过表达lncRNAHEM2M改善非酒精性脂肪肝病小鼠的肝脏损伤

目的探讨过表达长链非编码RNA(lncRNA)HEM2M对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠肝损伤的影响。方法野生型C57BL/6(WT)和条件性髓系细胞lncRNAHEM2M过表达(MYKI)小鼠分别喂饲普通饮食(ND)和高脂饮食(HFD),即为WT+ND、MYKI+ND、WT+HFD和MYKI+HFD组。12周后行腹腔糖耐量及胰岛素耐量试验后处死小鼠,检测小鼠血清和肝脏组织的肝功能指标,制备肝脏组织切片后行HE染色和F4/80免疫组化染色,ELISA法检测肝脏组织中IL-6、IL-1β和TNF-α水平,qRT-PCR检测M1型(TNF-α、iNOS和IL-6)和M2型(Arg-1、YM-1和IL-10)巨噬细胞标志物mRNA表达,免疫印迹检测肝脏组织中P-AKT、T-AKT、NLRC4、caspase-1和GSDMD蛋白表达,比色法和免疫荧光测定肝脏组织caspase-1活性。结果与HFD喂饲的WT小鼠相比,MYKI+HFD小鼠肝功能损伤减轻(P<0.01),肝脏脂肪变缓解,肝脏巨噬细胞浸润减少,糖耐量损伤及胰岛素抵抗改善(P<0.01);MYKI+HFD小鼠肝脏组织IL-6、IL-1β和TNF-α水平降低(P<0.01),M1型巨噬细胞标志物mRNA表达减少(P<0.01),M2型mRNA表达增加(P<0.01);MYKI+HFD小鼠肝脏组织NLRC4炎症小体活性降低(P<0.01),活性caspase-1减少,GSDMD-N蛋白表达降低(P<0.05)。结论过表达lncRNAHEM2M降低NAFLD小鼠肝脏炎症因子水平,进而改善胰岛素抵抗并抑制肝脏NLRC4炎症小体激活,减少肝细胞焦亡,最终改善NAFLD小鼠肝脏损伤。

达格列净联合水飞蓟宾治疗2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者疗效分析

目的探讨达格列净联合水飞蓟宾对2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者的治疗效果。方法收集2021年1月—2022年12月新疆医科大学第五附属医院内分泌科诊治2型糖尿病合并NAFLD患者104例作为研究对象,按随机数字表法分为对照组52例和研究组52例,2组患者均给予常规治疗及二甲双胍降血糖治疗,研究组在此基础上给予达格列净联合水飞蓟宾治疗,治疗6个月后,比较2组患者治疗前后糖脂代谢指标、肝功能、肝脏硬度、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)以及脂联素(APN)水平变化。结果治疗后2组患者糖化血红蛋白、空腹血糖、餐后2 h血糖以及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)较治疗前下降,且研究组低于对照组(t/P=3.411/<0.001,2.926/0.005,3.578/<0.001,2.672/0.015),研究组患者治疗后体质量指数(BMI)、腰臀比、内脏脂肪面积、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)以及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)明显低于治疗前,且低于对照组(t/P=2.873/0.008,2.435/0.013,4.878/<0.001,3.997/<0.001,2.265/0.025,1.997/0.038);研究组患者治疗后天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)以及总胆红素较治疗前明显下降,且研究组患者低于对照组(t/P=5.737/<0.001,4.971/<0.001,3.258/<0.001);治疗后研究组患者TNF-α降低,SOD及APN升高,且研究组降低/升高幅度大于对照组(t/P=2.453/0.021,3.842/<0.001,3.927/<0.001);治疗期间2组患者恶心呕吐、腹泻、腹胀、便秘、体质量增加、贫血以及低血糖等不良反应发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在二甲双胍降糖治疗基础上给予达格列净联合水飞蓟宾可明显改善2型糖尿病合并NAFLD患者胰岛素抵抗水平以及肝功能,降低炎性因子水平和氧化应激损伤,提高APN水平。

酒精性肝病

酒精性肝病(ALD)涵盖不同的疾病表型,从脂肪变到炎症(脂肪性肝炎)、纤维化,并最终在一部分患者中发展为肝硬化及其相关并发症。本文对2023年ALD在流行病学、危险因素、自然史、发病机制、诊断、治疗、预后评估及慢病管理等方面的主要进展做一总结,并突出戒酒管理对作为ALD病因因素和预后主要驱动因素干预的重要性。

黄连-红曲药对干预非酒精性脂肪肝病的临床疗效观察及网络药理机制分析

目的观察黄连-红曲药对干预非酒精性脂肪肝病的临床疗效,并基于网络药理学分析其潜在的药理学机制。方法80例非酒精性脂肪肝病患者按照随机数字表法分为对照组、治疗组各40例。两组均采用西医常规治疗,治疗组在对照组的基础治疗上加入黄连-红曲药对。在患者连续治疗8 w后,对患者治疗前后的门冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转移酶(ALT)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)进行对比研究。通过TCMSP数据库和文献检索黄连、红曲成分,SwissTarget Prediction数据库预测成分作用靶点,Genecards获取脂肪肝相关靶点。对药物和疾病共同靶点构建PPI网络,同时进行GO和KEGG富集分析。结果经治疗后,两组患者AST、ALT、γ-GT、TC、TG、LDL-C较治疗前均明显降低(P<0.05),HDL-C均明显升高(P<0.05)。将治疗后的两组对比,治疗组较对照组AST、ALT、γ-GT、TC、TG、LDL-C均明显降低(P<0.05),HDL-C均明显升高(P<0.05)。网络药理分析显示黄连、红曲干预脂肪肝的生物学功能包括脂质代谢过程的调节、小分子代谢过程的调节、炎症反应、蛋白质磷酸化、离子传输的调节;关键的生物学通路为胰岛素抵抗、PPAR信号通路、NF-κB信号通路。结论黄连-红曲药对治疗非酒精性脂肪性肝病效果较好,能有效改善肝功能、血脂水平。网络药理学初步揭示了其治疗脂肪肝的机制,为临床用药提供参考,为后续实验研究提供支撑。

姜黄素灌胃对脂肪肝大鼠肠黏膜屏障损伤的改善作用及其机制

目的观察姜黄素灌胃对脂肪肝大鼠肠黏膜屏障损伤的改善作用,并探讨其作用机制。方法应用高脂饲料喂养SD大鼠建立脂肪肝模型后,分为模型组、姜黄素低剂量组、姜黄素高剂量组,每组10只;普通饲料喂养的SD大鼠10只,记为对照组。各组大鼠喂养8周后,姜黄素低剂量组给予200 mg/(kg·d)姜黄素灌胃,姜黄素高剂量组给予400 mg/(kg·d)姜黄素灌胃,对照组和模型组大鼠予以羧甲基纤维素钠灌胃,各组大鼠灌胃8周后处死。取各组大鼠肝脏、小肠组织,HE染色后光镜下观察病理学变化。取大鼠门静脉血,测定门静脉血浆LPS、二胺氧化酶(DAO)及血清ALT、AST。取小肠组织,测定丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用Western Blotting法检测小肠组织中核因子-E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白。结果对照组大鼠肝细胞结构正常,模型组肝细胞内可见大小不等的脂肪堆积,姜黄素低剂量组、姜黄素高剂量组肝细胞脂肪变减轻;对照组绒毛无充血及水肿,模型组绒毛结构破坏,姜黄素低剂量组、姜黄素高剂量组绒毛缺失减少。与对照组相比,模型组、姜黄素低剂量组、姜黄素高剂量组大鼠血浆LPS、DAO及血清AST、ALT水平均升高(P均<0.05),但姜黄素低剂量组、姜黄素高剂量组低于模型组(P均<0.05),且有剂量依赖性(P均<0.05)。与对照组相比,模型组、姜黄素低剂量组、姜黄素高剂量组大鼠小肠组织MDA含量均升高(P均<0.05),但姜黄素低剂量组、姜黄素高剂量组低于模型组(P均<0.05),且有剂量依赖性(P均<0.05);与对照组相比,模型组、姜黄素低剂量组、姜黄素高剂量组大鼠小肠组织SOD活性均降低(P均<0.05),但姜黄素低剂量组、姜黄素高剂量组高于模型组(P均<0.05),且有剂量依赖性(P均<0.05)。与对照组相比,模型组、姜黄素低剂量组、姜黄素高剂量组大鼠小肠组织中Nrf2、HO-1蛋白相对表达量均升高(P均<0.05),且姜黄素低剂量组、姜黄素高剂量组高于模型组(P均<0.05),且有剂量依赖性(P均<0.05)。结论姜黄素灌胃可改善脂肪肝大鼠的肠黏膜屏障损伤,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1通路改善肠道氧化应激状态有关。

睡眠障碍与非酒精性脂肪性肝病不同阶段的关联性分析

目的探索睡眠障碍与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发生发展的关系。方法选取2022年6月—2023年6月北京友谊医院健康体检队列和脂肪肝门诊队列共1868例参与者。收集所有受试者年龄、性别、文化程度和慢性病史等一般资料及生化等实验室指标,受试者独立完成匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)量表测评。根据诊断标准将受试者分为非脂肪肝组(non-NAFLD组)(n=1122)和脂肪肝组(NAFLD组)(n=746),其中NAFLD组按照发展阶段分为单纯脂肪肝组(SFL组)(n=624)和脂肪性肝炎组(NASH组)(n=122)。计量资料3组间比较采用单因素方差分析或Kruskal-Wallis H检验。计数资料3组间比较采用χ^(2)检验。采用二元Logistic回归分析睡眠因素与NAFLD的关联性,采用多分类Logistic回归分析睡眠因素与NAFLD不同阶段的关联性,并构建两个多因素模型校正可能的混杂因素,包括年龄性别校正模型和多因素校正模型,多因素校正模型校正了年龄、性别、文化程度、吸烟、糖尿病、高血压、BMI、TG、HDL-C因素。结果non-NAFLD、SFL和NASH组在年龄、性别、BMI、文化程度、吸烟、糖尿病、高血压、ALT、TG、HDL-C的比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。3组在PSQI量表总评分分级以及7个睡眠成分的0~3分分级中的人数比例比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。在多因素校正模型中,尚无睡眠障碍成分与SFL患病相关,而入睡时间长(OR=4.04,95%CI:2.33~7.03,P<0.001)、睡眠时间短(OR=3.53,95%CI:1.83~6.82,P<0.001)和睡眠紊乱严重(OR=2.96,95%CI:1.48~5.93,P=0.002)与NASH的患病风险密切相关。结论睡眠整体状况和其包含的睡眠障碍成分与SFL的患病并无明显关联,而入睡时间长、睡眠时间短和睡眠紊乱可增加NASH的患病风险,需要加以关注。

间充质干细胞对代谢功能障碍相关脂肪性肝炎的作用及机制研究

目的探讨间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)对代谢功能障碍相关脂肪性肝炎(Metabolic dysfunction-associated steatohepatitis,MASH)的作用及机制。方法(1)体内实验:8周龄C57BL/6小鼠高脂喂养24周后,给予链脲佐菌素一次性注射制作MASH模型。将造模成功小鼠随机分为MASH组(n=6)和MSCs组(n=6),另取6只同期正常饲料喂养小鼠为对照组(n=6)。MSCs组小鼠每周经尾静脉注射1×10^(6)MSCs,连续6周,MASH组和对照组给予同等剂量的磷酸缓冲盐溶液(Phosphate buffer saline,PBS)输注。输注结束后,检测3组小鼠肝功能、血脂;HE染色、油红染色观察肝脏病理改变;qRT-PCR检测小鼠肝脏及血清中炎症因子的表达。(2)体外机制研究:提取6周龄C57BL/6小鼠骨髓巨噬细胞,并分为3组(n=3):对照组、脂多糖(LPS)+干扰素-γ(IFN-γ)组及MSCs组。对照组为未处理的巨噬细胞;LPS+IFN-γ组:给予LPS和IFN-γ诱导为促炎型巨噬细胞;MSCs组:LPS+IFN-γ诱导后再经MSCs共培养24 h。处理结束后,通过流式细胞技术比较3组巨噬细胞表型变化,qRT-PCR比较巨噬细胞促炎因子TNF-α、IL-6和IL-1β的表达。结果(1)MASH小鼠给予MSCs输注后,血清AST、ALT水平低于MASH组[AST:(51.33±5.47)U/L vs.(83.33±4.50)U/L,P<0.05;ALT:(67.67±6.71)U/L vs.(111.33±5.47)U/L,P<0.05]。与MASH组相比,MSCs输注后,总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)呈下降趋势,甘油三酯(TG)下降明显[(0.69±0.24)mmol/L vs.(1.11±0.25)mmol/L,P<0.05],提示脂代谢得到改善。与MASH组相比,MSCs组肝细胞脂肪变减轻,炎细胞灶浸润减少,NAFLD活动度积分(NAFLD activity score,NAS)评分明显降低[(3.10±0.13)vs.(5.66±0.52),P<0.05]。MSCs组肝脏油红染色面积较MASH组明显减少[(36.30%±6.06%)vs.(53.10%±3.06%),P<0.05]。MSCs组炎症因子TNF-α、IL-1β及IL-6表达较MASH组明显下调(P<0.05),提示小鼠MASH明显减轻。(2)体外,LPS+IFN-γ诱导的促炎型巨噬细胞与MSCs共培养后,促炎表型CD11c的表达从79.01%±6.08%下降到39.67%±6.11%(P<0.05),抑炎表型CD206从22.67%±4.04%上升至44.67%±4.16%(P<0.05),炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β表达明显下降(P<0.05),提示巨噬细胞的促炎能力被明显抑制。结论间充质干细胞可以减轻代谢功能障碍相关脂肪性肝炎,可能与抑制促炎型巨噬细胞的促炎能力有关。

超声衰减参数联合血清PAI-1和ALT水平评估代谢相关脂肪性肝病患者肝脂肪变性程度的价值分析

目的分析超声衰减参数(UAP)联合血清纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平评估代谢相关性脂肪性肝病(MAFLD)患者肝脂肪变性程度的效能。方法2019年3月~2022年12月我院诊治的112例MAFLD患者均接受肝穿刺活检,所有受试者接受iLivTouch瞬时弹性成像检测UAP,采用ELISA法检测血清PAI-1水平,应用受试者工作特征(ROC)曲线分析UAP联合血清PAI-1和ALT水平评估MAFLD患者肝脂肪变性程度的效能。结果在112例MAFLD患者中,经肝组织病理学检查发现肝脂肪变1级(轻度)45例,2级(中度)42例和3级(重度)25例;重度肝脂肪变患者BMI、血清TC、TG和LDL-C水平分别为(32.6±2.4)kg/m^(2)、(6.6±0.9)mmol/L、(4.6±1.4)mmol/L和(4.0±0.9)mmol/L,显著高于中度患者【分别为(27.6±1.9)kg/m^(2)、(5.8±0.8)mmol/L、(3.5±0.9)mmol/L和(3.5±0.7)mmol/L,P<0.05】或轻度患者【分别为(24.1±0.9)kg/m^(2)、(5.1±0.7)mmol/L、(2.2±0.7)mmol/L和(3.0±0.5)mmol/L,P<0.05】,而血清HDL-C水平为(1.2±0.2)mmol/L,显著低于中度【(1.4±0.2)mmol/L,P<0.05】或轻度患者【(1.4±0.2)mmol/L,P<0.05】;重度组UAP、血清PAI-1和ALT水平分别为(312.7±32.6)dB/m、(36.5±4.2)mg/mL和(72.1±7.4)U/L,显著高于中度组【分别为(284.2±30.1)dB/m、(28.1±3.4)mg/mL和(36.3±4.1)U/L,P<0.05】或轻度组【分别为(257.4±26.4)dB/m、(20.4±2.4)mg/mL和(23.7±2.5)U/L,P<0.05】;ROC曲线分析显示,UAP联合血清PAI-1和ALT水平评估重度肝脂肪变性的曲线下面积(AUC)、特异度和敏感度分别为0.914(95%CI:0.883~0.990)、89.6%和93.3%,其特异度显著优于单一指标预测(P<0.05)。结论应用UAP联合血清PAI-1和ALT水平预测MAFLD患者严重肝脂肪变性有良好的评估价值,可为临床诊治提供参考依据。

代谢相关性脂肪性肝硬化诊疗进展

1代谢相关脂肪性肝病(metabolic associated fatty liver disease,MAFLD)相关性肝硬化的流行病学MAFLD亦曾被称为非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)。随着生活方式的改善,MAFLD发病率逐年增加。目前,MAFLD是患病率最高的慢性肝病[1]。采用随机效应模型对92项研究,包括了9361716例NAFLD患者进行的Meta分析[2]结果提示,在1990年~2009年期间,NAFLD全球总体患病率和超声诊断NAFLD患病率分别为30.1%(95%CI:27.9%~32.3%)和30.7%(95%CI:28.4%~33.1%)。全球不同地区NAFLD患病率存在一定的差异,从非洲撒哈拉以南地区的14%到南美洲的44%,差异较大。我国NAFLD流行现状亦不容小觑。

瘦素受体基因rs1137101位点多态性与老年人群代谢相关脂肪性肝病发生风险的关系研究

目的探讨瘦素受体(LEPR)基因rs1137101位点多态性与老年人代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)发病风险的关系。方法2020年1月—2021年9月于北京市门头沟社区招募健康体检的1019例老年志愿者,其中MAFLD组569例、非MAFLD组450例。记录受试者的临床资料,基因芯片法检测LEPR-rs1137101多态性基因分型。Logistic回归分析评估基因多态性与MAFLD发生的关系。结果老年人群MAFLD患者携带rs1137101 G>A多态性较非MAFLD患者多(36.91%vs 24.00%,P<0.05)。携带LEPR-rs1137101 A等位基因与MAFLD的发生风险增加有关(OR=1.695,95%CI:1.1402.520,P<0.05)。结论老年人群LEPR-rs1137101 A基因可能与MAFLD的发生有关。

老年人非酒精性脂肪性肝病与骨质疏松的关联分析

目的分析老年人非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)与骨质疏松的关系及影响因素。方法选取2016年6月—2023年4月于北京大学人民医院老年科住院的年龄≥60岁的824例患者,其中骨质疏松组398例,非骨质疏松组426例。收集研究对象的一般资料、血生化指标,肝脏B超检查及双光能X线骨密度结果等。符合正态分布的计量资料2组间比较采用成组t检验,非正态分布的计量资料2组间比较采用Mann-Whitney U检验,分类变量采用χ^(2)检验进行分析;采用二元Logistic回归分析骨质疏松的独立影响因素。结果与非骨质疏松组相比,骨质疏松组年龄较大,女性更多见,糖尿病占比较高,身体质量指数(BMI)较低,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。骨质疏松组患者NAFLD占比高于非骨质疏松组(36.2%vs 24.6%,χ^(2)=12.878,P<0.001)。骨质疏松组患者血红蛋白、尿酸、Alb水平低于非骨质疏松组,总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、骨特异性碱性磷酸酶、抗酒石酸酸性磷酸酶水平高于非骨质疏松组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。二元Logistic回归分析结果显示,高龄(OR=1.040,95%CI:1.015~1.066,P=0.002)、女性(OR=4.089,95%CI:2.607~6.411,P<0.001)、NAFLD(OR=1.697,95%CI:1.076~2.678,P=0.023)、糖尿病(OR=1.509,95%CI:1.008~2.260,P=0.046)、LDL-C(OR=1.431,95%CI:1.010~2.029,P=0.044)是老年患者骨质疏松的独立危险因素。考虑糖尿病对研究结果的影响,进一步对非糖尿病老年患者进行亚组分析,结果显示NAFLD仍是老年非糖尿病患者骨质疏松的独立危险因素(OR=1.573,95%CI:1.015~2.439,P=0.043)。结论NAFLD、高龄、女性是影响老年患者骨质疏松的独立危险因素。

MRI-DWI联合超声声衰减成像诊断脂肪肝背景下<2 cm局灶结节性病变的价值

目的探讨磁共振成像-弥散加权成像(MRI-DMI)联合超声声衰减成像(ATI)诊断脂肪肝背景下<2 cm局灶结节性病变的价值。方法回顾性分析2022年6月至2023年6月河南大学淮河医院收治的68例脂肪肝合并<2 cm局灶结节性病变的临床资料,所有患者均接受MRI检查、病理学检查与ATI检查。根据脂肪肝病变程度不同将68例患者分为重度组(n=24)、中度组(n=27)、轻度组(n=17)。对比不同局灶节性病变患者的表观扩散系数(ADC)值、声衰减系数(AC)值与临床资料,对比不同脂肪肝病变程度患者的ADC值、AC值与临床资料,采用Pearson分析相关性,分析MRI-DWI联合AC值对脂肪肝合并<2 cm局灶结节性病变为恶性的诊断价值。结果病理学诊断结果显示,68例患者中,41例为良性结节,27例为恶性结节。良性结节组与恶性结节组低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、年龄、三酰甘油(TG)、性别、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)对比差异无统计学意义(P>0.05)。轻度组、中度组、重度组TG、年龄、HDL-C、性别、TC、LDL-C比较差异无统计学意义(P>0.05)。恶性结节组不同b值下的ADC值低于良性结节组(P<0.05),恶性结节组AC值高于良性结节组(P<0.05)。重度组不同b值下的ADC值低于轻度组、中度组(P<0.05),中度组不同b值下的ADC值低于轻度组(P<0.05),重度组AC值高于轻度组、中度组(P<0.05),中度组AC值高于轻度组(P<0.05)。不同b值下的ADC值与脂肪肝病变程度均呈负相关(P<0.05),与TG、HDL-C、TC及LDL-C无关(P>0.05);AC值与脂肪肝病变程度呈正相关(P<0.05),与HDL-C呈负相关(P<0.05),与TG、TC及LDL-C无关(P>0.05)。MRI-DWI、AC值及二者联合诊断脂肪肝合并<2 cm局灶结节性病变为恶性的曲线下面积(AUC)值分别为0.775、0.773、0.909(P<0.05),且二者联合的AUC值更高(P<0.05)。结论MRI-DWI、ATI在鉴别诊断脂肪肝背景下<2 cm局灶结节性病变良恶性中具有重要价值,且二者联合具有更高的诊断价值。

清肝降脂汤对体外诱导非酒精性脂肪肝细胞模型脂代谢和过氧化物酶体增殖物激活受体-α的调节作用研究

目的:探讨清肝降脂汤对体外诱导非酒精性脂肪肝(NAFLD)细胞模型脂代谢和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)-α的调节作用。方法:取HepG2细胞株,采用油酸构建NAFLD细胞模型。将细胞分为正常对照组(无油酸建模+无药物处理)、模型对照组(有油酸建模+无药物处理)和清肝降脂汤组(有油酸建模+有药物处理)。采用CCK-8实验检测细胞活性。采用油红O染色定性定量检测清肝降脂汤对细胞内脂质的影响,定量计算脂质含量的抑制率。同时,测定细胞内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和游离脂肪酸(FFA)含量;并采用聚合酶链反应(PCR)和Western blot检测脂肪代谢标志物PPAR-α和成纤维细胞生长因子-21(FGF21)的表达水平。结果:与正常对照组相比,模型对照组的HepG2细胞活性显著增高,脂质含量显著增高,MDA、SOD、TG、TC和FFA含量显著增高,而PPAR-α和FGF21表达水平显著降低(均P<0.05);而与模型对照组相比,清肝降脂汤组的HepG2细胞活性显著降低,脂质含量显著降低,MDA、SOD、TG、TC和FFA含量显著降低,而PPAR-α和FGF21表达水平显著增高(均P<0.05)。结论:清肝降脂汤有助于降低HepG2细胞活性、脂质含量以及MDA、SOD、TG、TC和FFA含量,并促进PPAR-α和FGF21表达,进而调节脂质代谢,抑制NAFLD发展进程。

血清可溶性CD36、抵抗素、能量平衡相关蛋白联合预测2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病的价值探讨

目的探讨血清可溶性CD36(sCD36)、抵抗素、能量平衡相关蛋白(Adropin)联合对2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的预测价值。方法前瞻性选取石家庄市第二医院2018年5月至2021年5月收治的90例T2DM合并NAFLD病人(A组)、90例单纯T2DM病人(B组),同期选取90例体检健康者(对照组)作为研究对象。通过酶联免疫吸附测定检测研究对象血清sCD36、抵抗素、Adropin表达水平,对比分析三组sCD36、抵抗素、Adropin表达水平差异;分析sCD36、抵抗素、Adropin表达相关性;logistic回归分析T2DM合并NAFLD的影响因素;受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析sCD36、抵抗素、Adropin三者联合对T2DM合并NAFLD的预测价值。结果A组病人血清sCD36(63.7±15.6)ng/L、抵抗素(3.15±0.46)μg/L水平均高于B组[(43.8±14.2)ng/L、(2.72±0.68)μg/L]和对照组[(22.9±5.7)ng/L、(2.58±0.39)μg/L](P<0.05),血清Adropin水平(66.28±27.62)ng/L均低于B组(86.73±25.46)ng/L和对照组(128.59±45.22)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05)。sCD36与抵抗素表达水平呈正相关(r=0.29,P<0.05),Adropin与sCD36表达呈负相关(r=−0.57,P<0.05)。logistic回归分析显示,sCD36,抵抗素,总胆固醇(TC)是T2DM合并NAFLD的影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,sCD36、抵抗素、Adropin单独及三者联合预测T2DM合并NAFLD的曲线下面积(AUC)分别为0.81、0.74、0.72、0.89,三者联合对T2DM合并NAFLD的预测效能显著高于单指标独立预测(P<0.05)。结论T2DM合并NAFLD病人血清sCD36、抵抗素水平升高,Adropin水平降低,三者联合对预测T2DM合并NAFLD具有较高效能。

2型糖尿病病人外周血羧化不全骨钙素水平与合并非酒精性脂肪性肝病的关系分析

目的检测2型糖尿病(T2DM)病人羧化不全骨钙素(ucOC)浓度,并分析其与合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的关系。方法选取石家庄市第二医院2020年6月至2022年6月收治的234例T2DM病人设为疾病组,根据病人是否合并NAFLD分为NAFLD组(107例)和非NAFLD组(127例),同期选取231例健康体检者为对照组,采用酶联免疫吸附测定检测受试者外周血ucOC浓度。比较NAFLD组和非NAFLD组病人的临床资料,采用多因素logistic回归分析法分析T2DM病人合并NAFLD的影响因素,并绘制受试者操作特征曲线(ROC曲线)评价外周血ucOC浓度对T2DM合并NAFLD的诊断价值。结果疾病组外周血ucOC浓度[(1.10±0.42)μg/L]低于对照组[(1.53±0.68)μg/L](P<0.05);NAFLD组ucOC[(0.98±0.14)μg/L]低于非NAFLD组[(1.20±0.21)μg/L](P<0.05)。NAFLD组身体质量指数(BMI)、腰臀比以及空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbA1c)、舒张压、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、尿酸、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均高于非NAFLD组(P<0.05),高密度脂蛋白(HDL-C)低于非NAFLD组(P<0.05)。多因素结果显示,HbA1c、TG、尿酸及HOMA-IR升高均是T2DM病人合并NAFLD的危险因素(P<0.05),外周血ucOC浓度升高是其保护因素(P<0.05)。外周血ucOC浓度诊断T2DM病人合并NAFLD的最佳截断值、灵敏度、特异度、曲线下面积分别为1.05μg/L、83.18%、80.31%、0.84。结论T2DM病人外周血ucOC浓度降低,且合并NAFLD病人外周血ucOC浓度低于未合并病人。ucOC浓度与HbA1c、TG、尿酸、HOMA-IR均是T2DM病人合并NAFLD的影响因素,监测T2DM病人ucOC浓度变化有助于临床诊断NAFLD的发生。

机器学习在非酒精性脂肪肝预测中的应用

非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是全球最常见的慢性肝病,普通成人NAFLD患病率在6.3%~45%,我国内地一般人群中患病率为29.81%,在肥胖和2型糖尿病人群中发病率更高,会高达90%。通过运用典型机器学习算法来构建非酒精性脂肪肝的风险预测模型,在肝病研究领域中是比较先进的。本文所归纳的7种典型机器学习算法在数据挖掘领域中是比较成熟且稳定的,在各项数据研究当中,基于预测结果的准确率,验证了各个模型的有效性和可行性,为脂肪肝疾病预测提供了基于数据科学的研究方法。

沉默IGFBP7的表达对非酒精性脂肪肝的影响

目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白(insulin-like growth factor binding protein,IGFBP)7在非酒精性病脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)发病中的作用。方法通过喂食高脂饮食(high-fat diet,HFD)建立NAFLD小鼠模型,并通过向肝脏注射腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的短发夹(sh)-IGFBP7敲除IGFBP7。C57BL/6小鼠随机分为4组(每组n=6):正常饮食组(ND)、高脂饮食组(HFD)、HFD空载体注射液组(HFD/AAV-null)、HFD AAV-sh-IGFBP7注射液组(HFD/AAV-sh-IGFBP7)。ND组给与正常饲料12周,HFD组、HFD/AAV-null组、HFD/AAV-sh-IGFBP7组给与高脂饲料4周,之后HFD/AAV-sh-IGFBP7组、HFD/AAV-null组小鼠分别注射2×10^(11) AAV-sh-IGFBP7或AAV-null的基因组拷贝,继续喂食8周。测定各组小鼠体重、肝湿重、肝指数,通过生化分析仪检测各组小鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、游离脂肪酸(FFA)、甘油及肝脏TG。采用实时定量PCR、Western blot检测IGFBP7在各组中mRNA,蛋白表达水平及脂肪生成相关的固醇调节元件结合蛋白(sterol regulatory element binding protein,SREBP)1c、脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FASN)、乙酰辅酶a羧化酶(acetyl-coa carboxylase,ACC)1和硬脂酰辅酶a去饱和酶(stearoyl coA desaturase,SCD)1的mRNA表达水平。结果与ND组相比,HFD组体重、肝湿重、肝指数及血清中ALT,AST,FFA,TG,TC,甘油、肝TG水平水平显著增加,差异均具有统计学意义(P<0.05),而HFD/AAV-sh-IGFBP7组体重、肝湿重、肝指数及血清中ALT,AST,FFA,TG,TC,甘油、肝TG水平增加均少于HFD/AAV-null组的小鼠,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与ND组对比,HFD组小鼠肝脏中IGFBP7mRNA及蛋白的表达水平升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。与HFD/AAV-null组相比,HFD/AAV-sh-IGFBP7组小鼠肝脏中IGFBP7蛋白表达水平显著下降,差异具有统计学意义(P<0.01)。与ND组相比,HFD组小鼠肝脏组织中SREBP-1c,FASN,ACC1和SCD1的mRNA表达水平均明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.01)。而与HFD/AAV-null组相比,HFD/AAV-sh-IGFBP7组SREBP-1c,FASN,ACC1和SCD1的mRNA表达水平均降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论IGFBP7在NAFLD的发展过程中参与了肝脏脂肪变性,下调IGFBP7可减轻肝脏脂质积累,对NAFLD的发病机制具有保护作用,这可能是一种新的治疗NAFLD的药物。

溶菌酶纳米颗粒递送白藜芦醇改善非酒精性脂肪肝

白藜芦醇是一类具有多种生物活性的植物多酚类化合物,通过减少氧化应激和脂质沉积可预防和改善非酒精性脂肪肝(NAFLD)。然而,白藜芦醇难溶于水,口服生物利用率低,降低了其健康功效。本研究采用谷氨酰胺转氨酶交联的溶菌酶纳米颗粒包埋白藜芦醇,其临界胶束质量浓度为1.1μg/mL,粒径为58 nm,白藜芦醇的载药率为21.2%。体外消化模型中载体耐胃酸和蛋白酶水解,经体外肠消化120 min后白藜芦醇释放率为61%。采用SD大鼠模型测定生物利用率,包埋后白藜芦醇的血药浓度峰值(C_(max))提升3.2倍,药时曲线下面积(AUC_(0~48 h))提升3.6倍,绝对生物利用度(Fabs)提高3.8倍。构建NAFLD小鼠模型,灌胃荷载白藜芦醇的溶菌酶纳米颗粒,验证其对NAFLD的干预效果。结果表明,白藜芦醇经纳米载体包埋后NAFLD小鼠的体脂率较游离态的白藜芦醇降低1.1倍,血清中血脂指标、肝脏中甘油三酯(TG)和游离脂肪酸(NEFA)、肝脏组织氧化应激产物丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)均显著降低,说明经溶菌酶纳米颗粒包埋后的白藜芦醇吸收率更好,对NAFLD小鼠的干预效果更佳。说明谷氨酰胺转氨酶交联之后的溶菌酶纳米载体,在口服递送功能活性物质方面具有极大潜力。

受体相互作用蛋白激酶3在非酒精性脂肪性肝病中的表达

目的探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)病人血清中受体相互作用蛋白激酶3(RIPK3)的表达水平及临床意义。方法选取2019年6月至2021年6月自贡市第一人民医院收治的108例NAFLD病人作为观察组,80例体检健康者为对照组。酶联免疫吸附测定检测血清RIPK3水平,采用Pearson法分析血清RIPK3水平与肝功能指标的相关性,采用Spearman法分析血清RIPK3水平与肝组织炎症和肝纤维化分期的相关性,多因素logistic回归分析NAFLD发生的影响因素,受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清RIPK3水平与肝功能指标对NAFLD的诊断价值。结果观察组和对照组身体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹血糖均差异有统计学意义(P<0.05)。NAFLD病人血清RIPK3水平(1.12±0.34)mg/L显著高于对照组(0.69±0.27)mg/L(P<0.05)。NAFLD病人谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)水平高于对照组(P<0.05)。血清RIPK3水平与ALT、AST、GGT及肝组织炎症、肝纤维化分期均呈正相关(P<0.05)。logistic回归分析显示血清RIPK3水平、BMI、TG、ALT、AST及GGT均是NAFLD发生的影响因素(P<0.05)。血清RIPK3诊断NAFLD的AUC为0.83、灵敏度为80.56%,特异度为72.50%。血清RIPK3联合肝功能指标诊断的AUC为0.95、灵敏度为89.32%,特异度为91.67%,联合的诊断效能优于各自单独检测(ZRIPK3-联合=3.60,Z_(ALT-联合)=4.37,Z_(AST-联合)=3.41,Z_(GGT-联合)=5.14,均P<0.05)。结论血清RIPK3在NAFLD病人中的表达水平升高,与病人病情呈正相关,联合血清RIPK3与肝功能指标可提高NAFLD的诊断效能,临床应用价值较大。

微生态制剂对非酒精性脂肪性肝炎患者临床作用的研究

目的 观察微生态制剂辅助治疗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者的临床效果。方法 将我院2019年1月至2020年1月门诊及住院的诊断为NASH的102例患者纳入研究,随机分为对照组和治疗组。所有患者均通过结构化方案改变生活方式,采用饮食治疗和运动治疗相结合的策略。治疗组患者另外口服微生态制剂(枯草杆菌肠球菌二联活菌胶囊),比较两组患者治疗前后体质量指数、腰围、脂肪肝程度、肝酶、空腹血糖(FPG)、血脂指标、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、内毒素(LPS)水平。结果 治疗后两组患者体质量指数、腰围均明显降低,脂肪肝程度亦有明显好转,但治疗组与对照组无显著差异。空腹血糖、血清肝酶、血脂、TNF-α、LPS水平均低于治疗前,且治疗组与对照组亦有显著差异,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 微生态制剂枯草杆菌肠球菌二联活菌胶囊治疗NASH可显著改善脂肪肝程度及肝功能、血脂指标及降低内毒素、炎症因子等,值得临床推广应用。