皮质醇导致脓毒症大鼠TNF-α释放增加

目的：探讨皮质醇对脓毒症大鼠ＴＮＦ－α、ＩＬ－６释放的影响及其临床意义。方法：ＳＤ大鼠５８只，分为５组，Ａ、Ｃ组于盲肠结扎穿孔ＣＬＰ后每１２ｈ皮下注射氢化可的松（３０ｍｇ／ｋｇ），Ｂ、Ｄ组于ＣＬＰ后同时点注等量生理盐水，Ｅ组为对照组。Ａ、Ｂ组于４８ｈ，Ｃ、Ｄ组于２４ｈ处死，测定血及腹水中ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量和血中皮质醇水平。结果：Ａ组死亡３例，余各组无死亡。Ａ组血浆皮质醇和ＴＮＦ含量均显著高于Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ组（Ｐ＜００５）。Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ组腹腔液中ＴＮＦ－α含量显著高于Ｅ组（Ｐ＜００５）。所有大鼠腹腔液中ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均显著高于血浆（Ｐ＜００５）。结论：脓毒症时，应用皮质醇可使血浆ＴＮＦ－α含量升高，且随作用时间延长ＴＮＦ－α升高愈显著，并伴有动物死亡率增加。但对血浆及腹腔液中ＩＬ－６含量无显著影响。

兔胆原性脓毒症时肝细胞糖异生抑制及血糖浓度降低的研究

为了解兔胆原性脓毒症后不同时相肝细胞糖异生功能及其对有关糖异生激素的反应性，探讨肝细胞代谢功能改变与血糖水平之间的关系。于兔右侧叶肝管开口近端结扎肝总管，造成部分肝管完全梗阻，并向梗阻近端肝管内注入２×１０￣８Ｅ，ｃｏｌｉ／０．２ｍｌ大肠杆菌菌液诱发脓毒症。在伤后１２，２４和４８ｈ采取动脉血作血糖测定，并切取右侧叶（非感染肝叶）和左侧叶（感染肝叶）肝组织，用离体原代肝细胞培养法测定肝细胞糖异生功能。感染肝叶肝细胞基础糖异生速率在伤后４８ｈ明显降低，非感染肝叶者无显著改变。感染肝叶伤后１２ｈ肝细胞肾上腺素／胰高血糖素刺激的糖异生速率显著降低，至伤后４８ｈ对两种激素刺激已几无反应。非感染肝叶肝细胞肾上腺素／胰高血糖素刺激的糖异生速率自伤后１２ｈ起进行性降低，但降低的幅度显著小于感染肝叶者。非感染肝叶两种激素刺激后的肝细胞糖异生速率分别与动脉血糖水平呈显著正相关。结果表明，在胆原性脓毒症病程早期的高血糖相，感染和非感染肝叶在胰高血糖素和肾上腺素刺激下肝细胞糖异生速率已发生不同程度的减低；随病程演进，感染肝叶和非感染肝叶肝细胞糖异生功能及对糖异生激素的反应性进一步降低，以至不能满足宿主持续高水平的葡萄糖消耗，导致低?

血小板活化因子在急性胰腺炎内毒素血症发病中的作用

血小板活化因子是近年来发现的具有广泛生物活性的内源性介质.研究表明,它与急性胰腺炎以及相关并发症的发生、发展有着重要关系.本文着重综述血小板活化因子在急性胰腺炎内毒素血症发病中的作用.

脓毒血症早晚期肝细胞核被膜NTPase活性及poly(A)^+mRNA核浆转运的变化

目的和方法 :在盲肠结扎穿孔脓毒血症大鼠模型上 ,研究早晚期脓毒血症肝细胞核被膜核苷三磷酸酶 (NT Pase)活性及 poly(A) +mRNA核浆转运的变化。结果 :脓毒血症早期NTPase活性增加而晚期活性降低 ,即早期Vmax与对照组比增加 6 2 % (ATP ,P <0 .0 5 )和 18% (GTP ,P <0 .0 5 ) ;晚期Vmax下降 2 6 % (ATP ,P <0 .0 5 )和5 6 % (GTP ,P <0 .0 5 )。脓毒血症仅晚期NTPase底物亲和力降低 ,即晚期Km与对照组比分别升高 2 6 % (ATP ,P<0 .0 5 )和 37% (GTP ,P <0 .0 5 )。脓毒血症早期 poly(A) +mRNA核浆转运速率增加而晚期降低 ,即早期组 10min转运速率较对照组增加 2 7% (ATP ,P <0 .0 5 )和 30 % (GTP ,P <0 .0 5 ) ;晚期组降低 2 1% (P <0 .0 1)和 35 % (P <0 .0 1)。结论 :脓毒血症肝细胞核膜NTPase活性呈早期升高、晚期下降的双相变化与肝细胞核被膜 poly(A) +mR NA核浆转运速率的早、晚期变化相平行 ,同时与脓毒血症血糖浓度的早、晚期变化相关。

大鼠内毒素血症血小板脂过氧化变化

用硫代巴比妥酸(TBA)荧光法,测定了大鼠内毒素血症时血小板、血浆及肺组织脂过氧化产物丙二醛(MDA)的含量,发现内毒素血症大鼠血小板及血浆MDA含量比对照组明显升高,肺组织MDA含量无明显差异。

脓毒症大鼠心肌腺苷酸环化酶活性的变化及其机理探讨

本研究证明，脓毒症（结扎盲肠及穿刺，ＣＰＬ）大鼠心肌肌膜腺苷酸环化酶（ＡＣ）的活性及其部分纯化的ＡＣ最大活性，在早期脓毒症（ＥＳ，ＣＬＰ后９ｈ）时明显增高，在晚期脓毒症（ＬＳ，ＣＬＰ后１８ｈ）时明显降低。其心肌肌膜蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的活性亦呈现类似变化。ＥＳ和ＬＳ大鼠心肌肌膜ＡＣ的增敏和失敏与ＰＫＣ的激活和抑制有关。上述ＡＣ和ＰＫＣ的双相变化不是肾上腺能β－受体和α１－受体系统依赖的。ＥＳ大鼠心肌肌膜ＰＫＣ的激活和ＡＣ的增敏与Ｍ－胆碱受体系统有关；而ＬＳ大鼠心肌肌膜ＰＫＣ的抑制和ＡＣ的失敏与Ｍ－胆碱受体系统无关。

兔自身对照性胆原性脓毒症模型的建立

为了研究胆原性脓毒症及其发病机理，在大耳白兔右侧叶肝管开口近侧结扎总肝管并向其近端肝管内注入含２×１０８大肠杆菌的菌液，从而诱发脓毒症；在右侧肝脏叶为急性胆道感染所诱发的全身脓毒性反应的靶器官，而其余肝叶则为胆道感染直接攻击的靶器官。形成自身对照性动物模型并能显示类似人类胆原性脓毒症的血流动力学、代谢和病理改变。

胆源性脓毒症导致肝细胞膜腺苷酸环化酶失敏

本研究目的是检测胆源性脓毒症期间肝细胞膜腺苷酸环化酶（ＡＣ）活性及其对激素的反应性。于免右侧叶肝管开口近端结扎肝总管，并向梗阻近端肝管内注入２１×１０８Ｅ。Ｃｏｌｉ／０．２ｍｌ大肠杆菌菌液诱发脓毒症。在伤后１２、２４和４８ｈ，参照Ｓａｌｏｍｏｎ的方法测定右侧叶（非感染肝叶）和左侧叶（感染肝叶）肝细胞膜腺苷酸环化酶（ＡＣ）活性。自病程早期始感染肝叶肝细胞膜氟化钠刺激ＡＣ活性以及肾上腺素／胰高糖素刺激ＡＣ活性和肾上腺素刺激ＡＣ活性发生先后不同程度降低。本研究结果表明，在胆源性脓毒症状态下动物感染肝叶和非感染肝叶肝细胞膜腺苷酸环化酶系统的功能完整性先后受损，这可能是肝细胞对胰高糖素和肾上腺素反应性低下的原因。

脓毒症过程中的炎性介质与细胞凋亡关系的研究进展

脓毒症(Sepsis)是严重创伤(烧伤)、休克、外科大手术后常见的并发症,进一步发展可导致脓毒性休克、多器官功能障碍综合征(MODS),已成为临床危重患者的重要死亡原因之一.脓毒症过程中有大量炎性介质释放、同时也存在着细胞凋亡现象.这两者对脓毒症的发生、发展都起着重要作用.

血管活性介质对毒血症血流动力学的影响

血管活性介质对毒血症血流动力学的影响第二军医大学第一附属医院（上海２００４３３）孟力（综述）杨瑞和（审校）实验研究发现用含有内毒素的血浆作用于离体动脉环时，可使张力降低。因此，认为毒血症时血流动力学的变化是由于内毒素等有毒物质诱导产生，此外一些分子量...

内毒素血症小鼠巨噬细胞膜脂改变对CD14表达及TNFα分泌的影响

目的 以小鼠内毒素血症为模型 ,研究小鼠腹腔巨噬细胞膜脂改变 ,及其对受体CD14表达及血浆TNFα产生的影响。方法 48只小鼠分为 3组。①对照组 (n =8) ;②内毒素血症组 :小鼠尾静脉注射LPS ,2 0 0 μg/只 ,分 1、3、5、84个观察时相点 ,每个时相点 8只动物 ;③脂质体预处理组 (n =8) :小鼠腹腔注射卵磷脂脂质体 1ml( 1mg/ml) ,18h后尾静脉注射LPS ,2 0 0 μg/只 ,5h后观察巨噬细胞膜脂成分、膜流动性及CD14阳性率、血浆中TNFα含量的变化。结果 LPS刺激下 ,巨噬细胞主要膜脂成分降解 ,细胞膜荧光偏振度、微粘度和分子排列有序系数增加 ,膜流动性显著降低 ;CD14阳性率增加 ,5h达高峰 ,8h降至正常水平 ;TNFα含量显著升高 ,3h达高峰 ,8h降至正常水平。磷脂脂质体预处理后 ,膜损伤减轻 ,CD14阳性率及TNFα含量均明显降低。结论 内毒素血症小鼠腹腔巨噬细胞膜磷脂降解 ,细胞膜从相对比较流动变为相对固化 ,这可能是膜受体CD14阳性率增加 ,TNFα产生增多的重要原因。脂质体预处理能修复膜损伤 ,减少膜CD14表达 ,减轻炎症反应。

脓毒症、介质与多系统器官衰竭──临床与实验研究的启示

多系统器官功能衰竭（ＭＳＯＦ）的概念及诊断至今仍存在混乱，此命名并不能正确的反映其本质，也不能与其它临床情况如老年性及濒死的器官衰竭等明确的区分开来。应用顺磁共振技术通过对烧伤患者及烧伤鼠模型研究结果，表明存在由于各种组织细胞膜的脂质过氧化而致氧自由基过度产生，小肠似对低灌流－再灌注损伤特别敏感；回肠二胺氧化酶活性降低及菌群迁移的产生，表明肠粘膜屏障功能衰竭。同时血浆内毒素（ＬＰＳ）及肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）水平亦均显著升高。在最后发展为ＭＳＯＦ的患者尤为显著。本研究表明由肠道而来的细菌和（或）内毒素加重了由缺血－再灌注损伤及大量坏死组织所致的全身反应。作者认为目前对的ＳＯＦ的诊断标准不能导致早期诊断，它只能反映其病理生理发展过程的终点；而我们的治疗战略应直接针对不同水平的启动因子、全身介质及损伤的效应器。故应特别强调脓毒反应在ＭＳＯＦ综合征发展过程中的重要性。故建议将此综合征改名为“脓毒症伴器官功能不全”或“多器官介质损伤”。

内毒素血症犬部分去除白细胞后肺内凝血纤溶功能的变化

目的观察部分去除外周血白细胞后内毒素血症犬肺内凝血功能的变化,探讨活化白细胞对内毒素血症犬肺损伤的影响及其机制。方法雄性杂种犬30只,采用随机数字表法分为内毒素组（L组）、假白细胞去除组（S组）及白细胞去除处理组（T组）,每组10只。L组仅经静脉输注2mg/kg LPS建立内毒素血症犬模型,不行白细胞去除;T组在建模后12~14h使用自动连续血流血细胞分离机进行白细胞去除;S组建模后12~14h行假白细胞去除（将去除的终产物回输入体内）。建模后36h切取肺组织,采用ELISA法检测肺泡灌洗液中中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）、可溶性血栓调节蛋白（sTM）、活化蛋白C（APC）、纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）水平,免疫组化染色观察肺组织血栓调节蛋白（TM）的表达,并行肺湿/干重检测及肺组织病理学观察。结果与L组及S组比较,T组犬肺泡灌洗液中APC水平显著增高,NEs、TM、PAI-1水平及肺湿/干重比值显著降低（P〈0.05）,肺组织内TM表达量也明显增加,而L组与S组各指标比较无显著差异（P〉0.05）。病理学观察显示,T组急性肺损伤发生率（2/10）显著低于L组（7/10）及S组（8/10,P〈0.05）。结论部分去除白细胞可降低肺泡灌洗液中的NE水平,阻止肺内TM表达进一步下降,从而改善肺泡灌洗液中凝血纤溶异常,降低内毒素犬急性肺损伤的发生率。

危重病人的氧动力学改变

目的：研究肺心病失代偿期和脓毒症患者入院早期（６～４８ｈ）的血液动力学和氧动力学改变。方法：采用漂浮导管检查术，测定肺动脉压（ＰＡＰ）、右心室压（ＲＶＰ）、肺楔压（ＰＣＷＰ）、中心静脉压（ＣＶＰ）、外周动脉压（ＡＰ）、心排量（ＣＯ）和动脉血、混合静脉血行血气分析并同步测定混合静脉血ＬＡ。结果：肺心病失代偿期患者（Ｇ１组）：肺动脉平均压（ｍＰＡＰ）和肺循环阻力（ＰＶＲＩ）均显著升高，氧供（ＤＯ２）显著降低，上述改变以入院２４ｈ为甚；脓毒症组（Ｇ２组）：心指数（ＣＩ）显著增加，体循环阻力显著降低，ＤＯ２和氧消耗（ＶＯ２）大致正常，但乳酸水平显著升高。结论：Ｇ１组患者以肺循环高阻力和氧供不足为特征；而Ｇ２组患者以高排低阻，高代谢及氧利用障碍为特点。

白介素-1β对家兔内毒素休克血管钙敏感性的调节作用及与Rho激酶和PKC的关系

目的观察白介素-1β(IL-1β)对家兔内毒素休克及离体血管钙敏感性影响及与PKC、Rho激酶的关系。方法健康成年家兔35只,雌雄不拘,完全随机分为正常对照组,LPS30min组,LPS1h组,LPS2h组,LPS4h组,每组7只,经耳缘静脉注射1mg/kg LPS(O111∶B4)复制家兔内毒素休克模型,在给LPS后30min、1、2、4h取血清及肠系膜上动脉(superior mesenteric artery,SMA),用ELISA方法检测不同时相点血清中IL-1β的浓度;用离体血管环张力测定技术,测血管环钙敏感性的变化,分析其与血清IL-1β浓度的相关关系。另取家兔70只,采用随机数字表分为正常对照组,25ng/mlIL-1β组,50ng/ml IL-1β组,100ng/ml IL-1β组,150ng/ml IL-1β组,200ng/ml IL-1β组,200ng/ml IL-1β+PMA组,200ng/ml IL-1β+staurosporine组,200ng/ml IL-1β+AngⅡ组,200ng/ml IL-1β+Y27632组,每组7只。无菌条件下取正常家兔SMA,检测不同浓度重组人IL-1β对其钙敏感性的影响及与PKC、Rho激酶的关系。结果给LPS后30min至1h内成功复制出内毒素休克模型,测其平均动脉压(mean artery pressure,MAP)下降30%以上,血清中IL-1β在2h后即开始上升,至4h时显著升高(P<0.01);SMA钙敏感性在给LPS后30min、1h较正常对照组明显增高(P<0.01),而在给LPS后2、4h则明显降低(P<0.01),其变化趋势与血清IL-1β水平变化呈显著负相关(r=-0.675,P<0.01)。IL-1β可诱导离体SMA钙敏感性下降,其作用可被PKC和Rho激酶的激动剂拮抗。结论 IL-1β能够降低血管钙敏感性,且该作用与PKC、Rho激酶密切相关,IL-1β对内毒素休克后血管钙失敏可能有重要介导作用。

抗内毒素单抗对脓毒症小鼠胸腺细胞凋亡及白介素1β-转换酶基因表达的影响

目的探讨胸腺细胞凋亡在小鼠脓毒症机制中的作用,观察抗内毒素单抗对胸腺细胞内胸腺细胞凋亡相关基因白介素1β-转换酶(ICE)表达的影响。方法盲肠结扎穿孔(CLP)造成小鼠脓毒症,假手术组接受同样的手术操作但不行CLP,治疗组在术前2小时腹腔内注射抗内毒素单抗4mg/kg,致伤后1、3、6小时取胸腺组织,采用RT-PCR定量检测ICE基因表达。结果抗内毒素单抗明显减少了胸腺细胞凋亡的数量并且下调了ICE基因的表达(P<0.01);改善了小鼠的存活率。结论脓毒症使胸腺细胞大量凋亡并诱导了ICE基因表达增强,抗内毒素单抗有效抑制了ICE基因的表达,减少了胸腺细胞凋亡,提高了小鼠的存活率,提示ICE基因参与了胸腺细胞凋亡机制。

大鼠胆源性脓毒症时的肝脏糖异生功能及相关激素环境的改变

急性胆源性肝损害所致多系统器官功能不全的机理尚不完全清楚。作者采用肝脏原位灌注法测定了大鼠急性胆道感染（AOC）所致脓毒症时肝脏糖异生功能的改变，并对AOC后机体重要理糖激素环境的变化及其对精异生功能的影响进行了探讨。结果表明：AOC后24小时大鼠肝脏糖异生功能明显降低，血乳酸和促糖激素水平明显升高，胰岛素显著降低，血糖约维持在正常水平的2．5倍。AOC48小时，大鼠肝脏糖异生功能进一步降低，血乳酸浓度继续增加，但促糖激素无继续升高或明显下降，胰岛素显著上升，血糖水平较AOC24小时明显下降。提示AOC早期大鼠肝脏糖异生功能即有明显降低，此时机体可通过增加糖异生基质和改变理糖激素环境维持应激所需要的高血糖水平；后期肝脏糖异生功能进一步受损，机体代偿功能明显紊乱，血糖浓度明显降低，这可能是胆源性多系统辞官功能不全发生发展的病理生理机理之一。

长链非编码RNA Dancr在糖异生相关模型中的表达规律以及与糖异生的可能调控关系

目的研究长链非编码RNA（lncRNA）Dancr在肝脏中的时空表达规律，探索其与糖异生的可能调控关系与分子机制。方法建立小鼠饥饿-再喂养模型、高脂饮食诱导的肥胖（high-fat diet，HFD）模型，并以磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶、葡萄糖-6-磷酸酶为阳性对照，检测Dancr在两组模型小鼠肝脏中的表达；分离小鼠主要脏器组织，检测不同组织中Dancr的表达量；运用NCBI、UCSC、RegRNA、TargetScan等数据库，分析Dancr的序列特征，预测与其相互作用的miRNA，并对miRNA下游靶基因进行基因本体和京都基因与基因组百科全书分析。采用Student-t检验分析各组之间差异的显著性，采用单因素方差分析比较多组间差异。结果Dancr的表达量随饥饿进程持续升高，并在16 h达到最高，再进食后迅速恢复正常水平（4.20±0.27比1.00±0.23，t=22.10，P〈0.01）。在HFD小鼠肝脏中Dancr表达量同样显著升高（1.69±0.30比1.00±0.25，t=4.33，P〈0.01）。Dancr在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、骨骼肌、小肠、胃、白色脂肪组织、棕色脂肪组织和脑组织中表达差异有统计学意义（F=180.32，均P〈0.01），Dancr在肝脏中的表达量显著高于除脾、肺外的其余组织（t=6.03-36.19，均P〈0.01）。在线分析Dancr位于chr5：74，093，083-74，090，355，全长1 060 bp，由2个外显子构成，可能存在9个与之相互作用的miRNAs（mmu-let-7i-5p、mmu-miR-134-5p、mmu-miR-326-5p、mmu-miR-433-5p、mmu-miR-497-5p、mmu-miR-504-3p、mmu-miR-1906、mmu-miR-432、mmu-miR-5620-5p），调节下游2 124个靶基因，其中多条基因与糖异生调控相关。结论Dancr的表达受生理及病理性糖异生信号影响，可能介导肝脏糖异生的调控，且生物信息学分析为后续实验提供了一定的数据支持，有助于我们进一步了解Dancr在糖异生调控中的分子机制。