ,肝匀浆丙二醛含量和血清丙氨酸氨基转换酶明显升高 (P <0 0 1) ,造模后期血清白蛋白比例下降 (P <0 0 1)。结论 长期给予四氯化碳可导致小鼠肝纤维化形成 ,并有较明显的阶段性变化。

肝硬化糖代谢异常的研究

２６ 例肝硬化患者按口服葡萄糖耐量试验（ＯＧＴＴ） 分为糖代谢正常组和异常组，用放射免疫法测定血浆胰岛素、胰高血糖素、生长激素、皮质醇。结果：糖代谢异常组在糖负荷后０－５ ～２ｈ 血糖明显升高，空腹及糖负荷后２ ～３ｈ 血浆胰岛素显著增高，空腹及糖负荷后０－５ｈ 血浆胰高血糖素显著增高，血浆皮质醇明显降低，血浆生长激素两组比较差异无显著性，两组患者肝功能指标及胰岛素敏感性指数（ＩＳＩ） 均有明显差异。提示肝硬化糖代谢异常的发生与胰高血糖素增高、肝功能降低、组织胰岛素敏感性下降等因素有关。

氧化苦参碱对大鼠肝纤维化的影响

目的：探讨氧化苦参碱对实验性肝损伤肝胶原合成度及纤维化的影响。方法：采用ＣＣｌ４造成大鼠慢性肝损伤肝纤维化模型，同时用氧化苦参碱防治，并动态观察血清丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）、Ⅳ型胶原（Ⅳ－Ｃ）、透明质酸（ＨＡ）、肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦα）的水平及肝组织病理变化，通过计算机图像分析系统分析肝内纤维组织增生情况。结果：氧化苦参碱治疗组血清ＡＬＴ，Ⅳ－Ｃ，ＨＡ，ＴＮＦα水平及肝组织内炎症活动度、纤维组织增生程度均低于模型组，且大剂量治疗组又低于小剂量治疗组。结论：氧化苦参碱有减轻肝脏炎症活动度、抑制肝内胶原合成度及抗肝纤维化作用。

α_1型基因工程干扰素和汉丹冲剂治疗早期肝硬化的组织学研究

α_１型基因工程干扰素和汉丹冲剂治疗早期肝硬化的组织学研究程明亮，陆彤，吴亚云，刘琴，罗永芳，丁一生，李媛媛１９９３年１０月～１９９４年１０月，我们应用α１型基因工程干扰素和汉丹冲剂，治疗经临床与肝活检证实的慢性肝炎早期肝硬化１６例，取得较好疗效，现?..

内毒素诱发肝硬化大鼠发生肝性脑病的实验研究

目的：观察外源性内毒素诱发肝硬化大鼠发生肝性脑病的可能性及可能机制。方法：采用腹腔内小剂量内毒素一次性注射（３００μｇ／１０ｇＢＷ）诱发肝硬化大鼠发生肝性脑病。结果：小剂量内毒素腹腔内注射可以诱发肝硬化大鼠发生肝性脑病。内毒素注射后，动物一般行为状态及脑电图皆有明显变化，与其他肝性脑病模型或肝性脑病病人类似。同时，血氨和胰高血糖素水平显著升高。血浆内毒素含量与血氨、血胰高血糖素含量之间及血氨与血及脑匀浆谷氨酰胺含量之间皆存在明显的正相关。结论：内毒素血症可通过其本身的直接作用或通过胰高血糖素血症导致血氨水平的增高。高氨血症时，氨很可能通过其在脑内的代谢产物－谷氨酰胺而最终影响中枢神经系统的功能、导致脑病的发生。高氨血症是内毒素诱发肝性脑病发生的主要环节之一。

烟叶硒蛋白在实验性小鼠肝损伤中的抗氧化作用

观察了烟叶硒蛋白（Ｓｅ－Ｒｕｂｉｓｃｏ）对四氯化碳肝损伤小鼠的保护作用。结果表明了一次灌胃６％四氯化碳油溶液１０ｍｌ／ｋｇｂｗ可使小鼠肝组织严重受损，谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力急剧降低，脂质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）显著上升。若提前补充烟叶硒蛋白或亚硒酸钠７ｄ，则可降低ＣＣｌ＿４对肝的损伤，并呈现出剂量效应关系，同时在抗脂质过氧化方面，硒蛋白明显优于亚硒酸钠和不含硒蛋白（Ｒｕｂｉｓｃｏ）组。

汉防己甲素对成纤维细胞、人胎肝细胞DNA及胶原合成的影响

以小鼠胚胎３Ｔ３成纤维细胞株及人胎肝细胞株为细胞模型，以３Ｈ－脯氨酸掺入量及掺入抑制率为指标，观察具有钙拮抗剂作用的汉防已甲素对两种细胞增殖及胶原合成的影响。结果表明，１０～５０μｇ／ｍｌ浓度范围内，汉防已甲素能显著抑制两种细胞增殖及胶原合成，抑制作用与浓度呈正相关。

层粘蛋白与肝硬化的动物实验研究

对四氯化碳诱导的肝硬化大鼠作不同期肝组织匀浆和血清中层粘蛋白（Ｌａｍｉｎｉｎ，ＬＮ）含量的动态分析，并用免疫组化法观察ＬＮ在肝内的分布。结果发现，血清ＬＮ含量在大鼠肝脏受损后早期即开始升高，并与肝脏组织学改变及肝功能变化相平行。肝匀浆ＬＮ含量在肝硬化晚期才升高，免疫组化也显示ＬＮ在肝硬化晚期沉着加深。本文提示，血清ＬＮ变化能反映早期肝脏损伤和肝组织病变的活动进程，对早期诊断肝硬化有价值。肝组织内ＬＮ大量增多，预示慢性肝病发展到晚期肝硬化。

促肝细胞生长素、IFN及IL－2对成纤维细胞增殖和分泌作用

本文探讨了促肝细胞生长素（ＰＨＧＦ）、重组干扰素ａ－２ｂ（ＩＦＮ）及白细胞介素２（ＩＬ─２）对体外培养成纤维细胞增殖的作用。结果表明，ＩＦＮ和ＩＬ─２可促进细胞的增殖和核分裂，发挥丝裂原作用。ＰＨＧＦ则抑制细胞增殖和核分裂，线粒体和粗面内质网变性，其培养上清羟脯氨酸（ＨＹＰ）水平降低。提示ＰＨＧＦ通过抑制成纤维细胞增殖和细胞产生ＨＹＰ的分泌作用，而发挥抗纤维化作用。Ｐ＜０．０１。讨论肝纤维化早期，细胞因子网络异常可导致肝纤维化的发生和发展〔２〕。据ＣｇａｊａＭＪ氏研究，ＩＦＮγ可减少胶原ｍＲＮＡ水平，抑制肝内纤维的产生〔３〕高春芳等报道，ＩＦＮ可促进体外培养肝细胞和Ｔ３细胞增殖，其机制不清〔４〕。ＩＬ─２是由Ｔ细胞产生的淋巴因子，在机体免疫调节中发挥重要作用。已有报道，慢性乙肝病人ＩＬ─１活性增强，与肝纤维化程度有关。其ＩＬ─２活性低下，与肝纤维化无相关性。〔５〕。本文结果表明，ＩＦＮ和ＩＬ─２单独作用于成纤维细胞，均促进细胞分裂，使其数量增多，核分裂明显增多，并使线粒体数量增多。线粒体的增生，可活跃细胞的生物氧化功能和蛋白质合成，促进其代谢和分化，从而发挥丝裂原的作用。ＨＹＰ是体内胶原纤维的主要成分，其含?

谷胱甘肽辅助治疗重型病毒性肝炎和肝炎肝硬化

目的：探讨谷胱甘肽辅助治疗重型病毒性肝炎和肝炎肝硬化的疗效。方法：４０例病人分成２组，治疗组２０例（男性１６例，女性４例；年龄４４±ｓ１１ａ）在综合性治疗（用甘草酸二铵、肝细胞生长因子、茵栀黄等）基础上用谷胱甘肽０．６～１．２ｇ加入１０％葡萄糖注射液２５０ｍＬ中静脉滴注，ｑｄ，连续１～２ｍｏ。对照组２０例（男性１８例，女性２例；年龄４６±１２ａ）单用综合治疗。结果：治疗组症状、体征改善明显优于对照组（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）。总胆红素、凝血酶原时间变化亦优于对照组（Ｐ＜０．０５），但丙氨酸转氨酶治疗后２组间无明显差别（Ｐ＞０．０５）。结论：谷胱甘肽辅助治疗病毒性肝炎及肝炎肝硬化有较好的疗效。

IFN、IL-2、IL-6及生育酚对贮脂细胞增殖和胶原形成的调节

贮脂细胞具有成纤维细胞和肌原纤维细胞的特性,参与肝脏胶原及非胶原蛋白代谢,在肝纤维化形成中有重要作用。本文报告在分离、培养贮脂细胞的基础上,研究r-IFIN、IL-2、IL-6和生育酚对贮脂细胞增殖及合成胶原影响,提示γ-IFN、生育酚具有抗肝纤维化作用;IL-2促进胶原及非胶原蛋白的合成和沉积;IL-6可使胶原合成量增加。

慢性肝病患者血清TGF-β1与肝纤维化指标和肝组织病理的关系

目的观察慢性乙肝、肝硬变患者血清转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）与血清肝纤维化指标和肝组织病理的关系．方法采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）测定７６例慢性乙肝、肝硬变患者（其中慢性轻度２０例、中度２０例、重度１８例、肝硬变１８例）血清ＴＧＦβ１．同时检测血清ＰＣⅢ，ＬＮ，ＨＡ．２９例作肝活检，行ＨＥ染色．结果慢性乙肝轻、中、重度及肝硬变患者血清ＴＧＦβ１水平（ｍｇ／Ｌ，１４４±５７，３５０±１０８，５０８±１３３，５７９±２２５）明显高于对照组（ｍｇ／Ｌ，９５±３４，Ｐ＜００１），按慢乙肝轻、中、重度、肝硬变依次升高（Ｐ＜００１或Ｐ＜００５）；ＴＧＦβ１与血清ＰＣⅢ，ＬＮ，ＨＡ呈正相关（Ｐ＜００１或Ｐ＜００５）；血清ＴＧＦβ１，ＰＣⅢ，ＬＮ，ＨＡ水平随着肝组织纤维化程度的加重而增长（Ｐ＜００１或Ｐ＜００５）．结论慢性乙型病毒性肝炎、肝硬变患者血清ＴＧＦβ１与肝纤维化的血清标志以及肝组织病理改变相一致．

部分性脾栓塞术治疗肝硬化并门脉高压及脾功能亢进

本文对16例无外科手术条件的肝硬化并门脉高压、脾功能亢进(简称脾亢)、食管胃底静脉曲张或破裂致上消化道出血病人进行了部分脾栓塞治疗,现总结如下:

血清纤维化指标与肝组织病理和肝组织纤维定量关系的实验研究

目的 本研究观察实验大鼠血清纤维化三项指标与肝组织病理和纤维定量之间的确切关系，探讨其临床应用价值．方法 利用人血清蛋白免疫损伤Ｗｉｓｔａｒ 大鼠造成肝纤维化模型，综合分析模型组、促肝细胞生长因子治疗组和正常对照组之间血清肝纤维化指标、肝组织病理改变、肝组织胶原纤维和网状纤维病理图象定量分析等变化．结果 模型组血清肝纤维化指标（ＰＣⅢ，ＨＡ，ＬＮ） 均高于对照组，差异有显著意义（ Ｐ＜ ０－０５ 或Ｐ＜ ０－０１） ． 光镜下肝组织病理变化，肝组织胶原纤维和网状纤维病理图象定量分析模型组结果均高于对照组（ Ｐ＜ ０－０５） ．结论 血清三项指标与肝组织病理和纤维定量呈现一致性改变，显示良好的正相关．