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miR-9-5p下调FRMD6促喉癌Hep2细胞存活的机制研究
被引量:
1
1
作者
程秀琴
谭元元
+1 位作者
艾力根·阿不都热依木
唐亮
《医学研究杂志》
2019年第8期63-69,共7页
目的探讨miR-9-5p通过下调FRMD6表达促进喉癌Hep2细胞存活的具体机制。方法通过实时荧光定量PCR检测miR-9-5p、FRMD6在人喉癌组织中的表达情况。Hep2细胞转染对照抑制剂作为对照组,实验组分别转染miR-9-5p抑制剂、FRMD6、miR-9-5p抑制剂...
目的探讨miR-9-5p通过下调FRMD6表达促进喉癌Hep2细胞存活的具体机制。方法通过实时荧光定量PCR检测miR-9-5p、FRMD6在人喉癌组织中的表达情况。Hep2细胞转染对照抑制剂作为对照组,实验组分别转染miR-9-5p抑制剂、FRMD6、miR-9-5p抑制剂+FRMD6,利用MTT、细胞克隆形成实验等观察miR-9-5p及FRMD6对Hep2细胞增殖活力的影响;caspase-3蛋白活性检测以评估miR-9-5p、FRMD6对Hep2细胞的凋亡情况。对照组转染阴性对照,实验组分别转染miR-9-5pmimics,Western blot法检测过表达细胞中FRMD6的表达;Luciferase实验验证miR-9-5p与FRMD63′-UTR的结合。对照组转染阴性对照/抑制剂,实验组分别转染miR-9-5p对照/抑制剂,RT-PCR、Western blot法分别检测转染细胞中miR-9-5p、FRMD6、YAP等表达情况。结果RT-PCR法检测结果显示,喉癌组织中miR-9-5p表达增加而FRMD6表达下降。MTT及细胞克隆形成实验结果显示,Hep2细胞分别瞬转miR-9-5p抑制剂或FRMD6过表达活细胞数量均明显减少,增殖能力显著下降(P<0.05),而两者共瞬转后,细胞增殖能力较单转染组显著降低(P<0.05);caspase-3蛋白活性:Hep2细胞分别瞬转miR-9-5p抑制剂或FRMD6细胞凋亡增加(P<0.05),而两者共瞬转后细胞凋亡较单转染组高(P<0.05)。Westernblot法检测结果显示,Hep2细胞过表达miR-9-5p后FRMD6表达减少;Luciferase实验结果显示,miR-9-5p与FRMD63′-UTR直接结合。RT-PCR及Westernblot法检测结果显示,miR-9-5p阴性组FRMD6转录及翻译显著降低,YAPmRNA及蛋白表达则显著上调(P<0.05);miR-9-5p抑制剂组FRMD6的表达升高,而YAP表达降低(P<0.05)。结论miR-9-5p通过抑制FRMD6基因表达,促进人喉癌组织及Hep2细胞增殖存活,抑制细胞凋亡,这个过程可能与Hippo-YAP通路受抑制有关。
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关键词
miR-9-5p
FRMD6
人喉癌Hep2细胞存活
Hippo/YAP
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题名
miR-9-5p下调FRMD6促喉癌Hep2细胞存活的机制研究
被引量:
1
1
作者
程秀琴
谭元元
艾力根·阿不都热依木
唐亮
机构
新疆维吾尔自治区人民医院耳鼻喉诊疗中心
出处
《医学研究杂志》
2019年第8期63-69,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(81760023)
文摘
目的探讨miR-9-5p通过下调FRMD6表达促进喉癌Hep2细胞存活的具体机制。方法通过实时荧光定量PCR检测miR-9-5p、FRMD6在人喉癌组织中的表达情况。Hep2细胞转染对照抑制剂作为对照组,实验组分别转染miR-9-5p抑制剂、FRMD6、miR-9-5p抑制剂+FRMD6,利用MTT、细胞克隆形成实验等观察miR-9-5p及FRMD6对Hep2细胞增殖活力的影响;caspase-3蛋白活性检测以评估miR-9-5p、FRMD6对Hep2细胞的凋亡情况。对照组转染阴性对照,实验组分别转染miR-9-5pmimics,Western blot法检测过表达细胞中FRMD6的表达;Luciferase实验验证miR-9-5p与FRMD63′-UTR的结合。对照组转染阴性对照/抑制剂,实验组分别转染miR-9-5p对照/抑制剂,RT-PCR、Western blot法分别检测转染细胞中miR-9-5p、FRMD6、YAP等表达情况。结果RT-PCR法检测结果显示,喉癌组织中miR-9-5p表达增加而FRMD6表达下降。MTT及细胞克隆形成实验结果显示,Hep2细胞分别瞬转miR-9-5p抑制剂或FRMD6过表达活细胞数量均明显减少,增殖能力显著下降(P<0.05),而两者共瞬转后,细胞增殖能力较单转染组显著降低(P<0.05);caspase-3蛋白活性:Hep2细胞分别瞬转miR-9-5p抑制剂或FRMD6细胞凋亡增加(P<0.05),而两者共瞬转后细胞凋亡较单转染组高(P<0.05)。Westernblot法检测结果显示,Hep2细胞过表达miR-9-5p后FRMD6表达减少;Luciferase实验结果显示,miR-9-5p与FRMD63′-UTR直接结合。RT-PCR及Westernblot法检测结果显示,miR-9-5p阴性组FRMD6转录及翻译显著降低,YAPmRNA及蛋白表达则显著上调(P<0.05);miR-9-5p抑制剂组FRMD6的表达升高,而YAP表达降低(P<0.05)。结论miR-9-5p通过抑制FRMD6基因表达,促进人喉癌组织及Hep2细胞增殖存活,抑制细胞凋亡,这个过程可能与Hippo-YAP通路受抑制有关。
关键词
miR-9-5p
FRMD6
人喉癌Hep2细胞存活
Hippo/YAP
Keywords
miR-9-5p
FRMD6
Hep2 cell survival of human laryngeal carcinoma
Hippo/YAP
分类号
R739-65 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
miR-9-5p下调FRMD6促喉癌Hep2细胞存活的机制研究
程秀琴
谭元元
艾力根·阿不都热依木
唐亮
《医学研究杂志》
2019
1
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