下呼吸道铜绿假单胞菌血清分型及体外抗菌活性分析

目的了解临床下呼吸道感染标本中的铜绿假单胞菌的血清分型及耐药性。方法常规分离培养细菌,获纯培养后用VITEK微生物全自动分析仪或API系统鉴定到种;血清分型按试剂盒操作说明进行;药敏实验采用KB纸片扩散法,按NCCLS规定的标准进行;ESBLs检测采用表型确认法,AmpC酶检测采用三维实验确认法。结果75株铜绿假单胞菌分型率为89.3%,B型占57.3%,次为G型和E型分别为6.7%和5.3%;对11种抗菌药物的耐药率为:头孢曲松74.7%、阿洛西林45.5%、替卡西林克拉维酸58.7%、左氧氟沙星53.3%、哌拉西林56.6%、阿米卡星54.7%、头孢哌酮46.7%、亚胺培南西拉司丁42.6%、头孢吡肟33.3%、头孢他啶22.7%、头孢哌酮舒巴坦9.3%;产ESBLs的阳性率为38.7%,产AmpC的阳性率为14.7%。结论铜绿假单胞菌血清型以B型为主,次为G型和E型;该菌耐药现象日趋严重,对非产酶菌的治疗根据药敏实验结果可选用头孢吡肟、头孢他啶、头孢哌酮舒巴坦、亚胺培南西拉司丁,对产酶菌应与阿米卡星、左氧氟沙星等抗菌药物联用。

射干和马齿苋对46株绿脓杆菌体外抑菌试验的研究

目的 :探讨射干、马齿苋对绿脓杆菌 ( PA)的体外抑菌作用。方法 :取射干、马齿苋水煎剂对4 6株PA进行 MIC试验 ,统计 MIC50 和 MIC90 。结果 :射干水煎剂对 PA MIC范围为 31.2 5～ 3.90 g/ L,MIC50 为 7.81g/ L,MIC90 为 15.62 g/ L;马齿苋水煎剂对 PA MIC范围为 31.2 5～ 7.81g/ L,MIC50 为15.62 g/ L,MIC90 为 31.2 5g/ L。结论 :射干、马齿苋于体外对绿脓杆菌有较强抑制作用。

呼吸病区铜绿假单胞菌医院感染的流行病学研究

目的为了解铜绿假单胞菌医院感染的流行病学。方法用血清型和抗菌谱联合分型方法，对患者分离株和环境分离株从检出时间、地点或部位进行动态分析。结果２１２３份样本共检出铜绿假单胞菌１７６株，分离率为０．８％～５７．１％；患者之间、患者与环境及医护人员间检出的铜绿假单胞菌未见有关联。结论铜绿假单胞菌广泛存在于呼吸病房的患者及环境中；铜绿假单胞菌医院感染，外源性因素不是主要的，飞沫、空气不是ＰＡ院内肺炎传播途径。

铜绿假单胞菌Ⅵ型分泌系统和群体感应系统参与生物被膜形成

目的探讨铜绿假单胞菌中Ⅵ型分泌系统(T6SS)和群体感应(QS)系统在铜绿假单胞菌生物被膜形成中的作用。方法将铜绿假单胞菌生物被膜阳性的模式菌株PAO1制备成生物被膜菌和浮游菌。采用实时荧光定量PCR法检测菌株中T6SS相关溶血素共调节蛋白(Hcp)基因Hcp1、Hcp2和Hcp3,QS系统相关基因LasR,胞外多糖相关多糖合成位点基因A(PslA)和菌膜基因A(PelA),以及Ⅳ型菌毛基因(PilA)和鞭毛蛋白基因(FliC)的表达水平。采用独立样本t检验比较PAO1生物被膜菌与浮游菌中上述基因表达的差异。结果 PAO1生物被膜菌PslA、PelA、PilA和FliC基因的相对表达量均明显高于浮游菌,分别为浮游菌的714、274、604和42倍(P均<0.05),提示制备的PAO1生物被膜菌形成了具有鞭毛和菌毛结构的成熟生物被膜。PAO1生物被膜菌Hcp1、Hcp2、Hcp3和LasR基因的相对表达量均明显高于浮游菌,分别为浮游菌的1 045、11 268、6 654和1 226倍(P均<0.05),提示T6SS和QS系统与PAO1菌生物被膜的形成有关。结论铜绿假单胞菌中T6SS和QS系统可能参与生物被膜形成,其具体调控机制有待进一步研究。

铜绿假单胞菌抗菌物质对白色念珠菌的体外抑菌活性研究

目的观察铜绿假单胞菌抗菌物质对白色念珠菌的体外抑菌活性。方法用交叉条带实验方法测定铜绿假单胞菌对18株白色念珠菌等的体外抑制活性。结果铜绿假单胞菌抗菌物质对白色念珠菌体外抑菌活性良好,第6和8株铜绿假单胞菌对白色念珠菌的抑制率均达到了100%,铜绿假单胞菌产生色素的菌株抗真菌活性显著优于不产色素的菌株。铜绿假单胞菌抑制白色念珠菌的生长,主要是铜绿假单胞菌产生的绿脓素。结论铜绿假单胞菌产生的抗菌物质对白色念珠菌具有较强的抗真菌活性。

铜绿假单胞菌耐消毒剂基因检测

目的了解深圳市人民医院临床分离的铜绿假单胞菌耐季胺盐类消毒剂基因(qac)的检出率及基因型。方法收集深圳市人民医院近几年铜绿假单胞菌临床分离菌株63株,应用PCR法检测菌株的qacA/B、qacC、qacG、qacJ和qacE△1基因。结果63株铜绿假单胞菌中,qacE△1基因阳性51株(80.9%),qacA/B基因阳性5株(7.9%),其余的基因型未检出。结论我院临床分离的铜绿假单胞菌中耐季铵盐类消毒剂基因检出率较高,主要为qacE△1型。