卵巢癌患者血清及腹水白细胞介素6测定的临床意义

选择未接受治疗的原发性卵巢上皮癌３３例、良性卵巢上皮肿瘤１２例及正常妇女行输卵管吻合术者１０例作为研究对象，采用ＩＬ－６依赖性细胞株ＭＨ６０－ＢＳＦ２增殖反应ＭＴＴ法测定血清及腹水（或腹腔液）中ＩＬ－６水平。结果表明，卵巢癌患者血清及腹水中ＩＬ－６水平明显高于良性卵巢上皮肿瘤及正常对照组，临床晚期（Ⅲ－Ⅳ）者ＩＬ－６水平明显高于临床早期（Ⅰ－Ⅱ）者，但良性组与正常对照组之间无差异，提示ＩＬ－６水平的检测有助于卵巢癌的早期诊断、鉴别诊断及判断治疗效应，卵巢癌患者腹水中高水平的ＩＬ－６与卵巢癌细胞的增殖与转移有关。

卵巢肿瘤患者红细胞免疫功能及超氧化物歧化酶的初步研究

对２２例正常妇女、２３例卵巢恶性肿瘤患者和２７例卵巢良性肿瘤患者进行红细胞Ｃ３ｂ受体花环率（ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲ）、红细胞免疫复合物花环率（ＲＩＣＲ）、红细胞肿瘤花环率（ＲＢＣ－ＣａＲ）和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性的测定。结果表明：卵巢恶性肿瘤组ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲ和ＲＢＣ－ＣａＲ明显低于正常人和良性组（Ｐ＜０．０１），而ＲＩＣＲ较良性组上升（Ｐ＜０．００１），卵巢恶性肿瘤组ＳＯＤ活性亦明显低于正常人和良性组（Ｐ＜０．００１）。提示：卵巢恶性肿瘤患者的红细胞免疫功能低下，ＳＯＤ活性降低。本研究还对红细胞免疫和ＳＯＤ的相关性进行了分析和探讨。

以包涵体形式表达的6B11卵巢癌抗独特型单链抗体的复性、纯化和活性研究

目的：探讨以细菌胞浆内包涵体形式表达的６Ｂ１１卵巢癌抗独特型单链抗体（６Ｂ１１ｓｃＦｖ）的复性、纯化及其活性。方法：重组质粒ｐＬ６Ｂ１１ｓｃＦｖ转化大肠杆菌ｐｏｐ２１３６，温度诱导，以包涵体形式获高效表达。超声破碎细菌细胞得包涵体，用８ｍｏｌ·Ｌ－１尿素溶解包涵体后直接稀释复性，探讨复性条件并采用ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｌｏｗ离子交换层析纯化复性蛋白，ＳＤＳＰＡＧＥ分析蛋白纯度，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ、ＥＬＩＳＡ及竞争抑制ＥＬＩＳＡ测活性。结果：复性蛋白质经纯化，纯度达９５％以上。当氧化型谷胱甘肽（ＧＳＳＧ）浓度为５ｍｍｏｌ·Ｌ－１，还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）浓度为０．５ｍｍｏｌ·Ｌ－１，１０℃复性４８ｈ以上时，复性率较高。纯化后的表达蛋白６Ｂ１１ｓｃＦｖ能与ＨＲＰＣＯＣ１６６９卵巢癌单抗反应并与卵巢癌抗原共同竞争结合卵巢癌单抗ＣＯＣ１６６９，抑制率达６７％，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ显示其相对分子质量为２８×１０４，证明纯化后的表达蛋白质，能模拟卵巢癌抗原与卵巢癌单抗特异结合。结论：以包涵体表达的６Ｂ１１ｓｃＦｖ，经溶解复性纯化后，纯度高，活性好。

铁蛋白和癌胚抗原在卵巢肿瘤中的免疫组化研究

本文用双PAP法对124例卵巢交界性和恶性肿瘤组织以及胎儿卵巢进行铁蛋白(FE)和癌胚抗原(CEA)研究。FE阳性率76.61％,其中生殖细胞肿瘤阳性率最高,91.18％。FE主要存在于肿瘤细胞内。上皮性肿瘤分化愈差,FE含量愈多,呈显著正相关。在胎儿卵巢组织中,FE出现于表面生发上皮、卵原细胞、前颗粒细胞和间质细胞,而生育期卵巢FE阴性。提示:FE的分布与卵巢肿瘤组织学类型及分化程度有关,FE可作为卵巢肿瘤标记物;卵巢肿瘤与胎儿卵巢组织具有相似的合成FE的功能。FE和CEA二者结合阳性率达88.16％。

卵巢浆、粘液性囊腺癌增殖细胞核抗原表达的研究

目的：研究卵巢浆、粘液性囊腺癌增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达及其临床病理意义。方法：应用ＰＣＮＡ的单克隆抗体ＰＣ１０，以ＡＢＣ免疫组织化学方法，对５０份卵巢浆液性囊腺癌、１８份卵巢粘液性囊腺癌和５份正常卵巢组织的石蜡标本作ＰＣＮＡ表达的检测，并根据其阳性细胞率评分。结果：卵巢浆液性囊腺癌ＰＣＮＡ阳性细胞率评分高于卵巢粘液性囊腺癌；组织学分化程度越低，ＰＣＮＡ阳性细胞率评分越高；临床分期越晚，ＰＣ－ＮＡ阳性细胞率评分越高；伴有淋巴转移者ＰＣＮＡ阳性细胞率评分高于无淋巴转移者；ＰＣＮＡ表达为强级的患者５ａ生存率明显低于ＰＣＮＡ表达为弱级者；差异均有显著性。结论：ＰＣＮＡ免疫组化检测可作为预测卵巢浆、粘液性囊腺癌淋巴转移和患者预后的重要参考指标。

卵巢癌抗独特型抗体/hGM-CSF融合蛋白质对体外免疫细胞的刺激作用

目的：探讨卵巢癌抗独特型单链抗体６Ｂ１１ｓｃＦｖ／ｈＧＭＣＳＦ融合蛋白质（６Ｂ１１ＧＭ）作为肿瘤疫苗的可能性。方法：采用体外Ｔ细胞增殖试验，对６Ｂ１１ＧＭ刺激Ｔ细胞的能力进行测定，并用流式细胞仪对Ｔ细胞表型及ＡＰＣＭＨＣⅡ表达情况进行测定，测定了外周血单个核细胞经６Ｂ１１ＧＭ激活后对卵巢癌细胞系的非ＭＨＣ限制的杀伤活性。结果：６Ｂ１１ＧＭ及６Ｂ１１均能引起特异的Ｔ细胞增殖，但６Ｂ１１ＧＭ组的增殖明显高于６Ｂ１１组，以ＣＤ４＋增殖为主。６Ｂ１１ＧＭ能明显增加抗原提呈细胞（ａｎｔｉｇｅｎｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇｃｅｌ，ＡＰＣ）的ＭＨＣⅡ表达，使ＡＰＣ更有效地摄取抗原，激活非ＭＨＣ限制的杀伤活性。结论：６Ｂ１１ＧＭ能引起细胞免疫反应。

GST-π类同工酶基因在卵巢癌组织中的表达及其与癌变的关系

目的:检测GST- π基因在卵巢癌组织中的表达,探讨GST- π与卵巢癌癌变的关系。方法:采用免疫组化和RT- PCR 方法,检测正常卵巢及卵巢良、恶性肿瘤组织中GST- π m RNA 及蛋白水平的变化。结果:GST-π在卵巢组织中的表达与肿瘤的进展密切相关,即正常组织中GST- π几乎不表达,良性肿瘤中水平略有升高,交界性肿瘤多为低、中度表达,但阳性率明显升高,接近卵巢癌组织的水平。癌变组织则为中、高度表达且随临床分期的发展而逐渐增高。免疫组化与RT- PCR 的结果符合率较高,但以RT- PCR 法较为灵敏。结论:GST- π是与卵巢癌发生、发展密切相关的标志酶,它的表达异常与卵巢癌的预后有关。

卵黄囊瘤卵黄囊分化的形态学特征及其与血清AFP的关系

本文报道100例卵黄囊瘤免疫组化标记,并与16例患者血清AFP水平相比较。结果表明,脏层卵黄囊分化(88例)AFP阳性,且与血清AFP升高相关;而壁层卵黄囊分化(92例)Laminin基膜样物质阳性。血清AFP测定有助于本瘤术前诊断、术后随访和预后估价。

人体正常卵巢和卵巢恶性肿瘤雌激素及孕激素受体5年研究总结

用葡聚糖—活性炭单点饱和分析法测定261例正常卵巢组织,148例卵巢恶性肿瘤组织胞浆雌激素受体和孕激素受体(ER.PR)。结果表明,正常卵巢组织ER和PR均值和阳性率均高于恶性卵巢肿瘤组织。卵巢恶性病变中,性腺间质类ER和PR含量均高于上皮性肿瘤.生殖细胞源性肿瘤和转移性癌。上皮性恶性肿瘤中,内膜样癌的ER和PR含量高于浆液性,粘液性及透明细胞癌。提示受体含量高者有用内分泌治疗的可能和推测有转好的预后。卵巢恶性肿瘤患者临床分期及月经状况与其ER阳性率有关,而与PR阳性率无关。

卵巢恶性肿瘤雌激素受体及孕激素受体的研究

应用酶联雌二醇(E_2—HRP)和酶联孕酮(Pg—HRP)亲和组化法检测卵巢恶性肿瘤雌激素受体(ER)和孕激素受体(PgR)45例,结果ER阳性35例,PgR阳性33例,其阳性检出率依次为77％和73％.不同类型肿瘤的受体水平有差异,上皮性癌肿的阳性检出率较转移癌高.检测结果显示:肿瘤分化越好,受体水平也越高.早期癌比晚期癌的ER、PgR受体水年高.受体阳性者术后加用他莫西芬(Tamoxifen)联合化疗治疗,其生存时间较阴性者长,复发亦晚.提示ER、PgR水平高低可作为选择内分泌治疗和预测病人预后的参考指标.

卵巢浆液性肿瘤槐凝集素受体的研究

我们以SJA(槐凝素)为探针,应用亲和组织化学技术,对卵巢浆液性肿瘤细胞膜表面相应糖蛋白进行检测,以探讨肿瘤形态学改变与SJA受体的关系。以期发现这些变化在卵巢浆液性肿瘤的分化、分型以及诊断和鉴别诊断中的意义。1材料和方法1.1材料病理诊断的卵巢浆液性肿瘤60例。10％的福尔马林固定,常规石蜡包埋,5μm切片。1.2方法参照许氏ABC法进行亲和组化染色,SJA(槐凝集素)稀释浓度10μg/ml。

卵巢肿瘤中pl6抑癌基因的表达及意义

目的：研究抑癌基因ｐｌ６与卵巢肿瘤发生与发展的关系。方法：用免疫组化ＡＢＣ法检测了３８例卵巢癌、２２例良性或交界性卵巢肿瘤及１２例正常卵巢组织中抑癌基因ｐ１６的表达情况。结果：ｐｌ６在恶性卵巢肿瘤中检出率为（７．８９％），明显低于良性肿瘤（６０％，Ｐ＜０．０１）、交界性肿瘤（６６．６７％，（Ｐ＜０．０１）及正常卵巢组织（８３．３％，Ｐ＜０．０１），在肿瘤分化差、恶性程度高及复发和死亡的病例中未检出ｐ１６阳性者。结论：ｐ１６作为一种新型的抑癌基因，它的突变与缺失可能与卵巢恶性肿瘤的发生发展密切相关（ｒ＝－０．９０５２，Ｐ＜０．０５）。

化疗对晚期卵巢上皮性癌病人细胞免疫功能的影响

对22例晚期卵巢上皮性癌病人化疗前后的细胞免疫功能进行了测定,发现与正常人相比,卵巢癌病人化疗前CD_8细胞明显增多,CD_4/CD_8比值及NK活性明显低下;化疗后,各项指标均有显著性改变。

卵巢癌抗独特型单链抗体诱导特异性体液免疫应答的动物实验研究

目的：用卵巢癌抗独特型单链抗体６Ｂ１１ｓｃＦｖ代替肿瘤抗原免疫动物，观察是否诱导动物产生特异性体液免疫反应。方法：将６Ｂ１１ｓｃＦｖ交联钥孔虫戚虫血蓝素，辅以弗氏佐剂反复免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，制备抗血清。采用间接法ＥＬＩＳＡ，竞争抑制ＥＬＩＳＡ及免疫流式细胞法分析抗血清特性。结果：经ＥＬＩＳＡ检测显示，由６Ｂ１１ｓｃＦｖ刺激产生的抗抗独特型单链抗体（Ａｂ３）能与６Ｂ１１ｓｃＦｖ和卵巢癌组织抗原ＯＣ１６６９特异性结合。竞争抑制ＥＬＩＳＡ表明，Ａｂ３能有效抑制卵巢癌单抗ＣＯＣ１６６９（Ａｂ１）与ＯＣ１６６９的特异性结合。免疫流式分析结果可见，Ａｂ３能与表达卵巢癌抗原的人卵巢癌细胞系ＯＶ１细胞表面结合而不能与无卵巢癌抗原表达的人宫颈癌细胞系ＨｅＬａ细胞表面结合。从以上结果可以证明Ａｂ３与Ａｂ１的抗原结合特性相同。结论：６Ｂ１１ｓｃＦｖ能代替卵巢癌抗原诱导动物产生特异性体液免疫反应，具有模拟抗原的作用。

卵巢上皮性肿瘤中PCNA和P53蛋白表达的相关性研究

目的：研究卵巢上皮性肿瘤中ＰＣＮＡ和Ｐ５３蛋白表达的相关性。方法：应用免疫组化ＡＢＣ法检测了１０份正常卵巢，２１份卵巢腺瘤，１０份卵巢交界瘤，４０份卵巢癌的系列组织中ＰＣＮＡ及Ｐ５３蛋白的表达。所得结果除计算阳性率外，并用标记指数表示。结果：Ｐ５３蛋白表达阳性或阴性两组间的ＰＣＮＡ标记指数差异无显著性（Ｐ＞０．１０），Ｐ５３标记指数与ＰＣＮＡ标记指数呈直线正相关（ｒ＝０．６８２２，Ｐ＜０．００１～０．００２）。结论：Ｐ５３蛋白表达与否与细胞增殖活性间的关系不明显，对细胞增殖周期的调控还存在非Ｐ５３依赖型途径，但Ｐ５３标记指数与ＰＣＮＡ标记指数间呈显著正相关。

卵巢恶性肿瘤腹水的免疫抑制作用与免疫功能关系探讨

卵巢恶性肿瘤腹水的免疫抑制作用与免疫功能关系探讨５１００１０广州广州军区广州总医院周龙书中国图书资料分类号Ｒ７１１．７５许多文献报道卵巢恶性肿瘤患者免疫功能低下，但导致其免疫功能低下的原因尚未阐明。本研究检测患者腹水对ＮＫ细胞活性及淋巴细胞增殖的作用...

Brenner瘤细胞分化的凝集素受体标记

研究７种生物素化的凝集素对卵巢Ｂｒｅｎｎｅｒ瘤不同分化方向和分化性质瘤细胞的标记特点。麦胚素（ＷＧＡ）、花生素（ＰＮＡ）受体在癌细胞呈顶浆型表达是瘤细胞向腺上皮分化的标志；双花扁豆素（ＤＢＡ）受体瘤细胞膜阳性显示其向鳞状上皮分化倾向；ＷＧＡ、ＰＮＡ、兀鹰素（ＢＳ－１）和刀豆素（ＣｏｎＡ）在瘤细胞浆内弥漫性结合增强表明Ｂｒｅｎｎｅｒ瘤由良性、增生性向恶性转化。凝集素受体表达差异可做为Ｂｒｅｎｎｅｒ瘤细胞的分化标志，体现该瘤上皮成分分化、失分化、部分分化和多向分化的复杂状况。

卵巢上皮性肿瘤雌孕激素受体的单克隆抗体免疫组化研究

利用抗雌激素受体（ＥＲ）和孕激素受体（ＰＲ）的两种单克隆抗体对３１例卵巢上皮性肿瘤新鲜冰冻标本进行ＡＢＣ法测定，ＥＲ、ＰＲ的阳性表达率分别为４５．２％和４８．４％，恶性肿瘤ＥＲ的含量高于良性者，ＰＲ在良、恶性肿瘤间未见有明显差异。提示：部分卵巢上皮性肿瘤属于激素依赖性肿瘤，对晚期卵巢癌可试用激素疗法。ＥＲ、ＰＲ在宫内膜样癌和浆液性癌的含量高于其它类型上皮性肿瘤，高分化者受体阳性率及含量高于低分化者；ＥＲ或ＰＲＦ阳性者预后好于阴性者，二者具独立的预后因素，且ＥＲ、ＰＲ双阳性者预后比ＥＲ阳性、ＰＲ阴性或ＥＲ阴性、ＰＲ阳性者好。

PCNA与C-myc蛋白在卵巢上皮癌中的表达及临床意义

为探讨增殖细胞抗原（PCNA）及C－myc蛋白在卵巢上皮癌中的表达及临床意义，应用SABC免疫组织化学方法，对32例卵巢上皮癌、10例卵巢上皮瘤和6例正常卵巢组织的石蜡标本作PCNA和C－myc蛋白的检测，并分析卵巢上皮癌的临床病理资料。结果表明，正常卵巢组织、卵巢良性病变组织到卵巢上皮癌PCNA和C－myc蛋白的表达呈增高趋势；PCNA增殖指数与卵巢上皮癌临床分期、组织学分级高度负相关，与预后有关但不具统计学意义；C－myc蛋白表达与卵巢上皮癌的临床分期、预后无关，与组织学分级高度负相关。在卵巢上皮癌中，C－myc蛋白阳性表达与PCNA大量出现有极大相关性。说明C－myc蛋白检测可能不会成为早期诊断卵巢癌的方法。检测PCNA及C－myc蛋白可以估计卵巢上皮癌患者的预后，辅助指导临床化疗。

卵巢癌抗独特型单链抗体6B11scFv/hGM-CSF融合蛋白质的表达及活性测定

目的：为提高卵巢癌抗独特型抗体的免疫原性，构建表达６Ｂ１１ｓｃＦｖ／ｈＧＭＣＳＦ融合蛋白质，并对其活性进行测定。方法：用ＤＮＡ重组技术，将以前构建的６Ｂ１１ｓｃＦｖＬｉｎｋｅｒｈＧＭＣＳＦ融合基因克隆至ｐＥＴ１６（ａ＋）表达载体，表达可溶蛋白质。用ＥＬＩＳＡ分析技术和细胞增殖试验测定融合蛋白质的抗体和细胞因子活性。结果：融合蛋白质实现可溶表达，能与ＣＯＣ１６６９单抗和小鼠抗人ＧＭＣＳＦ单抗特异结合，并能刺激ＧＭＣＳＦ依赖株增殖。结论：融合蛋白质保留了２种蛋白质的活性。