PHOX2B在外周神经母细胞性肿瘤4种分型组织中的表达差异

【目的】探讨同源异型盒蛋白2B(PHOX2B)在外周神经母细胞性肿瘤(pNTs)4种分型组织中的表达差异。【方法】回顾性分析2019年1月至2022年12月本院收治的65例pNTs患儿的临床资料,根据免疫组化综合评分方法对pNTs 4种分型中PHOX2B的表达情况进行分析,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估PHOX2B免疫组化综合评分预测神经母细胞瘤(NB)、节细胞性神经母细胞瘤(GNB)混杂型(GNBi)、节细胞性神经母细胞瘤结节型(GNBn)和节细胞性神经瘤(GN)的价值。【结果】男、女患儿病例数分别为33例、32例,无明显的性别差异;年龄分布主要为6岁以下患儿,其所占比例为75.38%(49/65);腹膜后为常见原发部位,其次为纵隔和肾上腺。PHOX2B在NB中免疫组化综合评分最高,其次为GNBn,GNBi和GN表达最弱,NB免疫组化综合评分显著高于GNBn、GNBi、GN,GNBn免疫组化综合评分显著高于GNBi、GN,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线结果显示,PHOX2B免疫组化综合评分为5分时可作为诊断NB的参考阈值,PHOX2B免疫组化综合评分为3分可作为诊断GNBn的参考阈值(P<0.05)。【结论】PHOX2B在pNTs不同类型的表达有显著差异,其表达强度可作为pNTs病理分型的依据。

121例儿童神经母细胞瘤的临床特点及预后影响因素分析

【目的】探讨神经母细胞瘤(NB)的临床特点及影响NB患儿预后的相关因素。【方法】回顾性分析2019年1月至2022年9月本院收治的121例NB患儿的临床资料,单因素分析采用Kaplan Meier法统计各组患儿的平均生存时间,采用Log-rank检验分析各组患者生存时间差异,多因素分析采用Cox回归模型分析影响患儿生存时间的独立危险因素,分析NB临床因素与生存时间、生存结局的相关性。【结果】Log-rank检验分析显示,性别、乳酸脱氢酶(LDH)、NMYC基因扩增、核分裂指数、INSS分期、COG危险度分组、组织学类型是影响患儿生存时间的因素(P<0.05)。Cox回归模型多因素分析显示,LDH≥500 U/L、NMYC基因扩增及INSS分期4期是影响患儿生存预后的独立危险因素(P<0.05)。【结论】NMYC基因扩增及INSS分期4期是影响患儿预后的危险因素,检测血清LDH水平对评估NB患儿预后有重要意义。

综合治疗儿童髓母细胞瘤33例临床分析

目的回顾性分析髓母细胞瘤的临床特点,探讨合理治疗方案,分析预后影响因素。方法 2004年8月-2007年12月共收治髓母细胞瘤术后患儿33例。术后3周内开始放疗,先予以全脑全脊髓28~36Gy,再予瘤床处三维适形局部补量至总量50~54Gy,常规分割剂量1.8~2.0Gy/次;为减轻晚反应,部分患儿采用超分割照射技术（1.0Gy/次、2次/d）;所有患者在6~8周内完成放疗。全脑全脊髓放疗完成后行1个周期同步化疗,全部放疗结束后再进行序贯化疗3~5个周期;化疗方案为洛莫司汀＋长春新碱＋顺铂或异环磷酰胺＋卡铂＋依托泊苷。根据肿瘤是否转移、残存及残存肿瘤大小将患儿分为两组：低风险组（n=24）：无转移、肿瘤全切或近全切（残留肿瘤体积≤1.5cm3）;高风险组（n=9）：已有转移或残留肿瘤体积〉1.5cm3。比较两组患者的3年生存率。结果术后残留病灶患儿的放化疗有效率为90.9%（10/11）,全组完全缓解（CR）93.9%（31/33）,部分缓解（PR）3.0%（1/33）,稳定（SD）3.0%（1/33）。所有患者中位生存时间51个月,3年总生存率和无病生存率分别为78.8%、75.8%。高风险和低风险患儿的3年生存率分别为33.3%和95.8%（P〈0.01）。不良反应主要为血液系统和消化系统的毒性反应：Ⅲ-Ⅳ度骨髓抑制发生率为21.2%（7/33）,恶心发生率87.9%（29/33）,伴呕吐者66.7%（22/33）。结论儿童髓母细胞瘤的诊断不难,首选手术治疗,术后联合放化疗的总体疗效好,严重不良反应的发生率较低。肿瘤清除程度是影响预后的因素之一。

人脑血管母细胞瘤中VEGF和bFGF的表达及与血管生成的关系

目的探讨血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)在人脑血管母细胞瘤中的表达及与肿瘤血管形成的关系。方法应用免疫组织化学S-P法检测32例人脑血管母细胞瘤及10例正常脑组织中VEGF和bFGF表达,以CD34单克隆抗体标记瘤组织血管内皮细胞并测定微血管密度(microvessel density,MVD)。结果人脑血管母细胞瘤组织中VEGF和bFGF的表达显著高于正常脑组织(P<0.01),肿瘤组中MVD值(168.7±56.3)高于正常对照组(24.6±13.4),VEGF与bFGF在人脑血管母细胞瘤组织中表达呈正相关(r=0.541,P<0.01)。与囊性和实性血管母细胞瘤中VEGF、bFGF和MVD的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 VEGF和bFGF在作用机制上可能有密切的联系或存在因果关系,检测VEGF和bFGF可以为脑血管母细胞瘤的发病机制研究及临床治疗提供新的思路。抗VEGF及抗bFGF联合治疗可能成为治疗脑血管母细胞瘤的新方法。

MAPK磷酸酯酶-1通过抑制JNK和p38的磷酸化调节SH-SY5Y神经母细胞瘤的凋亡

目的研究MKP-1在SH-SY5Y神经母细胞瘤中的抗凋亡。方法建立稳定表达MKP-1的SH-SY5Y细胞,用H2O2诱导细胞凋亡,并通过Western blotting比较分析MKP-1的表达对JNK和p38磷酸化的调节。结果①H2O2诱导SH-SY5Y细胞表达MKP-1,同时导致JNK和p38的去磷酸化;②在稳定表达MKP-1的SH-SY5Y细胞中,MKP-1可以抑制JNK和p38的磷酸化。③稳定表达MKP-1的SH-SY5Y细胞抵抗H2O2诱导细胞凋亡的能力比对照细胞提高了1倍左右。结论MKP-1对神经细胞的凋亡具有重要的调节作用,提示MKP-1作为调节ERK、JNK和p38蛋白激酶信号途径的重要分子,可能对退行性神经系统疾病的发病机制和治疗有重要的作用。

血清NSE、SF、LDH、CRP检测对儿童神经母细胞瘤疗效及预后的评估的价值

【目的】探讨血清肿瘤标记物与C‐反应蛋白（CRP）等对儿童神经母细胞瘤（NB）疗效评价及预后评估的价值。【方法】对80例确诊为NB患儿的临床资料进行回顾性分析，对比治疗前后，肿瘤进展或复发前后血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）、血清铁蛋白（SF）、乳酸脱氢酶（LDH）及CRP水平的变化；比较初诊时早期与晚期NB ，以及不同原发部位的 NB患儿血清 NSE、SF、LDH 及CRP水平的差异；分析血清 NSE与SF、LDH、CRP水平的相关性。【结果】治疗有效后血清NSE、SF、LDH及CRP水平显著降低（ P ＜0．001）；病情进展或复发后血清NSE、SF、LDH及CRP水平明显上升（ P ＜0．05）；晚期NB血清NSE、SF、CRP水平明显高于早期（ P ＜0．05），晚期NB血清LDH高于早期，但无统计学意义（ P ＞0．05）；腹部NB血清NSE、SF、LDH、CRP水平明显高于其他部位 NB（ P ＜0．05）。初诊时血清 NSE＞100μg／L 提示预后不良（ P ＜0．05）。血清NSE与SF（ r＝0．765，P＜0．05）、LDH（ r＝0．472，P＜0．001）、CRP（ r＝0．38，P＜0．001）均呈正相关。【结论】血清NSE对NB的病情监测、疗效评价及预后评估有一定的临床价值。

110例儿童神经母细胞瘤临床特征及预后分析

【目的】提高对儿童神经母细胞瘤临床特征及预后的认识。【方法】回顾性分析本院2008年3月至2012年9月资料完整的1】O例儿童神经母细胞瘤患儿的临床表现、肿瘤标志物、病理类型、治疗、并发症及转归。【结果】男60例，女50例，中位年龄32个月，原发肿瘤位于肾上腺42例，腹膜后37例，纵隔26例，盆腔3例，颈部2例。初诊时腹部神经母细胞瘤以发热和（或）腿痛，腹痛、腹胀，包块多见，纵隔、颈部神经母细胞瘤以咳嗽及神经系统表现常见。3年总生存率为66％。初诊年龄〉18个月（P〈0．01）、Ⅲ和Ⅳ期（P=0．008）、纵隔以外原发肿瘤（P=0．027）、血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）〉100ng／L（P=0．01）及手术切除程度（P〈O．01）是预后不良的指标，而血清NSE及肿瘤未能完整切除是独立的预后影响因素。【结论】多数神经母细胞瘤初诊时有临床表现，但不特异，掌握其临床特征早期确诊、完整切除原发肿瘤有利于改善预后；年龄〈18个月者降低化疗强度值得推荐。

神经母细胞瘤53例临床诊疗及预后影响因素分析

【目的】分析53例神经母细胞瘤（neuroblastoma，NB）患儿的临床诊疗过程，并分析预后影响因素。【方法】回顾性分析2008年1月至2013年1月本院住院治疗的53例患儿的临床资料。分析诊疗过程，使用统计学方法分析生存率和预后影响因素。【结果】本组53例患儿随访周期2～58个月，最短生存2个月，最长至今已生存65个月。至目前共生存36例，其中16例无瘤生存，20例带瘤生存，死亡17例。经KaplanMeier生存分析，53例NB患儿1年生存率86．79％，2年生存率64．15％，5年生存率16．98％。Log—Rank检验结果显示：肿瘤原发部位、有无骨髓转移、血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）、血清乳酸脱氢酶（LDH）、手术方式和病理类型明显影响患儿生存时间，差异均有显著性（均P〈0．05）。【结论】对发现肿块的患儿应高度怀疑NB的可能性；对确诊病例而言手术、化疗是主的治疗手段，但该病的远期预后仍不理想，并与多种因素有关。

肝转移儿童Ⅳ期神经母细胞瘤治疗及临床分析

目的探讨伴肝转移的Ⅳ期神经母细胞瘤患儿的临床病理特点,总结治疗经验。方法回顾性分析自2012年6月至2016年6月收治的45例患儿的临床资料,分析临床表现及治疗情况。通过复诊、电话等方式了解患儿术后预后情况。结果45例神经母细胞瘤患儿中91.1%的发病年龄<5岁,男女之比为4∶1,肿瘤原发于肾上腺和腹膜后38例(84.4%),颈部1例(2.2%),纵隔6例(13.4%)。发热、腹痛、发现腹部肿物为最常见的首发症状。神经元特异性烯醇化酶升高者占95.6%,乳酸脱氢酶升高者占88.9%,全部患儿接受新辅助化疗后再手术。手术前后进行共20周化疗,16例患儿目前已经随访20个月,病情稳定。29例患儿出现肿瘤进展或复发,其中22例患儿死亡,死于肿瘤相关疾病。3年生存率为50.3%,5年总生存率为39.8%。结论伴肝转移的Ⅳ期神经母细胞瘤患儿的治疗强调术前化疗、手术、术后化疗的综合治疗,手术发挥的作用建立在对肿瘤转移病灶控制治疗不断提高的基础上。

老年胶质母细胞瘤患者外科治疗后的生存状况及相关影响因素分析

【目的】探讨老年胶质母细胞瘤患者外科治疗后的生存状况及相关影响因素。【方法】选取2012年4月至2014年1月本院收治的67例老年胶质母细胞瘤患者的临床资料，对年龄、性别、肿瘤直径、肿瘤体积、水肿带直径、KPS评分、病程、中线移位、糖尿病、IDH1基因检测、MGMT基因检测、手术方案、肿瘤切除程度、放疗以及化疗情况进行Kaplan-meier和COX回归分析。【结果】胶质母细胞瘤切除术40例，其6个月、1年、2年生存率均显著高于立体定向多靶点活体组织检查术的患者，差异均具有统计学意义（P〈0．05）。不同年龄、水肿带直径、KPS评分、中线移位、糖尿病、手术方案、肿瘤切除程度、是否放化疗的老年胶质母细胞瘤患者的生存时间比较，差异均具有统计学意义（均P〈0．05）。年龄〉70岁、KPS评分≤80分、立体定向术、肿瘤次全切、未接受放化疗是影响胶质母细胞瘤老年患者外科治疗后生存状况的独立危险因素（P〈0．05）。【结论】胶质母细胞瘤老年患者外科治疗后远期生存率较低，其中高龄、KPS评分偏低、非切除手术、肿瘤次全切和未接受放化疗是影响患者生存状况的独立危险因素。

儿童肾母细胞瘤术前全身静脉化疗与经导管动脉栓塞化疗临床疗效对比研究

【目的】对比分析术前全身静脉化疗和经导管动脉栓塞化疗对儿童肾母细胞瘤的疗效。【方法】回顾性选取本院2010年1月至2019年12月收治的肾母细胞瘤患儿作为研究对象,其中48例通过经导管动脉栓塞方式进行术前化疗(观察组),33例以全身静脉给药方式进行化疗(对照组)。观察两组的肿瘤减积率、肿瘤坏死率、包膜完整率、术前化疗总体有效率、肿瘤全切率、2年无瘤生存率和不良反应。【结果】观察组的肿瘤减积率、肿瘤坏死率、包膜完整率、术前化疗总体有效率和肿瘤全切率均高于对照组,不良反应发生率低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。对照组的2年无瘤生存率(94%)高于观察组(88%),但是差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】儿童肾母细胞瘤术前应用经导管动脉栓塞化疗与全身静脉化疗相比,更利于手术切除,疗效更高,不良反应更少,但是在2年无瘤生存率上未展现更好的优势,还需要进一步扩大样本量和随访时间进行临床研究。

小儿巨大疑似嗜铬细胞瘤1例

神经母细胞瘤（neuroblastoma,NB）是幼儿期常见的恶性实体肿瘤之一,80％病例发生于5岁以下儿童,占所有儿童恶性肿瘤的8％～10％[1].其临床症状一般无特异性,往往容易被误诊.NB具有合成分泌儿茶酚胺的特性,当麻醉过浅或术中牵拉挤压肿瘤时可释放出大量儿茶酚胺,引起循环的剧烈波动,在围术期需引起足够重视.本文报道了1例腹膜后巨大肿瘤患儿行剖腹探查术的麻醉经过,其中的经验教训拟为临床提供参考.

慢病毒介导shRNA载体定向敲除ZNF217基因表达对人神经母细胞瘤KELLY细胞侵袭和凋亡的影响

【目的】探究shRNA载体定向敲除ZNF217基因表达对神经母细胞瘤KELLY细胞侵袭和凋亡的影响。【方法】构建人ZNF217基因的shRNA慢病毒载体,以神经母细胞瘤细胞系KELLY细胞为研究对象,根据实验目的,设空白对照组(A组),空白载体病毒组(B组)和ZNF217基因沉默表达载体慢病毒组(C组)。RT-PCR和Western blot检测ZNF217、Caspase-3和Caspase-9的表达水平。Transwell试剂盒检测细胞侵袭能力,AV-PI试剂盒检测细胞凋亡水平,CCK-8试剂盒检测细胞增殖能力。【结果】慢病毒转染滴度为3×10^7 TU/mL,转染率为92%以上;RT-PCR和Western blot检测结果显示,C组ZNF217的mRNA和蛋白的相对表达量要明显低于于A组和B组(P<0.05),但是Caspase-3和Caspase-9的mRNA和蛋白的相对表达量要明显高于A组和B组(P<0.05);C组细胞增殖率要明显低于B组和A组,有显著性差异(P<0.05),C组细胞侵袭能力要明显低于B组和A组,有显著性差异(P<0.05);C组细胞的凋亡率要明显高于B组和A组,有显著性差异(P<0.05)。【结论】shRNA载体定向敲除ZNF217基因表达可以抑制人神经母细胞瘤细胞系KELLY细胞的增殖和侵袭,抑制凋亡,可以作为神经母细胞瘤的潜在治疗靶点。

丹参酮ⅡA抗MPP^＋诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤的机制研究

【目的】探讨丹参酮ⅡA抗MPP＋诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤的蛋白及分子机制。【方法】建立MPP＋诱导的SH-SY5Y细胞模型，并采用丹参酮ⅡA干预及锌原卟啉（Znpp）抑制HO-1，使用MTIc法测定细胞活力，试剂盒检测细胞氧化应激指标超氧化物歧化酶（sOD）和丙二醛（MDA），Real-timePCR和WesternBIot检测HO-1表达；细胞分为对照组（常规培养）、MPP^＋组（1mMMPP＋）、MPP^＋＋丹参酮ⅡA组（1mMMPP^＋＋5μg／mL丹参酮ⅡA）、znpp＋MPP^＋＋丹参酮ⅡA组（5μMZnpp预处理＋lmMMPP^＋＋5μg／mL丹参酮IA）。【结果】与对照组相比，MPP＋组细胞活力明显降低（P〈0．05），SOD含量降低，MDA含量升高（P〈0．05），丹参酮ⅡA处理后细胞活力较MPr组升高（P〈0．05），SOD含量降低，MDA含量升高（P〈0．05）；MPPl。组细胞H0—1mRNA和蛋白表达均较对照组升高（P〈0．05），丹参酮ⅡA处理后H0—1表达进一步升高（P〈0．05）；Znpp抑制HO-1后，丹参酮ⅡA对细胞活力的恢复及氧化应激的缓解被抑制（P〈0．05）。【结论】丹参酮ⅡA能减轻MPP＋诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤，可能与其诱导HO-1表达有关。

嗅神经母细胞瘤淋巴结转移病灶伴发血管升压素不适当分泌综合征一例并文献复习

神经内分泌肿瘤常伴发血管升压素不适当分泌综合征(SIADH),严重低钠血症可危及生命而需要紧急处理。本文总结了我院2012-11-20收治的1例嗅神经母细胞瘤淋巴结转移病灶伴发SIADH患者出现严重低钠血症的诊疗方法。本例患者为左鼻腔嗅神经母细胞瘤,经手术和放疗11个月后发现左颈淋巴结转移,并伴发严重低钠血症,遂诊断为SIADH。经限水、补充3%氯化钠注射液、口服托伐普坦后,患者血钠水平升至参考值并持续维持,后成功行颈部肿物切除手术和放疗。

顺铂对神经母细胞瘤细胞衰老的诱导作用及其机制

目的研究化疗药物顺铂(cisplatin)诱导神经母细胞瘤细胞衰老及作用机制,探讨其是否能够通过诱导细胞衰老而抑制肿瘤生长。方法以N-MYC扩增的神经母细胞瘤细胞系(IMR32)为研究对象,噻唑蓝比色法(MTT)和流式细胞术检测不同浓度的顺铂(0.5、1、2、5μmol/L)对细胞生长和细胞周期、凋亡的影响。利用2μmol/L顺铂处理细胞48h后,采用衰老相关-β-半乳糖苷酶(senescence associated-β-galactosidase,SA-β-gal)染色方法检测细胞衰老情况。利用蛋白质免疫印迹(Western blot)方法检测衰老细胞内N-MYC蛋白的表达情况。结果 MTT和流式细胞术结果显示顺铂(2μmol/L)在短时间作用下可抑制肿瘤细胞增殖而不出现明显凋亡。顺铂(2μmol/L)处理IMR32细胞48h后进行SA-β-gal细胞染色,可见加药处理后细胞呈现蓝色,说明顺铂能够诱导神经母细胞瘤细胞出现衰老。收集顺铂(2μmol/L)作用不同时间段的细胞,利用Western blot分析N-MYC蛋白水平表达,结果显示顺铂处理后的衰老细胞中NMYC蛋白表达下调。结论顺铂可通过下调N-MYC蛋白表达,诱导神经母细胞瘤细胞衰老,进而抑制肿瘤生长。

神经母细胞瘤原位荷瘤与转移瘤裸鼠模型建立的实验研究

目的用自建的细胞系QDDQ建立起原位荷瘤与转移瘤裸鼠模型,探讨神经母细胞瘤(Neuroblastoma,NB)的转移特性。方法取NB新鲜瘤组织,利用酶消化法,建立起体外细胞系,以(3～7)×107/ml浓度的单细胞悬液0.5 ml接种于裸鼠,建立荷瘤鼠模型。结果 NB原位荷瘤与转移瘤裸鼠模型成功建立,实验鼠共30只,致瘤25只,致瘤率为83.3%。10只原位荷瘤,15只转移荷瘤。结论建立NB细胞动物模型,对于进一步研究其转移特性、分子生物学特征,提供了良好的平台。

miR-26a靶向调控AP-2γ表达对神经母细胞瘤细胞增殖的影响

[目的]探讨miR-26a是否可通过靶向调控AP-2γ表达而抑制神经母细胞瘤细胞增殖.[方法]通过双荧光素酶基因分析检测miR-26a对AP-2γ 3＇非编码区（3＇UTR）-荧光素酶的影响;采用Western blot方法检测miR-26a模拟物转染神经母细胞瘤细胞中AP 2γ表达水平;将AP-2γ shRNA转染SK-N AS细胞,MTS细胞增殖活性检测分析干扰AP-2γ表达对神经母细胞瘤细胞增殖能力.[结果]双荧光素酶活性检测显示miR-26a特异性地与AP-2γ的3＇UTR结合,抑制其荧光素酶活性.过表达miR-26a的神经母细胞瘤细胞AP2γ蛋白表达水平降低;shRNA干扰AP-2γ表达能抑制SK-N-AS细胞的增殖能力.[结论]miR-26a通过靶向调控AP-2γ表达而抑制神经母细胞瘤细胞的增殖.