含蓖麻毒素A链的抗膀胱癌免疫毒素的制备及其抗肿瘤活性

含蓖麻毒素Ａ链的抗膀胱癌免疫毒素的制备及其抗肿瘤活性赵 ，王玲，谢蜀生，龙振洲（北京医科大学免疫学教研室，北京１０００８３）膀胱癌属腔内肿瘤。用抗膀胱癌单抗与蓖麻责素（Ｒｉｃｉｎ，ＲＴ）全分子偶联制备的免疫毒素（Ｉｍ－ｒｎｕｎｏｔｏｘｉｎ，ＩＴ）与高?..

免疫组化结合图像分析研究膀胱癌中表皮生长因子受体的分布及意义

应用免疫组化方法结合图像分析研究58例膀胱肿瘤表皮生长因子受体（EGFR）与膀胱肿瘤之间的关系。结果显示EGFR阳性率为34.5％,其阳性显色分别定位于细胞膜（占55％）和胞浆内（占 45％）。其阳性率在肿瘤的病理分级、临床分期及预后等方面差异显著（P<0.05）。提示EGFR的异常表达可作为判定膀胱肿瘤恶性程度及预后的一项重要指标。

膀胱癌患者染色体畸变及SCE的研究

作者对19例膀胱癌患者和16例正常人外周血淋巴细胞染色体畸变和SCE进行了研究。结果表明膀胱癌患者染色体总畸变率、断裂及裂隙、脆性位点的表达、四倍体、着丝粒后期相以及SCE率都明显高于正常人。对以脆性位点表达率和SCE率为指标检测群体中,尤其是高危群体中肿瘤易患性个体的可能性进行了讨论。

膀胱肿瘤中p53、p21、C-erbB-2癌基因表达及T细胞亚群研究

目的：探讨ｐ５３ 、ｐ２１ 、ＣｅｒｂＢ２ 表达与膀胱癌生物学行为的关系以及膀胱癌患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群的变化。方法：应用免疫组化ＬＳＡＢ（Ｌａｂｅｌｌｅｄ Ｓｔｒｅｐｔ Ａｄｉｎ Ｂｉｄｉｎ） 技术，检测膀胱癌相关癌基因ｐ５３ 、ｐ２１、ＣｅｒｂＢ２ 的基因表达。结果：ｐ５３ 、ｐ２１、ＣｅｒｂＢ２ 阳性表达率随病理分级上升而上升；浸润性癌ｐ５３ 、ｐ２１ 、ＣｅｒｂＢ２ 的阳性表达强度高于浅表性癌；阳性表达的术后癌复发率明显高于阴性表达，阳性表达的死亡率亦高于阴性表达者。Ｔ细胞亚群中ＯＫＴ４ＯＫＴ８、Ｅｔ、Ｅａ 数随肿瘤分级而下降，而ＯＫＴ８ 值则逐渐升高。结论：证明ｐ５３、ｐ２１、ＣｅｒｂＢ２ 基因与肿瘤生物学行为之间存在密切关系，细胞免疫功能在肿瘤的发生、发展中起着一定的作用。

BCG－PSN、rIFN－r对膀胱癌患者T细胞MHCⅡ类抗原及IL－2R表达的诱导作用

采用鼠单克隆抗体间接免疫荧光技术观察了卡介苗多糖核酸（ＢＣＧ－ＰＳＮ）、重组免疫干扰素（ｒＩＦＮ－ｒ）在体外对膀胱癌患者外周静脉血Ｔ淋巴细胞主要组织相容性复合体（ＭＨＣ）Ⅱ类抗原及白细胞介素－２受体（ＩＬ－２Ｒ）表达的影响。结果表明；两者均能诱导病人Ｔ细胞ＤＲ抗原ＩＬ－２Ｒ的表达（Ｐ＜０．０５），而对正常人Ｔ细胞表达的影响无统计学意义。提示ＢＣＧ和ｒＩＦＮ－ｒ防治膀胱癌的作用可能与其诱导ＤＲ抗原、ＩＬ－２Ｒ的表达有关。

ABC免疫电泳对膀胱癌P_（21）蛋白表达的观察

用ＡＢＣ免疫电泳检查了２９例膀胱移行细胞癌、６例癌旁粘膜、３例膀胱炎和３例正常膀胱粘膜的Ｐ_（２１）蛋白表达，发现２５例（８６．２％）膀胱癌、３例癌旁组织、１例正常膀胱粘膜、２例膀胱炎组织有Ｐ_（２１）蛋白表达。随肿瘤分级增高，Ｐ_（２１）蛋白条带的光密度积分增加；肿瘤组织Ｐ_（２１）蛋白光密度积分高于癌旁组织，癌旁组织又高于正常膀胱粘膜。

膀胱癌治疗前后淋巴细胞亚型分析及其意义

目的 :研究膀胱癌患者治疗前后机体T细胞分化群状态及其与肿瘤侵袭、转移和复发的关系。方法 :以2 0例良性疾病对照 ,应用流式细胞仪检测 2 0例膀胱癌患者外周静脉血中CD3 ,CD4和CD8细胞亚群及CD4/CD8比例 ,应用方差分析及t检验 ,比较二者差异及临床意义。结果 :膀胱癌患者术前 ,CD3 ,CD4亚型值和CD4/CD8比值明显低于对照组检测值 (P <0 .0 5 ) ,而CD8值无明显差异 (P>0 .0 5 )。手术后 ,CD3 ,CD4及CD4/CD8值增高 ,但与对照组术后比较无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ,CD8值术后明显降低 ,与术前比较有显著性变化 (P <0 .0 5 ) ;化疗后CD3 ,CD4值降低 ,CD8值升高 ,与化疗前比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;与术前比较CD3 ,CD4变化无明显差异 (P>0 .0 5 ) ,但CD8较术前升高 ,CD4/CD8低于术前 (P<0 .0 5 )。淋巴细胞CD3 ,CD4,CD8表型与膀胱癌病理分级 ,分期未见显著相关性 ,但 1例M +期肺转移患者CD3 ,CD4明显低于T2 ,T3期病例。复发癌组CD3 ,CD4,CD4/CD8低于未复发组 (P <0 .0 5 ) ,而CD8高于未复发组 (P <0 .0 5 )。结论 :膀胱癌患者存在有机体免疫功能低下状态 ,化疗有可能增加肿瘤免疫抑制作用 。

ras癌基因产物P^(21)表达与膀胱癌生物学行为关系的研究

应用免疫组织化学方法,对34例石蜡包埋的膀胱癌标本中P^(21)表达进行了检测.结果显示:P^(21)表达只存在于癌组织中,且膀胱癌病理分级愈高、临床分期愈晚,则P^(21)阳性率越高.21例P^(21)阳性膀胱癌的复发率为90.5%,而13例P^(21)阴性膀胱癌的复发率为46.2%,P^(21)阳性病例几乎全有淋巴结转移,明显高于P^(21)阴性者.提示P^(21)阳性病例预后较差.

膀胱癌及其癌旁组织中ras-P^(21)蛋白的表达

冯玉贵九台市人民医院 摘要 应用免疫组织化学技术（ＡＢＣ法）对４２例膀胱癌及癌旁组织中ｒａｓ癌基因产物Ｐ２１蛋 白检测结果表明：癌组织中Ｐ２１阳性率和癌分组织中阳性率分别是７３．８％，１４． ３％。Ｐ２１蛋白的阳性 率随着病理分级、肿瘤分期的上升其阳性度增强，在癌究组织中Ｐ２１阳性者其预后更差。

膀胱肿瘤患者红细胞免疫功能的测定

为观察膀胱肿瘤患者红细胞免疫功能状况，对４８例膀胱肿瘤患者施行红细胞免疫功能测定。结果红细胞Ｃ３ｂ受体花环率（ＲＢＣ·Ｃ３ｂＲ）较正常组降低，红细胞免疫复合物（ＲＢＣ·ＩＣＲ）升高（Ｐ＜０．０５）；自然肿瘤红细胞花环率（ＮＴＥＲ）、直向肿瘤红细胞花环率（ＤＴＥＲ）、促肿瘤红细胞花环率（ＥＴＥＲ）和协同肿瘤红细胞花环率（ＡＴＥＲ）较正常组明显降低（Ｐ＜０．０１）；膀胱肿瘤患者病理分级、分期之间红细胞免疫功能检测无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。提示膀胱肿瘤患者红细胞免疫功能低下。

膀胱移行细胞癌组织bcl-2及P53基因表达的临床意义

目的 研究抑凋亡基因ｂｃｌ－ ２ 和Ｐ５３ 表达与膀胱移行细胞癌间的关系。方法 采用免疫组化ＳＰ法观察７５ 例膀胱癌组织中ｂｃｌ－ ２ 基因产物和突变型Ｐ５３ 蛋白表达。结果 ｂｃｌ－ ２ 和Ｐ５３ 蛋白阳性表达率分别为４０ ％ 和４４ ％ ，ｂｃｌ－２ 和Ｐ５３ 阳性率与肿瘤侵袭性和淋巴结及远处转移有密切的关系（ Ｐ＜ ０ ．０５） ，但与组织学分级无明显关系（ Ｐ＞ ０ ．０５） 。结论 结果提示，ｂｃｌ－ ２ 与Ｐ５３ 表达在膀胱癌发生中可能起协同作用，ｂｃｌ－ ２ 可作为评估肿瘤恶性程度、侵袭性和转移的重要参考指标之一。

膀胱肿瘤细胞的DNA含量定量分析

肿瘤细胞的脱氧核糖核酸(DNA)含量定量分析是现代细胞动力学研究中迅速发展起来的一项新的检测技术,近十年来,已在肿瘤学的临床和基础研究中广泛应用。它可为肿瘤细胞生物学特性作出客观的量化指标,是对临床病理手段的补充和完善,对肿瘤的诊断、治疗和预后判断提供了新的途径。下面就此项技术应用于膀胱肿瘤的现状作一综述。1 DNA含量定量分析的检测方法主要检测方法有两种:一种是静态细胞测量技术,其中有显微分光光度计、显微荧光光度计和扫描显微分光光度计。此法以切片及将单细胞悬液制备成涂片或组织印片为检测样品,常用Feulgen染色或荧光染色。

逆转录病毒载体介导人GM-CSF基因在膀胱癌细胞株的转移和表达

本文报道制备转基因膀胱癌瘤细胞疫苗的可行性。将ＣＭＶ启动子片段和人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）ｃＤＮＡ，克隆进逆转录病毒载体Ｎ２Ａ，构建逆转录病毒表达载体Ｎ２Ａ／ＣＭＶ／ＧＭ—ＣＳＦ，经Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ包装并转染包装细胞，获得重组逆转录病毒。选择较高滴度的重组病毒（滴度为１×１０￣５～２×１０￣６ＣＦＵ／ｍｌ）感染人膀胱癌细胞株ＢＩＵ—８７，经Ｇ４１８筛选出转基因瘤细胞株ＢＩＵ￣Ｒ。ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测证实ＧＭ—ＣＳＦ基因已整合到其ＤＮＡ上，ＲＴ—ＰＣＲ可检测到转基因细胞中ＧＭ—ＣＳＦ基因的表达。细胞培养上清经ＴＦ—１细胞检测，其ＧＭ—ＣＳＦ分泌量为０．７～７０．７ｎｇ／１０￣６细胞／２４小时。荧光免疫测定发现转基因瘤细胞表面有ＨＬＡ—Ⅰ、Ⅱ类抗原表达。转基因瘤细胞株经６０００ｒａｄＸ射线照射灭活，细胞逐渐死亡，但能持续分泌ＧＭ—ＣＳＦ达两周以上。初步动物试验结果表明，转ＧＭ—ＣＳＦ基因的瘤细胞疫苗具有明显的抑制肿瘤生长的能力。

膀胱癌组织中癌基因ras和C－erbB－2蛋白产物的免疫组织化学研究

采用免疫组织化学ＡＢＣ方法检测５６例膀胱癌组织中的癌基因ｒａｓ和Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白产物，有３０例和１９例分别呈ｒａｓ和Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白产物表达阳性，ｒａｓ表达在分化较高、表浅性和非复发性肿瘤中高于分化较差、浸润性和复发性者，而Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白表达在高分级、浸润性和复发性肿瘤中较高。ｒａｓ和Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白产物表达与膀胱癌组织分级、临床分期和复发密切相关。

肥大细胞在膀胱癌局部免疫应答中的作用

我们用组织化学染色技术测定了30例膀胱移行上皮癌组织中肥大细胞和淋巴细胞的密度,结果表明:膀胱癌组织中肥大细胞和淋巴细胞均较正常膀胱粘膜明显增加,且浸润膀耽癌组织的肥大细胞数与淋巴细胞数呈明显的正相关。文中对肥大细胞抗肿瘤免疫机理进行了讨论。

特异性抗膀胱癌单克隆抗体对膀胱肿瘤的临床研究

采用一组特异性抗膀胱癌单克隆抗体MAb（T16、M344、T138、T43），以APAAP免疫细胞化学方法，对63例膀胱移行细胞癌及10例非肿瘤患者的膀胱冲洗液作了研究。T16在全部63份标本呈阳性。随着肿瘤分期、分级的升高，M344阳性率逐渐降低，T138及T43阳性率逐渐升高。此三种MAb与肿瘤复发也有一定的对应关系。尿细胞学与MAb联合应用，可弥补相互间的不足，使肿瘤检出率进一步提高。结果表明：M344、T138及T43MAb的阳性表达与肿瘤的分期、分级及预后密切相关，可作为膀胱肿瘤恶性程度、复发及早期诊断的估价指标。

p53基因在人膀胱肿瘤中的突变

为了研究ｐ５３基因突变与人膀胱肿瘤之间的关系，应用免疫组化结合图像分析对５８例膀胱肿瘤标本进行检测。结果发现突变后的ｐ５３蛋白阳性率为２７．６％。显色主要定位在细胞核上（８７．５％），少部分在胞浆内（１２．５％）。它的阳性率在肿瘤的病理分级，临床分期及预后等方面差异显著（Ｐ＜０．０５）。结果提示，ｐ５３基因突变与人膀胱肿瘤生物学行为之间关系密切，是判断膀胱肿瘤恶性程度及预后的一项重要指标。

膀胱癌不同部位AgNOR分布及核形态计量研究

膀胱癌为泌尿系统的常见恶性肿瘤,目前其生物学行为与临床治疗及预后的关系研究甚少.本文应用核仁组成区嗜银蛋白染色(AgNOR)技术和图像分析技术,对我院膀胱移行上皮癌部分切除和全切除的20例标本作成大切片,经AgNOR染色后分别对Ⅰ肿瘤表面、Ⅱ肿瘤基底部(肿瘤与膀胱壁相连处)、Ⅲ肿瘤浸润底部,进行细胞核内Ag-NOR颗粒数、形态、大小及分布以及四个核参数:核面积NA、核仁面积NrA、核仁面积/核面积NA/NrA,核形状因子NsF的形态计量观察.

抗膀胱癌单克隆抗体的研究进展

单克隆抗体已问世近20年,现有抗癌单抗的特性限制了它的应用。本文以抗膀胱癌单抗为例讨论制备更理想抗癌单抗的可行性方法、应用过程中如何弥补不足和基因工程抗体的一般概念。

免疫抑制酸性蛋白在BBN诱导小鼠膀胱癌变组织中表达的动态观察

作者用０．５ｇ／ＬＮ－ｂｕｔｙｌ－Ｎ－（４－ｈｙｄｒｏｘｙｂｕｔｙｌ）ｎｉｔｒｏｓａｍｉｎｅ（ＢＢＮ）诱导ＩＣＲ小鼠膀胱癌变，１０周后又用０．４ｇ／Ｌ的丝裂霉素行膀胱灌注，在光镜及电镜下观察膀胱移行上皮细胞转化与转归的变化。然后用与长臂活化生物素结合的抗免疫抑制酸性蛋白（ＩＡＰ）单抗及双ＡＢＣ免疫组化法研究ＩＡＰ在小鼠膀胱癌变组织中的动态表达，结果：正常小鼠膀胱移行上皮染色阴性，癌变的膀胱上皮染色阳性，并随癌肿的抑制而消退。