实时荧光定量PCR检测BAALC基因在正常核型急性髓系白血病中的表达

目的探讨BAALC基因在NC-AML中的表达及其临床意义。方法运用实时荧光定量RT-PCR方法检测BAALC基因在48例NC-AML患者中的表达。结果以48例NC-AML患者骨髓BAALC基因中位表达为界,分为高表达(n=26)和低表达(n=22)组。BAALC高表达组与低表达组相比,患者的年龄、性别、血红蛋白量、血小板计数、外周血及骨髓中原始细胞比例差异无显著性;BAALC高表达组外周血高白细胞、FAB分型中M0和M1及CD34表达率较低表达组高;BAALC高表达组完全缓解率(CR)58%较低表达组CR87%差异有显著性(P<0.05);BAALC高表达组复发率42%较低表达组复发率19%差异有显著性(P<0.05)。结论BAALC基因高表达是NC-AML患者预后不良的分子标志。

急性髓系白血病112例流式细胞术检测免疫表型分析

目的探讨流式细胞术对急性髓系白血病(AML)不同亚型抗原表达检测的作用。方法采用流式细胞术CD45/SSC双参数散点图设门方法对112例初治AML患者骨髓细胞进行12种抗原检测,结合FAB分类,比较不同亚型中抗原表达差异。结果在112例初治AML中,CD13、CD33、CD34的表达常见,分别为100%、94.6%、77.8%;在淋系抗原中,CD2的表达最为常见(30.4%),其次为CD7(26.8%);且某些免疫表型与FAB分类具有相关性。结论流式细胞术有助于AML的准确诊断及分型,对于AML患者治疗方案选择及预后的判断具有重要价值。

药穴指针疗法治疗腹泻型肠易激综合征35例

目的:观察药穴指针疗法治疗腹泻型肠易激综合征(IBS-D)的临床疗效。方法:将68例IBS-D患者随机分为2组,治疗组35例给予药穴指针疗法治疗,对照组33例给予匹维溴胺治疗,疗程1个月。结果:疗效评价,治疗后中药组总有效率为94.28%,治疗组为72.73%,2组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:药穴指针疗法治疗腹泻型肠易激综合征(IBS-D)具有调整脏腑,使阳升湿散而达到止泄作用。

国医大师颜德馨教授辨治糖尿病经验

颜德馨教授业医70余载,临床经验丰富,对于糖尿病诊治积累了丰富的经验。颜教授对糖尿病的治疗抓住健脾和活血化瘀来解决最棘手的"胰岛素依赖"和并发症问题,自拟方"消渴清"疗效显著。

白血病患者院内获得性感染败血症的病原学分析

目的探讨院内感染白血病患者并发败血症病原菌的分布及对抗生素的敏感性。方法对该院2004年1月～2008年12月从血液标本中分离的感染菌作回顾性分析。结果白血病患者血培养致病菌以G-杆菌多见,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌是最常见的致病菌,其次为G+球菌,主要为葡萄球菌属。G-杆菌对亚胺培南、头孢吡肟、哌拉西林/三唑巴坦、阿米卡星敏感,对青霉素类、单环β-内酰胺类以及头孢噻肟耐药率高,G+球菌对万古霉素敏感性较高,对其他抗生素大都耐药。结论超广谱β内酰胺酶以及耐甲氧西林葡萄球菌菌株增加导致白血病患者细菌耐药率增高,其主要原因是抗生素的滥用,细菌培养及药敏实验可指导临床抗生素的合理使用。

肾上腺皮质激素对心房钠尿肽基因表达的促进作用

给完整的及切除肾上腺的雌性 Wistar 大鼠分別注射地塞米松、去氧皮质酮或地塞米松加去氧皮质酮;冷酚法提取心房总 RNA,用α-^(32P)标记的大鼠心房肽 cDNA 探针与之杂交。完整大鼠接受地塞米松和切除肾上腺后接受地塞米松加去氧皮质酮的大鼠,心房肽基因转录产物增加2倍,其余组无显著变化。结果提示糖皮质激素可促进心房肽基因表达,但此作用依赖于盐皮质激素的同时存在,单纯盐皮质激素不能增强该基因的表达。

不同镇痛方式对全髋关节置换患者细胞因子及皮质醇水平的影响

目的探讨不同镇痛方式对髋关节置换患者细胞因子及皮质醇水平等的影响,为探索适用于该手术的镇痛方式提供依据。方法选择接受髋关节置换的患者126例,随机分为对照组及观察组,对照组仅在术后疼痛时给于哌替啶,观察组在此基础上接受多模式复合镇痛,对术前及术后VAS评分、细胞因子及皮质醇水平进行测定比较。结果观察组术后24 h、48 h、72 h VAS评分较对照组同期均有显著性下降(P<0.05)。观察组术后24 h IL-8、TNF-α分别为35.98±3.13、4.62±0.68 pg/ml,较对照组同期均有显著性下降(P<0.05);术后48 h IL-6、IL-8、TNF-α分别为23.57±3.68、17.12±2.59、1.85±0.61 pg/ml,较对照组同期均有显著性下降(P<0.05)。观察组术后24 h Cor水平较对照组同期有显著性下降(P<0.05),术后48 h Cor及ACTH水平较对照组同期有显著性下降(P<0.05)。结论围手术期多模式复合镇痛有助于改善髋关节置换患者术后疼痛,且有助于缓解应激状态及炎性因子水平。

肝硬化性脾功能亢进术后生活质量分析

肝硬化（hepatic cirrhosis）是各种原因引起的慢性、进行性、弥漫性肝病.随着病变进展可发生门静脉高压（PHT）而引起脾功能亢进（hypersplenism,简称脾亢）,表现为脾脏肿大、外周血细胞（主要是血小板、白细胞）减少,其发生率高达50％ ～ 64％[1].由于其病程长、症状多、并发症多等特点,如果不能得到有效治疗,不但影响患者寿命,也会很大程度上影响患者的社会、心理、生理等功能,导致生活质量（qualify of life,QOL）的严重下降.长期以来,脾切除术联合断流术治疗肝硬化性脾功能亢进一直是外科治疗的首选.本研究调查我院2008年5月至2011年5月期间采用手术治疗肝硬化性脾功能亢进患者148例,术后生活质量分析结果如下.

急性下消化道大出血的手术治疗策略

目的：探讨急性下消化道大出血的手术治疗时机和方法。方法：回顾分析2000年1月-2007年12月间经手术治疗的9例急性下消化道大出血患者的诊治经验。结果：所有病例在急症剖腹探查手术中，通过视诊、触诊、透光试验、分段钳夹和注射美蓝及术中内镜检查均明确病灶，行病变肠段切除吻合术，术后无死亡及并发症发生。结论：及时剖腹探查、准确寻找出血部位和正确选择术式是急性下消化道大出血手术成功的关键。

肝癌患者介入治疗术后护理

本文对120例晚期肝癌患者采用肝动脉介入治疗术后护理进行分析。结果显示120例患者出现了不同程度的并发症;且短期内术后症状较术前重,表明加强术前、术后护理,特别正确的导管护理是插管化疗成败的关键,密切观察,预防并发症是护理要点。

常温心肺转流在儿童心脏直视术的应用

目的观察常温心肺转流(CPB)对儿童围术期血液循环和呼吸功能的影响。方法先天性心脏病患儿44例,随机分为两组:常温组22例,采用常温CPB;低温组22例,采用常规低温CPB。测定术中、术后相关指标的变化。结果常温组在术中、术后早期体循环阻力明显降低,术中无乳酸产生,术后6 h和48 h氧合指数(OI,PaO2/FiO2)显著高于低温组,肺泡气-动脉血氧分压差[Pa(A-a)O2]显著低于低温组,转流与气管内插管时间明显缩短。结论常温CPB比低温CPB具有更好的组织灌注,有利于术后心肺功能的恢复。

G-CSF联合LD-AA方案治疗高危组急性髓细胞性白血病的疗效观察

目的 :探讨G CSF联合LD AA方案治疗高危组急性髓细胞性白血病 (Acutemyelocyticleukemia ,AML)的临床疗效。方法 :5例高危组AML患者采用G CSF联合小剂量阿克拉霉素和阿糖胞苷 (LD AA)治疗 ,并观察其毒副作用。结果 :5例患者中 ,4例达到CR ,PR1例 ,总有效率为 1 0 0 % (5 / 5 )。 2例有轻度的骨髓抑制作用 ,1例有一过性的心脏损害 ,2例有骨痛表现。结论 :G CSF联合LD AA方案治疗高危组AML不仅有较高的临床缓解率 ,而且毒副作用少 ,是一种较好的治疗方法。

辛伐他汀通过活化过氧化物增殖子激活受体γ减轻缺血-再灌注心肌炎症反应

目的炎性反应在心肌缺血-再灌注(ischemia reperfusion,IR)损伤过程中发挥重要作用。文中旨在观察辛伐他汀预处理对再灌注心肌炎性因子表达的影响,探讨过氧化物增殖子激活受体(peroxisome proliferators activated receptor,PPAR)-γ参与辛伐他汀调控再灌注心肌炎症反应的机制。方法通过冠状动脉结扎法建立大鼠心肌IR模型。实验动物分为假手术组、对照组和辛伐他汀组。辛伐他汀组将按照5 mg/(kg.d)的剂量术前7 d起辛伐他汀灌胃。采用不同方法检测各组血清心肌酶谱、脂质水平、心肌细胞凋亡指数、心肌肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白细胞介素(inferleukin,IL)-6和单核细胞趋化因子(monocyte chemoattractant protein,MCP)-1的含量,心肌组织PPAR-γ、核因子(nuclear factor,NF)-κB活性,及PPAR-γ在心肌组织中的表达。结果与对照组相比,辛伐他汀预处理能显著减少凋亡心肌细胞数,降低血清磷酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平,下调再灌注心肌组织TNF-α、IL-6和MCP-1的含量,而各组血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglycerides,TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)及高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)未见差异。再灌注后,心肌组织PPAR-γ、NF-κB活性均显著增高,辛伐他汀预处理能进一步增加PPAR-γ活性,同时抑制NF-κB活性。结论辛伐他汀预处理能降低IR心肌炎性因子的表达,其抗炎作用通过活化PPAR-γ、抑制NF-κB活性实现。

抗甲状腺药物致白细胞减少与抗中性粒细胞胞浆抗体的相关性研究

目的探讨抗甲状腺药物(ATD)在治疗Graves病(GD)过程中致白细胞减少与抗中性粒细胞胞浆抗体(AN-CA)的相关性。方法 262例GD患者分为白细胞减少组(GDL)和白细胞正常组(GDN),其中口服丙硫氧嘧啶(PTU)56例,口服他巴唑(MMI)206例;健康对照组(HC)为180名健康体检者。各组血清中ANCA阳性者用斑点法检测髓过氧化物酶(MPO)抗体和蛋白酶3(PR3)抗体。结果GDL组ANCA阳性率较HC组增加,差异有统计学意义(PTU:P<0.01,MMI:P<0.01);GDN组ANCA阳性率较HC组增加,其中口服PTU的GD患者ANCA阳性率与HC组比较,差异有统计学意义(P<0.05),而口服MMI的GD患者ANCA阳性率增加,但差异无统计学意义;GDL组AN-CA阳性率高于GDN组,其中口服PTU的GDL组ANCA阳性率较GDN组增加,差异有统计学意义(P<0.05),而口服MMI的GDL组与GDN组比较,差异无统计学意义。结论ATD可能导致部分患者ANCA阳性表达,推测ANCA可能参与ATD致白细胞减少,但其作用机制有待于进一步研究。

136例急性白血病免疫表型特点及临床意义

目的 探讨急性白血病免疫表型的特点及临床意义.方法 采用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶（APAAP）方法对136例急性白血病进行免疫表型分析.结果 136例急性白血病中,97例急性髓细胞白血病（AML）主要表达抗髓过氧化物酶MPO（95.87％）,CD68 （89.69％）,CD13 （86.59％）和CD33 （82.47％）;其次为HLA-DR（61.85％）和CD34 （57.73％）.16.49％的AML患者伴淋系抗原表达,最常见为CD7 （9.27％）,CD19 （6.18％）及CD2 （3.09％）.B细胞系急性淋巴细胞白血病（ALL） 28例,主要表达CD19（100％）,HLA DR（96.42％）,CD22（75％）,CD34（71.42％）及CD10 （67.85％）.T细胞系ALL 11例,主要表达CD7（100％）,CD3（81.81％）及CD5 （72.72％）.17.94％ALL患者表达髓系相关抗原,主要是CD13（15.38％）及CD33（10.71％）.结论 免疫表型检测能提高急性白血病诊断率,并对亚型鉴别有重要意义.

独蒜兰乙酸乙酯萃取物通过内源性线粒体通路诱导白血病K562细胞和HL-60细胞凋亡

目的:探讨独蒜兰乙酸乙酯萃取物对人慢性粒细胞白血病K562细胞和急性髓性白血病HL-60细胞增殖及凋亡的影响以及诱导凋亡的途径。方法:采用XTT法、台盼蓝拒染法、Annexin V-FITC/PI双染法、PI染色法、4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色和Western blot法研究不同浓度独蒜兰乙酸乙酯萃取物对上述2种白血病细胞增殖、凋亡、细胞周期和凋亡相关蛋白表达等方面的影响。结果:独蒜兰正丁醇萃取物对K562细胞活力几乎没有抑制作用,而乙酸乙酯萃取物能显著抑制K562和HL-60细胞的活力和增殖。乙酸乙酯萃取物对于HL-60细胞作用24 h的半数抑制浓度(IC_(50))为(42.14±2.54)mg/L,对于K562细胞的IC_(50)为(51.28±3.12)mg/L。Annexin V-FITC/PI和DAPI染色结果显示,乙酸乙酯萃取物呈剂量依赖性诱导2种细胞凋亡,且50 mg/L的乙酸乙酯萃取物作用后K562细胞的凋亡率为33.1%,而HL-60细胞的凋亡率为63.1%,说明HL-60细胞对乙酸乙酯萃取物更加敏感,伴有典型的细胞核凋亡形态学改变。PI染色结果显示HL-60细胞和K562细胞都被阻滞于G_2期。Western blot结果显示,随着药物浓度的升高,细胞凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达降低,而促凋亡蛋白Bax、cleaved caspase-3和活化的多腺苷二磷酸核糖聚合酶的表达逐渐升高,内源性线粒体凋亡的特征胞浆中细胞色素C和凋亡诱导因子表达也逐渐升高。结论:独蒜兰乙酸乙酯萃取物能显著抑制K562和HL-60细胞增殖,并通过触发内源性线粒体凋亡通路诱导这2种细胞凋亡。

cDNA芯片检测STAT5诱骗核苷酸对K562细胞凋亡相关基因的影响

目的：转录因子STAT5在慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)中组成性激活,并与CML细胞恶性表型密切相关,本研究用cDNA芯片检测方法探讨诱骗核苷酸(decoy ODNs)抑制STAT5对白血病K562细胞株凋亡相关基因的影响。方法：分别提取decoy ODNs处理前后的K562细胞总RNA,逆转录合成Cy3、Cy5标记的cDNA探针,与人14K基因表达谱cDNA芯片(V2.0)杂交,扫描获得数据后,用Genespring软件分析对照组和实验组的差异表达基因,半定量RT- PCR验证cDNA芯片结果。结果：2张cDNA芯片检测重复性良好(R=0.9799)。在13824个标记的基因中,检出413个上调基因,其中包括：TIAF1、GAB1、GYPA、DAPK3、TNFRSF1B、IRF1和PML等在内的18个凋亡相关基因；在检出的332个下调基因中,发现PIM1、CCND2、CCND1、MYC和BCL2L1等在内的11个凋亡相关基因；部分基因经半定量RT-PCR证实与cDNA芯片结果一致。结论：Decoy ODNs抑制STAT5信号通路后可引起K562细胞多种凋亡相关基因的变化,本实验为进一步研究STAT5信号通路所调控的凋亡相关基因提供了依据。

STAT5诱骗寡核苷酸诱导白血病K562细胞凋亡的研究

目的STAT5信号转导途径在慢性粒细胞白血病的发病中有十分重要作用,本研究应用诱骗寡核苷酸抑制STAT5信号转导途径,诱导白血病K562细胞凋亡,并初步探讨其中的分子机制。方法体外设计合成的STAT5诱骗寡核苷酸,在脂质体的介导下转染K562细胞,以Annexin-V/PI双染实验和电镜检查细胞凋亡,用RT-PCR和Westernblot方法检测STAT5下游基因bcl-xL、c-myc的表达。结果Annexin-V/PI双染实验检测诱骗寡核苷酸作用24h后,早期凋亡细胞即有14.57%±1.08%;电镜检查观察到诱骗寡核苷酸作用引起细胞凋亡的超微结构形态学改变;RT-PCR实验和Westernblot实验证实诱骗寡核苷酸作用引起STAT5下游基因bcl-xL和c-mycmRNA和蛋白表达下调。结论STAT5诱骗寡核苷酸能诱导白血病K562细胞凋亡,其作用机制可能与诱骗寡核苷酸下调STAT5下游凋亡相关基因的表达相关。