骨肉瘤碱性纤维生长因子、转化生长因子β_1及其受体表达与血管生成的关系

目的：研究碱性纤维生长因子（bFGF）、转化生长因子－β1（TGF－β1）及其受体在骨肉瘤中的表达特点，以及它们与肿瘤内微血管密度和病人预后的关系。方法：应用免疫组化和形态计量检测80例骨肉瘤微血管密度（MVD），bFGF、TCF－β1及其受体的表达，并应用COX比例风险模型检测上述因素与预后的关系。结果：80例骨肉瘤中，bFGF／FGFr阳性46例（57．5％），TGF－β1／TGFβ（RI）阳性31例（38．8％）。bFGF、TGF－β1与其受体表达具有一致性，并且与MVD值显著相关。COX比例风险模型分析结果显示MVD和bFGF、TGF－β1均是影响骨肉瘤的重要因素（P＜0．05）。结论:bFGF和TGF－β1是骨肉瘤血管生成的重要因子，并通过促进血管生成影响病人的预后，可能成为判估骨肉瘤病人预后的重要指标.

骨纤维结构不良和骨化性纤维瘤的组织病理及免疫组化研究

对140例骨纤维结构不良和70例骨化性纤维瘤的临床资料及组织病理进行了复习,其中对近期病例中各15例的组织。作了6种有关的免疫组化染色进行观察。本文对骨纤维结构不良和骨化性纤维瘤的诊断、鉴别诊断及其病变的性质进行了讨论。还对6种免疫组化染色在显示某些组织成分,特别对骨连结蛋白在显示骨母细胞及新生骨质的意义作了探讨。

瘤样钙质沉着症病理及免疫组化研究

瘤样钙质沉着症系病因不明的罕见病症,Duret于1899年论述,称内皮钙化。1943年Inlan命名瘤样钙质沉着症。文献可查者不过数十例。我院1987年10月～1991年3月收治2例。例1,男,53岁。右大腿外上方肿块,渐增大伴胀痛及腰酸痛3年。体检:右股外上方可及15cm×10cm×5cm肿块,境界清楚,轻度压痛,能推移,稍有囊性感,腰椎明显后凸畸形,活动受限。X线片示右股外上方软组织内有18cm×10cm×10cm块影,内见钙化影,

骨巨细胞瘤细胞核DNA含量的流式分析

本文用流式细胞分析术(FCM)对35例骨巨细胞瘤(GCT)细胞核DNA含量进行了分析。结果是所有Ⅰ级和29.4％的Ⅰ级GCT的DNA含量为正常倍体,另70.6％的Ⅰ级和所有Ⅰ级GCT为异倍体,并有双DNA干系出现。还研究了DNA含量与GCT组织学分级和临床预后的关系:41.6％的异倍体Ⅰ级GCT术后复发或浸润周围组织。细胞周期分析表明异倍体肿瘤的S期和G_2^(+M)期细胞数比正常倍体肿瘤的多。本研究表明用FCM分析细胞核DNA含量能客观地反映肿瘤的生物学行为,提示临床预后。不论病理分级如何,良性和低度恶性的GCT为2倍体或近2倍体,中度恶性的为低倍性异倍体,高度恶性的为多倍体或双DNA干系。与病理分级相比,FCM可提供肿瘤生物学行为、预后等方面的重要信息。

股骨近端纤维结构不良的手术治疗

目的:通过对股骨近端纤维结构不良病例进行回顾性研究,总结肿瘤学和功能学结果,探讨其治疗方法及效果。方法:2007年4月至2009年1月,收治15例股骨近端纤维结构不良患者,男9例,女6例;年龄16～32岁,平均25岁;单侧病变12例,双侧病变3例;单骨型12例,多骨型3例;病程2个月～16年,平均2年。股骨近端纤维结构不良伴髋内翻2例,颈干角分别为80°和100°,股骨长度较对侧短缩分别为5cm和3cm。所有患者采用病灶刮除、打压植骨(同种异体人工骨和/或自体髂骨)、内固定治疗,其中2例牧羊拐畸形者采用外翻截骨矫形术。结果:所有患者获随访,时间12～32个月,2例股骨近端牧羊拐畸形患者经截骨矫形后畸形矫正,颈干角恢复,股骨长度延长分别为4cm和3cm,术后4个月扶双拐下地行走。所有患者术后病变无复发及内固定物松动,植骨区术后3个月可见局部骨吸收,术后8～12个月植骨区骨愈合,疼痛消失,步态正常。结论:彻底刮除病灶、植骨及有效内固定是治疗股骨近端纤维结构不良的有效方法,对伴有牧羊拐畸形者应同时行外翻截骨以恢复髋关节功能。

骨肉瘤血管内皮生长因子表达与肿瘤血管生成及预后的关系

目的：研究血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）表达与骨肉瘤血管生成和预后的关系。方法：应用免疫组化和形态计量方法，检测８０例骨肉瘤ＶＥＧＦ表达和肿瘤微血管密度。结果：骨肉瘤ＶＥＧＦ表达（－）级者６例，（±）级者１０例，（＋）级者２２例，（＋＋）级者４２例。ＶＥＧＦ表达与肿瘤体积、Ｄａｈｌｉｎ＇ｓ分型和Ｐｒｉｃｅ＇ｓ分级无关，但与肿瘤微血管密度计数相关（Ｐ＜００５）。ＶＥＧＦ高表达组（＋＋）级多见于骨样组织幼稚型（Ｐ＜００１），而且其生存率明显低于ＶＥＧＦ低表达组。结论：ＶＥＧＦ是骨肉瘤重要的血管生成因子，其表达可能是估价骨肉瘤预后的一项有价值的指标。

人骨肉瘤细胞系OS-9901的建立及其生物学特性

建立人骨肉瘤细胞系，为骨肉瘤研究提供新的实验模型．方法：取经病理证实的新鲜骨肉瘤手术标本，进行体外原代组织快培养．对存活细胞进行形态学观察、组织化学染色、细胞周期检查、核型分析、电镜观察和异种移植等．结果：建成细胞系OS－99o1，其形态学表现、组化染色、电镜观察和异种移植等均符合骨肉瘤细胞特征．经半年多体外培养，已连续传代7O余次．细胞倍增时间为33h，细胞周期测定：GI期6o．2％、GZ期17．3％、S期22．6％．染色体具有亚三倍体核型，众数为62～65条．异种移植成瘤率IOo％，无支原体污染．结论：OS－99o1是一株人骨肉瘤细胞系。

mdm2与p53在骨骼肌恶性肿瘤中的改变及其临床意义

目的 探讨 mdm2与 p5 3基因在骨骼肌恶性肿瘤中的改变及其临床意义 .方法 采用 RNA打点杂交技术分析2 0例骨骼肌恶性肿瘤中的 mdm2与 p5 3基因的表达水平 ,采用 PCR- SSCP技术分析 p5 3基因的突变情况 ,结合随访结果 ,分析其临床意义 .结果 1RNA打点杂交结果 :mdm2基因在 10例恶性肿瘤标本中呈高表达 ,在 8例肿瘤标本与 2 0例瘤旁组织标本中呈低表达 ,mdm2的表达在骨骼肌恶性肿瘤中显著高于瘤旁组织 (P<0 .0 1) ;p5 3基因在 12例骨骼肌肿瘤标本中呈高表达 ,在相应瘤旁组织中呈低表达 ,两者之间存在显著性差异 (P<0 .0 1) ;2 PCR- SSCP未检出 mdm 2基因突变 ,检出 9例肿瘤标本中存在 p5 3基因突变 ;33a随访结果 :9例p5 3突变患者 ,3例死于术后 0 .5 a,4例死于术后 1a,2例死于术后 1.5 a,11例无 p5 3突变患者 ,6例死于术后 2 a,1例死于术后 3a,4例 3a后尚存活 .结论 mdm2基因以高表达方式 ,p5 3以突变、高表达方式参与骨骼肌恶性肿瘤发生发展 ,检测 mdm2有无高表达与 p5 3有无异常可辅助判断运动系统肿瘤患者的预后 .

骨肉瘤VEGF、bFGF,TGF-β_1和TAF表达及其与血管生成的关系

目的：研究血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）、碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）、转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）及其受体和肿瘤源性粘附因子（ＴＡＦ）在骨肉瘤中的表达特点，以及它们与肿瘤内微血管密度和病人预后的关系。方法：应用免疫组化和形态计量检测８０例骨肉瘤微血管密度（ＭＶＤ），ＶＥＧＦ、ｂＦＧＦ、ＴＧＦ－β１及其受体和ＴＡＦ的表达，并应用ＣＯＸ比例风险模型检测上述因素和预后的关系。结果：８０例骨肉瘤中，ＶＥＧＦ／ＫＤＲ强阳性４２例（５２．５％），ｂＦＧＦ／ｂＦＧＦｒ阳性４６例（５７．５），ＴＧＦβ１／ＴＧＦβ（ＲＩ）阳性３１例（３８．８％），ＴＡＦ阳性３６例（４５％）。血管生成因子与其受体表达具有一致性，并与ＭＶＤ值显著相关。ＣＯＸ比例风险模型分析结果显示ＭＶＤ和ＶＥＧＦ是影响骨肉瘤的重要因素（Ｐ＜０．０５）。结论：ＶＥＧＦ、ｂＦＧＦ、ＦＧＦ－β１和ＴＡＦ是骨肉瘤血管生成的重要因子，并通过促进血管生成影响病人的预后。其中ＭＶＤ和ＶＥＧＦ是评估骨肉瘤病人预后的重要指标。

具有肺转移特性的人骨肉瘤细胞系PL-1的建立及其生物学特性观察

建立一株人源性骨肉瘤细胞系并进行生物学测定 ,为骨肉瘤研究提供良好的实验模型。无菌切取骨肉瘤手术标本 ,于裸鼠表面包埋接种成功后移植瘤标本体外培养得到细胞株 ,应用形态学观察、流式细胞仪、生长曲线测定、肿瘤标志物测定等方法进行生物学特性研究。结果建立了一株具有肺转移特性的人源性骨肉瘤细胞系PL 1,其成瘤率为 10 0 % ,潜伏期为 12天 ,肺转移率为 10 0 % ;取其 32代细胞进行生物学特性测定 ,发现其形态结构、排列方式、分化程度与原发瘤保持一致 ,染色体形态为人类核型 ,众数在 6 4～ 6 6之间 ,流式细胞仪检测G1期细胞为 5 2 1% ,碱性磷酸酶及骨形成蛋白抗体免疫组化染色为阳性。说明应用裸鼠体内移植建立的人骨肉瘤细胞系PL 1与原发瘤保持相同的生物学特性 ,为一个稳定的细胞系。

正常骨和骨肿瘤组织雌激素受体分析

用葡聚糖—活性炭Scatchard作图法测定15例不同骨恶性肿瘤组织(其中转移性骨肿瘤3例)及13例正常对照骨组织胞浆的雌激素受体(ER)含量和亲和常数。结果显示,ER平均含量正常对照组(15.12±14.68fmol/mg蛋白)高于骨恶性肿瘤组织(8.04±6.71fmol/mg蛋白)(P<0.05)。ER亲和常数正常对照组(39.91±20.13×10^(-11)mol/L)高于骨恶性肿瘤组织(18.46±27.10×10^(-11)mol/L)(P<0.025)。ER阳性率在正常对照组织(23.1％)和恶性骨肿瘤组织(26.7％)无明显差别(P>0.05)。本研究表明,骨组织中胞浆ER含量及亲和力变化可能与肿瘤的发生有关;骨恶性肿瘤组织胞浆受体含量降低,而亲和力增加,提示该组织甾体激素受体系统功能的改变或损害。

骨肉瘤p53蛋白过度表达与微血管密度的关系

目的：研究骨肉瘤ｐ５３蛋白过度表达与肿瘤内微血管密度（ＭＶＤ）的关系，以及它们对骨肉瘤预后的影响。方法：应用免疫组化和形态计量的方法检测８０例骨肉瘤ｐ５３蛋白表达以及ＭＶＤ计数。结果：ｐ５３蛋白过度表达与ＭＶＤ密切相关，而且两者均为影响骨肉瘤预后的重要因素，依相对危险度大小依次为ｐ５３＞ＭＶＤ。结论：结果证实ｐ５３基因对ＭＶＤ有调节作用，ｐ５３蛋白过度表达是肿瘤重要的血管生成表型之一。ｐ５３蛋白和ＭＶＤ是判估骨肉瘤预后有价值的生物学指标。

骨肉瘤细胞核因子кB免疫组化研究

细胞核因子ＮＦ－кＢ在肿瘤血管生成中可能具有核心调节作用，本文选择８０例有随访结果的骨肉瘤，应用免疫组化方法检测 ＮＦ－кＢ ｐ６５亚单位以及血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）的表达，同时观察肿瘤内微血管密度（ＭＶＤ），旨在探讨 ＮＦ－кＢ表达与骨肉瘤血管生成的关系。结果：８０例骨肉瘤中 ４８例 ＮＦ－кＢ ｐ６５阳性，阳性产物主要定位于肿瘤细胞浆。ＮＦ－кＢ表达与ＶＥＧＦ表达和ＭＶＤ呈显著正相关，而且ＮＦ－кＢ阳性组病人存活时间显著低于阴性组。该结果表明：①ＮＦ－кＢ ｐ６５是骨肉瘤相关的一种癌蛋白，在骨肉瘤的发生和发展中发挥重要的作用；②ＮＦ－кＢ对ＶＥＧＦ可能有正向调节作用，进而影响骨肉瘤血管生成；③ＮＦ－кＢ 对肿瘤血管生成的作用，可能是影响骨肉瘤预后的主要原因之一。

癌基因蛋白P^(21)、P^(185)、EGFR及LN、IV型胶原在骨肉瘤中的表达

目的探讨癌基因蛋白ｐ２１、ｐ１８５、ＥＧＦＲ及ＬＮ、ＩＶ型胶原在人骨肉瘤组织中表达的意义。方法应用免疫组化ＡＢＣ法，检测４０例常规石蜡包埋的骨肉瘤组织中ｐ２１、ｐ１８５和ＥＧＦＲ的表达，同时还检测了ＬＮ、ＩＶ型胶原在骨肉瘤组织中的含量。结果ｐ２１、ｐ１８５和ＥＧＦＲ在骨肉瘤组织中的阳性表达率分别为２６３％（１０／３８），６５８％（２５／３８），５００（１９／３８），同时观察到ＬＮ和ＩＶ型胶原在骨肉瘤组织中往往是缺如的。结论骨肉瘤组织中存在着多种癌基因的异常，它们与骨肉瘤的发生发展密切相关，同时细胞外基质的破坏在骨肉瘤的侵袭与转移中起着重要的作用。

抗人成骨肉瘤杂交瘤细胞系的建立及单克隆抗体特性

建立抗人成骨肉瘤单克隆抗体杂交瘤并对杂交瘤细胞及抗体特性进行研究．方法：利用我室自建的成骨肉瘤细胞系（OS－9607）免疫BALB八小鼠，取其脾细胞与骨髓瘤细胞SPZ／O融合，经筛选和克隆化，制备杂交瘤细胞系，用免疫组化ABC方法研究杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体特性．结果：制得2株能持续、稳定分泌抗体的杂交瘤细胞系．其中6E7和5D3株杂交瘤细胞经过100d连续培养，单克隆抗体6E7mAb和5D3mAb分泌稳定、特异性强、效价高．免疫组化检测结果发现，6E7mAb和5D3mAb相应抗原在成骨肉瘤组织及成骨肉瘤细胞系呈高度表达（SO％），1O种正常组织中未见阳性反应；中度以上梁色者占阳性总数的80％以上，6E7mAb主要分布于细胞核上，5D3mAb主要分布于细胞质内．结论：此2株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体具有成骨肉瘤细胞特异亲合性，它们的成功研制为发现新的成骨肉瘤生化标志、成骨肉瘤的早期诊断及免疫治疗提供了可能性．

骨巨细胞瘤细胞成分和细胞因子在溶骨中的作用

目的：探讨骨巨细胞瘤（ＧＣＴ）各细胞成分及肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）和白细胞介素１（ＩＬ１）细胞因子在骨吸收中的作用。方法：采用细胞分离技术和体外细胞溶骨模型，检测ＧＣＴ各细胞成分的骨吸收活性及ＴＮＦα和ＩＬ１对这种活性的影响。结果：在溶骨模型中，多核巨细胞（ＭＧＣ）的数目越多，４５Ｃａ２＋的释放也越多；纤维母细胞样基质细胞（ＦＣ）组的４５Ｃａ２＋值明显高于无细胞对照组（Ｐ＜０．０１），而与骨肉瘤细胞组比较，无显著差异；此外，ＦＣ的条件培养液能大大增强ＭＧＣ溶骨模型中４５Ｃａ２＋的释放（Ｐ＜０．０１）；原代单核基质细胞（ＳＣ）经ＴＮＦα处理后，其模型中４５Ｃａ２＋释放明显增高（Ｐ＜０．０１），而ＩＬ１未见类似作用。结论：在ＧＣＴ中，多核巨细胞具有直接溶骨的作用；纤维母细胞样基质细胞，除直接溶骨外，还可以分泌某种物质促进多核巨细胞的溶骨效应；ＴＮＦα能增强原代单核基质细胞的溶骨能力。

MDM2蛋白和P53蛋白在骨肉瘤组织中的表达及意义

目的探讨骨肉瘤MDM2和P53蛋白定位 ,表达水平 ,二者的相互关系及其对骨肉瘤转移及预后的影响。方法应用免疫组织化学链菌素亲生物素蛋白过氧化酶连接法(S P法) ,检测80例有随访资料的骨肉瘤MDM2和P53蛋白的表达 ,比较其与各病理指标之间的关系。结果①骨肉瘤组织MDM2蛋白总体阳性率为50 %(40/80) ,P53蛋白总体阳性率为40%(32/80) ;MDM2蛋白和P53蛋白的异常表达呈显著负相关(P<0.01)。②骨肉瘤MDM2和P53蛋白表达与年龄、性别、肿瘤大小、Price分级及Dahlin分型均无关 ,而与骨肉瘤WHO新分型有关(P<0.05) ,MDM2蛋白表达与肿瘤的复发或转移密切相关(P<0.05)。③生存资料分析显示 :MDM2或P53蛋白阳性表达组生存率明显低于阴性组(P<0.01) ;MDM2和P53蛋白同时阳性表达者生存率最低 ,而二者共同阴性者生存率最高 ,两组相差极为显著(P<0.005)。结论①MDM2蛋白检测可能应用于预测骨肉瘤有无复发或转移 ;②用免疫组化方法联合检测MDM2和P53蛋白表达可能成为评价骨肉瘤预后的一项有价值指标。

骨巨细胞瘤bcl-2,MDM2和nm23基因的表达意义

探讨骨巨细胞瘤bclZ，MDMZ及＂m23基因表达与其生物学行为间的关系．方法：采用免疫组织化学方法对98例存档骨巨细胞瘤标本进行了检测．结果：bC人2，MDMZ及＂m23基因在骨巨细胞瘤中均有表达，阳性率分别为56．l％，63．2％及55．1％；3种基因在骨巨细胞瘤1，刀，批级不同组织分级中均有表达，统计学表明小C人2表达在1级与刀，皿级之间有显著性差异（PwtO．o1），MDMZ阳性率在不同组织学分级组之间无显著性差异（P＞o．OS），＂m23在有或无局部侵袭或转移组之间阳性率有显著性差异（P＜o．OS）．结论：上述3种基因均参与了骨巨细胞瘤的发生发展过程，提示其生物学行为的多样性可能与多种基因的多种作用有关．

骨肿瘤患者LPO含量、SOD、GSH—PX活性变化及临床意义

随着对自由基医学的深入研究,许多实验证明脂质过氧化作用在致癌和癌生长过程中起着重要的作用,而超氧化物歧化酶(SOD),谷光甘肽过氧化物酶(GSH-PX)是生物体内重要的抗氧化酶,能够清除自由基及其衍生物,保护生物膜及细胞大分子结构的功能,与抑癌过程密切相关。作者通过对72例骨肿瘤、30例非瘤骨疾病患者血清脂质氧化物(LPO)含量和全血SOD。