原位小鼠乳腺癌肝转移模型

目的探讨利用HER-2阳性细胞系SKBr-3建立自发性乳腺癌肝转移模型,为乳腺癌肝转移的机制及治疗学研究提供有价值的模型。方法利用SKBr-3乳腺癌细胞株接种至16只裸鼠第二对乳腺脂肪垫,建立裸鼠第一代原位乳腺癌模型,再利用建立成功的原位肿瘤组织在16只裸鼠原位进行瘤组织块第二代原位种植,最后利用第二代组织块种植成功的瘤组织对16只裸鼠再次进行原位肿瘤种植,分别观察肿瘤肝转移情况。结果在第一代肿瘤细胞原位种植的肿瘤中,没有发生肝转移现象。而在第二代组织原位种植瘤中,只有1只发生肝转移,而在第三代的组织原位肿瘤种植模型中出现了接近81.25%(13/16)的肝转移。无一只出现肉眼肺转移。结论乳腺癌裸鼠体内反复传代可以建立高效、相对特异性的自发性乳腺癌肝转移模型,为肝转移机制及治疗研究提供很好的模型。

HSV-TK/GCV自杀基因系统治疗小鼠乳腺癌的研究

目的:探讨HSV-TK/GCV自杀基因系统对小鼠乳腺癌细胞系MA782/5S-8102形成肿瘤的体内杀伤作用及其产生的旁观者效应。方法:体内实验分动物致瘤组、抑瘤实验组和治疗实验组。分别按实验组别要求接种5.0×106细胞/只于BALB/C小鼠的右腋窝皮下,观察各组肿瘤形成及肿瘤治疗情况并统计各组生存期。治疗结束后将标本制成石蜡切片进行病理学分析,RT-PCR检测HSV-TK基因在肿瘤组织中的表达情况。统计学处理采用SPSS软件进行完全随机的方差分析(ANOVA)。结果:实验结果显示小鼠成瘤率为100％。丙氧鸟苷(ganciclovir,GCV)可明显抑制MA782/5S-8102/TK细胞在BALB/C小鼠体内的肿瘤形成。经GCV治疗后,MA782/5S-8102/TK组和混合细胞组的肿瘤体积分别较对照组肿瘤体积缩小约36.7％和28.6％(均P<0.001);生存期也明显延长(P<0.001);RT-PCR检测HSV-TK基因在肿瘤组织中有表达。实验组肿瘤组织与对照组相比存在明显的病理学改变。结论:逆转录病毒可介导HSV-TK基因转入小鼠乳腺癌细胞MA782/5S-8102并获稳定表达,HSV-TK/GCV自杀基因系统在体内对乳腺癌细胞有杀伤作用,且存在明显的旁观者效应。

反应停联合他莫昔芬对小鼠乳腺癌术后复发和转移的影响

目的:观察反应停联合他莫昔芬对小鼠乳腺癌手术切除后转移和复发的影响。方法:将小鼠4T1乳腺癌细胞植入雌性BALB/c小鼠乳房脂肪垫下。乳腺癌直径达10mm时手术切除,次日开始分别用50mg/kg的反应停和25mg/kg的他莫昔芬单独及联合治疗小鼠3周。治疗效果通过小鼠术后转移和复发率、小鼠血清中Na+,K+,Cl-,glu水平及小鼠存活时间评价。结果:对照组、他莫昔芬组、反应停组、反应停联合他莫昔芬组乳腺癌复发率分别为75%、80%、60%和20%;肺内出现转移灶率分别为80%、100%、50%和25%。与对照组比较,他莫昔芬治疗小鼠血清Cl-和K+升高,Na+和glu降低。反应停及反应停联合他莫昔芬治疗小鼠血清Cl-、Na+、K+和glu与正常小鼠相似。结论:反应停联合他莫昔芬能促进机体电解质平衡,可以用于预防乳腺癌术后转移和复发。

脂质体包裹DNMT1反义寡核苷酸诱导白血病细胞株孕酮受体去甲基化的实验研究

目的 研究脂质体包裹DNA甲基转移酶 (DNMT1)反义寡核苷酸转染对白血病细胞株孕酮受体 (ProgesteroneReceptor,PR)启动子甲基化及表达的影响 ,探讨甲基化基因治疗的新途径。方法 人工合成的DNMT1反义寡核苷酸MG88用脂质体包裹后转染白血病细胞株 ,用RT PCR检测DNMT1、PRBmRNA表达的变化以及用MSP分析PRA、PRB甲基化状态的改变。结果 用MG88转染白血病细胞株后 ,DNMT1mRNA显著下降 ;PRA、PRB启动子出现脱甲基化 ,PRBmRNA表达显著上升。结论 DNMT1反义寡核苷酸MG88可以诱导白血病细胞PR脱甲基化 ,使PRBmRNA表达升高 ,为DNA甲基化基因治疗的实验性研究提供了可能。

射频消融联合胞嘧啶鸟嘌呤寡脱氧核苷酸治疗小鼠乳腺癌皮下模型

目的观察射频消融联合瘤周注射胞嘧啶鸟嘌呤寡脱氧核苷酸（CpGODN）对BALB／c小鼠皮下种植性乳腺癌的治疗作用及对荷瘤鼠免疫功能的影响。方法32只BALB／c小鼠双侧胁肋部皮下接种乳腺癌细胞EMT-6，建立乳腺癌动物模型，随机分为4组，每组8只，分别给予左侧皮下肿瘤射频消融＋瘤周注射CpGODN、射频消融、瘤周注射CpGODN和瘤周注射生理盐水4种处理。定期测量治疗侧及非治疗侧肿瘤大小，尾静脉取血法收集各组小鼠外周血，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清白细胞介素（IL）-12、IL-10、IL-2及干扰素（IFN）-γ含量。当非治疗侧肿瘤直径达到18mm时手术切除肿瘤，并记录为非治疗侧观察终点，当治疗侧肿瘤直径达到18min时或出现恶病质时处死小鼠，记录生存时间。结果射频消融＋瘤周注射CpGODN组和射频消融组治疗侧肿瘤体积体积显著小于CpGODN组和对照组（P〈0．05）。射频消融＋瘤周注射CpGODN组未治疗侧的肿瘤体积在第21天后明显小于其他各组（P〈0．05）。射频消融＋瘤周注射CpGODN组中位生存时间为92d，射频消融组为84d，瘤周注射CpGODN组为64d，对照组为60d。射频消融＋瘤周注射CpGODN组小鼠外周血中IL—12浓度为312．40ng／L，IL-10浓度为216．34ng／L，IL-2浓度为75．33ng／L，IFN-γ浓度为69．32ng／L，显著高于其他3组（P〈0．05）。结论射频消融联合瘤周注射CpGODN能激活小鼠体内的抗肿瘤免疫效应，起到抑制肿瘤生长作用。