脂肪细胞谷氨酰胺合成酶抑制结肠癌细胞的腹腔转移及血管生成

目的探讨脂肪细胞谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)对结肠癌腹腔转移及血管生成的影响。方法转基因小鼠的鉴定:Western blot检测野生型(WT)小鼠及脂肪细胞GS转基因(TgGS)小鼠脂肪细胞GS蛋白的表达。体内实验:分别构建WT小鼠及TgGS小鼠的腹腔转移模型,观察结肠癌细胞在腹腔的种植情况;免疫组化检测移植瘤的血管生成情况。体外实验:取WT及TgGS小鼠的脂肪进行无菌培养,收集条件培养基;通过小管形成实验、CCK8实验、Transwell实验观察条件培养基对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的小管形成、增殖及迁移的影响。结果 Western blot检测结果显示,TgGS小鼠较WT小鼠脂肪细胞GS蛋白水平显著上调(P<0.05)。TgGS小鼠较WT小鼠腹腔移植瘤数量明显减少[(6.33±4.04)vs(16.00±6.56),P<0.05],体积明显减小[(2.35±1.93)vs(9.37±5.07),P<0.01]。免疫组化结果显示,TgGS小鼠肿瘤血管生成明显少于WT小鼠(P<0.05)。体外小管形成实验显示TgGS组较WT组HUVECs小管形成总长度明显缩短(P<0.05);CCK8实验显示TgGS组及WT组HUVECs的增殖差异无统计学意义(P>0.05);Transwell实验显示TgGS组HUVECs细胞迁移数量明显少于WT组[(15.33±5.50)vs(78.33±13.58),P<0.01]。结论脂肪细胞GS可抑制结肠癌腹腔转移及肿瘤血管生成。