异体垂体移植大鼠E_2诱致催乳素瘤的实验研究

目的 探讨催乳素瘤的发病机理,验证其原发于腺垂体的假说。方法 应用雄性S.D.大鼠进行异体垂体移植,并通过背部埋植17-β-雌二醇(E_2)药泵,观察E_2对大鼠原位垂体,异体移植于肾囊的垂体及血浆催乳素(prolactin,PRL)水平的影响。并利用上述垂体细胞原代培养及原位杂交组化方法,研究经E_2作用120d后的原位及移植垂体细胞中PRL基因表达水平的改变。结果 经E_2作用60d及120d后,大鼠体重分别降至正常大鼠的74%(P<0.01)和50%(P<0.001),原位垂体及移植垂体的重量则较对照组增加达三倍以上(P<0.001),并伴高催乳素血症,血浆催乳素水平为对照组的100～200倍(P<0.001)。原位杂交结果表明,E_2作用120d后,原位及移植垂体细胞中PRL mRNA水平分别升高为正常大鼠垂体细胞的3.1倍和3.5倍(P<0.001),且二者的表达水平无显著差异。结论 提示E_2也可不经下丘脑机制直接作用于腺垂体水平诱发催乳素瘤,即催乳素瘤有可能原发于腺垂体。但本工作尚未进一步排除催乳素瘤的形成涉及下丘脑机制的可能性。

雌激素诱发大鼠原位与移植垂体催乳素瘤中催乳素基因与TGFα和TGFβ1基因的表达

利用本实验室建立的17β雌二醇(17βestradiol,E2)诱致SpragueDawley(SD)大鼠原位垂体和异体移植于肾囊的垂体同时形成催乳素(prolactin,PRL)瘤的动物模型,采用Northern印迹杂交方法,我们观察了E2长期作用(120d)后诱发的原位与移植垂体PRL瘤中PRL基因和两种转化生长因子(transforminggrowthfactor,TGF)TGFα和TGFβ1基因表达水平的改变。结果表明:在E2长期作用后,原位垂体与异体移植于肾囊,从而远离下丘脑的垂体均可形成垂体PRL瘤;原位与移植垂体PRL瘤中均表现PRL基因的高表达,但移植瘤中的PRL基因表达水平低于原位垂体瘤;此外,仅在原位垂体PRL瘤中发现上述两种转化生长因子呈较高水平的表达,移植垂体PRL瘤与正常垂体中均检测不到这两种转化生长因子的表达。上述结果提示,TGFα和TGFβ1可能涉及E2诱发的原位垂体PRL瘤形成;

神经生长因子受体在垂体腺瘤中的表达

目的 :探讨两种神经生长因子 (NGF)受体 (TrKA和 gp75 )在各类垂体腺瘤中的表达。 方法 :采用免疫细胞化学SABC法 ,检测了 44例经病理证实的垂体腺瘤中两种NGF受体的表达情况。结果 :TrKA在垂体PRL分泌腺瘤中的过度表达率6 9 2 % ,而在其它类型垂体腺瘤中的过度表达率为 19 4% ,两者比较差异有非常显著性 (P <0 0 0 5 )。gp75在垂体PRL分泌腺瘤中的过度表达率为 46 2 % ,而在其它类型垂体腺瘤中的过度表达率为 9 7% ,两者比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 :两种NGF受体主要在垂体PRL分泌腺瘤中表达 ,gp75的表达与否可能与PRL瘤的侵袭性和对多巴胺D2 受体激动剂治疗的敏感性有关。

垂体腺瘤nm23基因表达研究

采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分子杂交技术，检测３５例垂体腺瘤和１例正常垂体组织ｎｍ２３基因ｍＲＮＡ表达。所有垂体腺瘤和正常垂体组织均表达０．８ｋｂ的ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ和０．４５ｋｂ的ｎｍ２３Ｈ２ｍＲＮＡ片段。侵袭型垂体腺瘤ｎｍ２３Ｈ１和Ｈ２ｍＲＮＡ表达水平（２５．７５±１７．４０，４１．５８±１９．２６）分别较非侵袭型垂体腺瘤（４６．８７±２３．５１，５９．８３±２５．６９）下降，其差别有显著性意义。（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）。ｎｍ２３基因ｍＲＮＡ表达水平下降与患者的性别、年龄以及Ｈａｒｄｙ和Ｗｉｌｓｏｎ分级、分期无显著相关性。结果提示ｎｍ２３基因表达与垂体腺瘤的临床行为有关。

垂体腺瘤p53蛋白表达及其意义

目的：研究突变型ｐ５３癌基因在垂体腺瘤中的表达。方法：应用免疫组化ＡＢＣ法检测６４例垂体腺瘤（复发组３１例，非复发组３３例），６例正常垂体、２例垂体癌中ｐ５３蛋白表达情况。结果：复发组中有１０例ｐ５３蛋白表达阳性，非复发组中有２例ｐ５３蛋白表达阳性，两组差异有显著性。２例垂体癌ｐ５３蛋白强阳性表达，６例正常垂体无阳性表达。ｐ５３蛋白在不同激素类型垂体腺瘤中的阳性表达率差异无显著性。结论：ｐ５３蛋白高表达与少数垂体腺瘤的潜在恶性及复发有关，与垂体腺瘤激素类型无关。

侵袭性垂体腺瘤nm23基因表达与细胞增殖活性的关系

目的 探讨nm2 3基因在侵袭性、非侵袭性垂体腺瘤中的表达及其与细胞增殖活性之间的关系。方法 采用免疫组化法对 85例垂体腺瘤 (其中 6 2例侵袭性垂体腺瘤 ,2 3例非侵袭性垂体腺瘤 )应用肿瘤侵袭抑制基因nm2 3和反映细胞增殖活性的KI-6 7单克隆抗体进行检测。结果 nm2 3的表达在侵袭性垂体腺瘤明显低于非侵袭组 ,两者之间差异有显著性 (P <0 0 1)。在nm2 3阴性表达组中KI-6 7的表达明显高于nm2 3阳性表达组 (P <0 0 1)。表明nm2 3的表达与KI -6 7呈显著负相关关系。结论 nm2 3是反映垂体腺瘤侵袭性生物学特性的良好标志物 ,与KI -6 7互补作为预测垂体腺瘤侵袭、复发的客观指标。用于指导垂体腺瘤术后的临床治疗。

GRP和VIP对E_2诱致的垂体催乳素(PRL)瘤细胞PRL基因转录的影响

实验应用雄性SD大鼠，皮下埋植内置10mg雌二醇（E2）硅胶管3个月致垂体催乳素（prolactin，PRL）瘤后，取PRL瘤细胞进行体外原代培养，并应用原位杂交方法，研究不同剂量的胃泌素释放肽（gastrin－releasingpeptide，GRP）和血管活性肠肽（vasoactiveintestinalpolypeptide，VIP）以及E2对离体培养的垂体PRL瘤细胞PRL基因转录的影响。结果如下：GRP，VIP分别与PRL瘤细胞孵育24h后，10－8mol／L，10－7mol／L的GRP均不影响PRL瘤细胞内PRLmRNA水平，但10-6mol／L的GRP可使胞内PRLmRNA水平下降20％（P＜0．05）。在本实验所采用的浓度范围内，VIP均可升高PRL瘤细胞内PRLmRNA水平，10－8mol／L，10－7mol／L，10－6mol／L的VIP分别使胞内PRLmRNA升高为对照组的1．60，2．10，2．21倍（P＜0．05）。三种浓度的E2分别与PRL瘤细胞孵育48h后，10－8mol／LE2不影响胞内PRLmRNA水平，但10－7mol／L，10－6mol／L的E2则分别可使胞内PRLmRNA升高为对照组的2．80，2．92倍（P＜0．05）。上述结果表明：GRP和VIP可能分别抑制和增强由E2诱致的垂体PRL瘤细胞PRL基因的转录；一定浓度的E2可能直接涉及E2诱发垂体PRL瘤时伴高PRL血症。

生长抑素受体1,2亚型在垂体腺瘤中的表达

目的 研究生长抑素受体 1,2亚型在不同病理类型垂体腺瘤中的表达特性 .方法 运用原位杂交技术 ,以放射性核素标记SSTR1 2亚型的寡核苷酸为探针 ,检测 2 9例垂体瘤、12例正常垂体组织中SSTR1,2mRNA的表达模式 .结果 SSTR1,2亚型同时表达于功能型、无功能型垂体瘤及正常垂体组织中 ,它们的阳性率分别为 10 0 % ,79% ,33%和10 0 % ,86 % ,2 5 % ;其中SSTR2表达的强阳性率较高 (5 2 % ) .结论 垂体腺瘤可同时表达两种生长抑素受体亚型 。

垂体生长激素腺瘤患者血清GH水平与肿瘤侵袭性及复发的关系

目的：探讨垂体生长激素腺瘤患者血清生长激素（ＧＨ） 水平与肿瘤侵袭性及复发的关系。方法：采用放射免疫分析方法对３６ 例垂体生长激素腺瘤患者测定血清ＧＨ 水平进行回顾性研究。结果：所有垂体生长激素腺瘤患者血清ＧＨ 均＞ １０ｍｇ／Ｌ，侵袭型垂体生长激素腺瘤患者血清ＧＨ 水平术前（８６ ．３１ ±４３ ．８１ｍｇ／Ｌ） 和术后（４６ ．４１ ±１８ ．７２ｍｇ／Ｌ） 分别显著高于非侵袭型术前（５８ ．００ ±１２ ．６３ｍｇ／Ｌ） 和术后（１２ ．３６ ±３ ．９８ｍｇ／Ｌ）（ Ｐ＜ ０ ．０５ ；Ｐ＞ ０ ．０１） ；Ⅲ，Ⅳ级垂体生长激素腺瘤患者血清ＧＨ 水平术前（８４ ．８５ ±４６ ．３３ｍｇ／Ｌ） 和术后（４４ ．９４ ±１７ ．４７ｍｇ／Ｌ） 分别显著高于Ⅰ，Ⅱ级术前（５７ ．６４ ±１２ ．６７ｍｇ／Ｌ） 和术后（１４ ．６７ ±３．２０ｍｇ／Ｌ）（ Ｐ＜０ ．０５ ；Ｐ＜ ０ ．０１） ；血清ＧＨ 水平升高与患者性别、年龄无显著相关性（ Ｐ＞ ０ ．０５） ；术后侵袭型垂体生长激素腺瘤３ 年复发率４２ ．９ ％ （６／１４） 显著高于非侵袭型９ ．１ ％ （２／２２）（ Ｐ＜ ０ ．０５） 。结论：垂体生长激素腺瘤患者血清ＧＨ 水平与肿瘤的临床行为有关。

P16蛋白表达与垂体腺瘤侵袭和复发的关系

目的 探讨Ｐ１６蛋白表达与垂体腺瘤侵袭及复发的关系。方法 应用免疫组化染色技术检测５７例垂体腺瘤中Ｐ１６蛋白的表达水平，并对患者进行了５抻随访观察。结果 垂体腺瘤细胞中Ｐ１６蛋白表达的阳性率为３１．６％；侵袭性组中该蛋白表达的阳性率显著低于非侵袭性组（Ｐ＜０．０１）。复发组１１例未见该蛋白表达。结论 Ｐ１６蛋白的表达阳性率与垂体腺瘤激素分泌功能无明显的相关性，但其表达水平可作为临床评价垂体腺瘤的侵袭性和预测患者复发的指标。

垂体ACTH腺瘤及含ACTH的多激素腺瘤免疫组化、透射及免疫电镜观察

应用免疫组比、透射电镜和免疫电镜观察9例ACTH腺瘤和35例含ACTH多激素腺瘤。ACTH细胞形态为：密集颗粒型、稀疏颗粒型、含泪滴状分泌颗粒的静默Ⅱ型及无任何典型形态特征的ACTH细胞；分泌颗粒的数量与免疫组化阳性强度呈正相关；核周Ⅰ型微丝束为特征性形态结构。9例ACTH腺瘤中8例临床与病理相符，Ⅰ例为静默Ⅱ型。35例多激素腺瘤由2～5种激素形成16种组合。其中1例免疫组化标记阴性，免疫电镜观察为ACTH-PRL多激素功能性瘤样细胞瘤。

40例垂体腺瘤免疫组化及临床病理分析

对４０例垂体腺瘤进行免疫组化激素定位分类，将其分为单一激素分泌性腺瘤、多激素分泌性腺瘤及免疫组化阴性腺瘤，结合临床进行分析。

垂体催乳素瘤的病因及发病机制的实验研究

应用在同一只雄性SD大鼠中,保留原位垂体并在肾囊内植入一异体垂体,同时背部埋植装有17β雌二醇(17βestradiol,E2)的药泵,经E2在体作用60～120天后,其原位垂体和异体移植入肾囊的垂体同时形成垂体催乳素(prolactin,PRL)瘤的动物模型,研究PRL瘤的发病机制。结果表明,E2长期作用可诱发原位垂体和远离下丘脑的移植垂体同时形成PRL瘤,并伴高PRL血症和PRL基因的高表达;体外和体内实验结果均显示,一些相关生长因子或细胞因子可能与PRL瘤的形成有关;分析正常垂体、原位和移植垂体瘤中PRL基因调控序列的结构,表明在原位垂体瘤中PRL基因近端启动子区发生点突变,突变启动子活性增高,而移植垂体瘤PRL基因相应序列无改变。上述结果提示:垂体PRL瘤可能原发于腺垂体水平,但未排除继发于下丘脑异常的另一可能性;雌激素诱发原位和移植垂体形成PRL瘤的发病机制可能不尽相同;体内神经内分泌免疫网络在原位垂体PRL瘤的发生过程可能起一定作用,但其确切证据尚待深入探讨。

垂体腺瘤p16纯和性缺失的研究

目的 :探讨p16的纯合性缺失与垂体腺瘤发生和侵袭的关系。对象与方法 :临床MRI和病理证实的垂体腺瘤标本 40例 ,DNA提取后酶切 ,采用核酸杂交技术与同位素标记的p16cDNA探针进行杂交 ,放射自显影显示结果。结果 :p16纯和性缺失的病例 ,其MRI表现为侵袭性垂体腺瘤 ,而非侵袭性垂体腺瘤则未发现有纯和性缺失。结论 :垂体腺瘤的发生与p16的表达缺失有关 ,而p16基因的纯和性缺失是侵袭性垂体腺瘤的分子标志之一。

垂体腺瘤激素灰度值与内分泌症状关系

垂体腺瘤是鞍内最常见的肿瘤，占颅内肿瘤的第２位〔１〕。本文应用免疫组化技术及计算机辅助图像测量系统的灰度测量技术，对３６例垂体腺瘤激素类型及阳性程度进行测量，探讨其临床病理联系。１材料与方法１．１临床资料３６例垂体腺瘤，男１４例，女２２例，年龄１６～...

神经垂体少见肿瘤15例临床病理分析

以光镜、电镜、组化和免疫组化等方法，研究了１５例发生于神经垂体（包括漏斗突、漏斗柄和正中隆起）的少见肿瘤：星形细胞瘤１２例（其中３例伴垂体腺瘤、１例伴灶性节细胞增生）；节细胞瘤２例（１例伴侵袭性垂体腺瘤）；颗粒细胞瘤１例。临床均有闭经泌乳等内分泌症状和视力改变及内分泌检验异常等。因瘤体多较小，且质地稀软，临床、手术、放射和病理检查常被忽视。手术疗效佳，术后短期内症状体征消失或明显改善。此外，还探讨了节细胞瘤和颗粒细胞瘤的起源，讨论了临床、手术、放射和病理检查等应注意的问题等。

垂体腺瘤中垂体激素与S-100蛋白免疫组化双重染色观察

目的：探讨滤泡星状细胞在垂体腺瘤分类中的意义及滤泡星状细胞与内分泌细胞之间的关系。方法：应用免疫组化双重染色方法，对４２ 例人重体腺瘤的垂体激素与 Ｓ１００ 蛋白表达进行对照观察。结果：垂体腺瘤组织中的滤泡星状细胞有两种情况，一种为腺瘤组织中可见散在分布的滤泡星状细胞，并可见１ 个瘤细胞既有 Ｓ１００ 蛋白表达，又含激素分泌颗粒；另一种为滤泡星状细胞构成了腺瘤的一种主要的细胞成分。结论：滤泡星状细胞与内分泌细胞的功能密切相关，可能在调整内分泌细胞的产生和激素释放方面起一定的作用；滤泡星状细胞腺瘤应作为垂体无功能腺瘤的一个单独类型。

高生长激素、高泌乳素血症垂体腺瘤的临床病理学研究

采用放射免疫、免疫组化及电镜技术对94例垂体腺瘤进行检查。选择其中36例伴有血清生长激素(GH)和泌乳素(PRL)同时增高者作为研究对象。结果显示,此类腺瘤分4种类型:(1)生长激素与泌乳素细胞混合型腺瘤;(2)嗜酸性干细胞腺瘤;(3)多激素腺瘤;(4)生长激素细胞腺瘤。文中就各型腺瘤的病理和临床特点进行了讨论。

43例垂体微腺瘤临床病理研究

本文对４３例垂体微腺瘤作了分析研究，以便了解其临床特征及病理分类特点，结果显示垂体微腺瘤临床主要以继发性闭经、溢乳为特点。垂体ＣＴ轴面薄层增强扫描加矢状、冠状重建是经济、可靠的诊断方法。腺瘤病理分类亦以催乳素腺瘤为主（５３．４９％），其他是混合性腺瘤（１１．６％），生长激素腺瘤（６．９８％），促肾上腺皮质素腺瘤（４．６５％），促肾上腺皮质素细胞增生（２．３３％），未进一步分类（１８．６％）。免疫组化染色是必需的，强调网纤维嗜银染色在病理诊断上的重要性。术前诊断与病理诊断大致相符。