金丝桃苷对离体缺氧/缺糖再灌注脑损伤的保护作用

目的研究金丝桃苷对离体缺氧缺糖/再灌注脑损伤的保护作用。方法小鼠离体脑片缺氧缺糖/再灌注(OGD/RP)诱导的模型上,以2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)产物formazan定量测定脑片活性,同时计数单位面积脑片皮层和纹状体区的存活神经元。新生大鼠原代培养神经元OGD/RP损伤后测定乳酸脱氢酶(LDH)释放和噻唑蓝(MTT)液比色吸光度,评价神经元活性。观察不同浓度的金丝桃苷对于离体脑损伤的保护作用。结果金丝桃苷可有效减轻OGD/RP对脑片的缺血性损伤,并对于OGD/RP原代神经元具有显著的保护作用。结论金丝桃苷对离体缺氧缺糖/再灌注脑损伤具有明显的保护作用,此作用可能与其抗自由基生成、抑制Ca2+内流及脂质过氧化物形成有关。

瘦素对小鼠脑缺血/再灌注损伤神经元凋亡的影响

目的:研究Leptin在脑缺血性损伤神经元凋亡中的作用及其机制。方法:将75只雄性昆明小鼠完全随机分成3组,即假手术组、缺血/再灌注模型组、Leptin干预组;通过大脑中动脉栓塞(MCAO)复制小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,Leptin干预组在缺血0 min腹腔注射Leptin(1μg/g体重),TUNEL染色检测神经元凋亡,RT-PCR检测凋亡相关基因bcl-2和caspase-3 mRNA表达,免疫组化凋亡相关基因bcl-2和caspase-3蛋白水平的表达。结果:模型组脑缺血中心区神经元以坏死为主,与假手术组相比,其半影区神经元凋亡数量显著增多、促凋亡基因caspase-3和抑凋亡基因bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.01);与模型组比较,Leptin干预组半影区凋亡神经元数量显著减少、caspase-3 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01),抑凋亡基因bcl-2 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结论:Leptin能够通过上调抑凋亡基因bcl-2表达,下调促凋亡基因caspase-3表达抑制神经元凋亡,在脑缺血性损伤中发挥神经保护作用。

黄芩苷对小鼠脑片和大鼠皮质神经元缺氧缺糖/再灌注损伤的保护作用

目的在离体水平，探讨黄芩苷对缺氧缺糖／再灌注（OGD／RP）诱导的脑片及神经元损伤的保护作用及机制。方法小鼠离体脑片OGD／RP模型中，以2，3，5-三苯基氯化四氮唑（TFC）产物白腊评价脑片活性；原代培养大鼠皮层神经元OGD／RP模型中，以噻唑蓝（MTT）还原和乳酸脱氢酶（IDH）活性测定神经元活性变化，用2，7一二氯荧光素二乙酸盐（DCF-DA）测定细胞内自由基水平。观察不同时间给予黄芩苷对损伤的保护作用。结果在脑片，全程给药和OGD时给予黄芩苷0.01—1μmol·L^-1，再灌注时给予黄芩苷0．1～1μmol·L^-1，可显著减轻损伤。在神经元，全程给予黄芩苷0．1～1μmol·L^-1可减轻神经元损伤，并降低神经元内自由基水平升高。结论黄芩苷对OGD／RP损伤有浓度依赖性保护作用，再灌注时给药亦有效，其作用至少部分与抗自由基有关。

新生大鼠脑缺氧缺血损伤时的COX-2表达变化

目的 采用免疫组化方法研究新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)时环氧合酶 2 (COX 2 )的表达变化。方法 通过制备新生大鼠左脑的HIBD模型 ,应用免疫组化方法研究 2、6、2 4、72h、7d时不同时相点脑皮层及海马CA1区COX 2免疫化学阳性细胞的表达及免疫细胞化学阳性数表达变化。结果 7日龄Wistar大鼠对照组可见微量COX 2阳性表达 ,HIBD 2h后即见明显增高 ,并于 6～ 2 4h出现表达高峰 ,其后出现下降 ,并可维持明显表达至 7d。结论 新生鼠HIBD可诱导COX 2表达 ,并可能参与HIBD后的神经毒性损伤。

脑缺血再灌对小鼠学习记忆的影响及药物防护

在建立脑血管性学习记忆障碍模型的基础上，观察脑缺血再灌对小鼠学习记忆的影响及服用尼莫地平、７６４－３、醒脑灵对其的防护作用。重复脑缺血再灌可明显的降低动物的学习和记忆能力，并可通过药物改善小鼠学习记忆障碍的程度。

全脑缺血再灌注大鼠小脑各层IGF-1的动态表达

目的研究缺血再灌注(I/R)不同时间内全脑I/R大鼠小脑各层胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的动态表达,进一步探讨IGF-1对I/R损伤的神经营养保护作用。方法选用老龄Wistar大鼠,雌雄随机分成对照组和实验组,采用免疫组化ABC法检测小脑各层、缺血再灌注不同时间IGF-1的表达。结果正常老龄Wistar大鼠小脑各层均可见一定水平IGF-1表达。分子层和髓质层缺血15 min再灌注1 h IGF-1表达略有增强,再灌注6 h表达明显增强,2 d达到高峰,4 d降回到基础水平,9 d时表达又出现升高;梨状细胞层缺血15 min再灌注1 h IGF-1表达略有增强,再灌注6h表达明显增强,2 d达到高峰,4 d表达略有降低,9 d表达又转而增强;颗粒细胞层在I/R不同时间IGF-1表达较少,变化较小。结论 IGF-1在正常小脑各层中有少量表达。小脑颗粒细胞层缺乏IGF-1的神经保护作用,其他各层IGF-1对神经元具有快速而且持久的保护作用。

东菱精纯克栓酶治疗缺血性脑血管病

报道了东菱精纯克栓酶（ＤＦ－５２１）治疗急性缺血性脑血管病的疗效，共４１例。结果基本痊愈率３９％，总有效率９２．７％。在使用该药（克栓酶１０ＢＵ溶于１００～２００ｍｌ生理盐水，静脉滴庄，隔日１次，共３次）后２４ｈ内出现疗效者８２．９％。频发的ＴＩＡ多数在２４ｈ内发作被控制。

东菱克栓酶对沙土鼠缺血性脑血管病引起的脑水肿的影响

以结扎左侧颈总动脉（ＬＣＣＡ）的沙土鼠为缺血性脑卒中动物模型，观察东菱克栓酶（ＴＯＢＩＳＨＩＤＦ－５２１）对缺血性脑卒中的保护作用以及对缺血性脑水肿的影响。发现：东菱克栓酶可显著降低缺血性卒中动物的轻、重症状包括死亡的发生，且脑卒中分数与大脑皮层脑组织的比重呈显著负相关。本文结果提示：东菱克栓酶对缺血性脑卒中的保护作用之一，可能与它能减轻脑缺血性脑水肿有关。

丁基苯酞对小鼠全脑缺血的保护作用

观察了丁基苯酞（ＮＢＰ）对小鼠全脑缺血脑保护作用和脑能量代谢的影响。用Ｌｏｗｒｙ法测定脑乳酸，ＡＴＰ和磷酸肌酸（ＰＣｒ）的含量。结果表明，ＮＢＰ１１２．５或２５０ｍｇ·ｋｇ－１ｓｃ能明显延长断头或ｉｖ饱和ＭｇＣｌ２后喘息的时间；ＮＢＰ１５Ｏ或２００ｍｇ·ｋｇ－１ｓｃ能明显减少断头缺血后乳酸的升高和ＡＴＰ及ＰＣｒ的降低。实验结果提示，ＮＢＰ对缺血脑有保护和改善脑能量代谢的作用。

醒脑静注射液抗脑缺血再灌注损伤作用的实验研究

目的 探讨醒脑静注射液(XNJI)对脑缺血灌注损伤(CIRI)的防治作用及其机理。方法 制备家兔CIRI模型,随机分为对照组和XNJI组,动态观察血浆及脑组织一氧化氮(NO)水平、内皮素(ET)含量、丙二醛(MDA)浓度、超氧化物歧化酶(SOD)活性及脑超微结构的变化。结果 脑缺血再灌注期间,血浆和脑组织NO水平及SOD活性明显下降(P<005和P<001),ET及MDA含量显著升高(P<005和P<001),超微结构发生异常改变;使用XNJI后,上述各指标的异常变化明显减轻,与对照组相比有显著性差异(P<005和P<001)。结论 XNJI对CIRI具有良好的防护作用,其机制与提高机体NO水平、降低ET及氧自由基水平有关。

白三烯拮抗剂ONO-1078对小鼠局灶性脑缺血的保护作用

AIM To determine whether ONO 1078 {pranlukast, 4 oxo 8 [p (4 phenylbutyloxy) benzoyl amino] 2 (tetrazol 5 yl) 4H 1 benzopyran hemihydrate}, a potent leukotriene antagonist, has protective effect on focal cerebral ischemia in mice. METHODS Focal cerebral ischemia was induced by permanent middle cerebral artery (MCA) occlusion in mice. ONO 1078 (0 01, 0 05, 0 10 mg·kg -1 ), dexamethasone (0 5 mg·kg -1 ), nimodipine (0 2 mg·kg -1 ) or saline (control) were injected ip once daily for 3 days, and 30 min before MCA occlusion. Twenty four hours after cerebral ischemia, the neurological scores were evaluated, infarct volumes and areas of the right and left cerebral hemispheres were measured by computer imaging analysis. RESULTS ONO 1078, dexamethasone and nimodipine reduced the neurological scores. ONO 1078 and dexamethasone reduced the ratio of right/left hemisphere area, indicating inhibition of brain edema, while nimodipine showed no effect. ONO 1078 dose dependently reduced infarct size, and dexamethasone and nimodipine showed the same effect. CONCLUSION ONO 1078 showed protective effect on focal cerebral ischemia. This may represent a novel approach to the treatment of acute cerebral ischemia.

银杏叶提取物(EGb)对大鼠局部脑缺血及颈动脉血栓形成的保护作用

应用大鼠大脑中动脉梗塞和血栓形成导致缺血性脑卒中的实验模型，观察银杏叶提取物（ＥＧｂ）对脑缺血面积和由缺血造成的行为障碍的影响。结果表明预防或治疗性ｉｖ大剂量ＥＧｂ（２００ｍｇ·ｋｇ－１）均能显著减少脑缺血面积，明显改善大鼠脑缺血造成的行为障碍，其预防作用似优于治疗作用。预防性ｉｖ小剂量ＥＧｂ（１００ｍｇ·ｋｇ－１）也能明显减少血栓形成性脑缺血面积，改善梗塞和血栓形成性脑缺血所致的行为障碍，与阳性对照药尿激酶和尼莫地平作用相同。实验还发现ＥＧｂ有抑制大鼠电刺激颈总动脉的血栓形成的作用，且其对抗血栓形成强度具剂量依赖性。提示ＥＧｂ对缺血性脑卒中和血栓形成有预防和治疗作用。

巴曲酶对大鼠缺血再灌注损伤的保护作用─—降低NO神经毒性作用

本文用Ｗｉｓｔａｒ大鼠四条血管关闭的全脑缺血再灌注模型，观察脑缺血再灌注脑组织ＮＯ含量的变化及巴曲酶对它的影响。发现：对照组胞组织ＮＯ含量（２２．２２±４．７７ｐｍｏｌ／ｍｇ湿重脑组织）均显著高放假手术组（１３．４７±３．４３ｉ及巴曲酶组（１６．９３±４．３６），而巴曲酶组与假手术组间差异不显著。提示巴曲酶通过降低ＮＯ的神经毒性作用起到保护脑组织、减轻缺血再灌注损伤作用。

姜黄素对缺血再灌注大鼠脑组织SOD,MDA和亚硝酸盐含量的影响

目的：通过观察姜黄素对脑缺血再灌注时脑组织中丙二醛（ＭＤＡ）、亚硝酸盐、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量的影响，探讨其对再灌注损伤保护作用的机制。方法：选用大鼠４血管结扎缺血再灌注模型（缺血３０ｍｉｎ，再灌注１５ｍｉｎ），用化学发光法测定大鼠脑组织中ＳＯＤ的活性，用比色法测定ＭＤＡ和亚硝酸盐的含量。姜黄素（２０和４０ｍｇ／ｋｇ）于缺血前３０ｍｉｎ腹腔注射给予。结果：缺血３０ｍｉｎ再灌注１５ｍｉｎ后，模型组的动物脑组织中ＭＤＡ和亚硝酸盐的含量明显升高。姜黄素可抑制这种升高，且呈一定的剂量依赖关系。姜黄素还可使缺血再灌注时脑组织的ＳＯＤ活性提高。

金丝桃甙对脑缺血再灌损伤保护作用的实验研究

用脑缺血再灌模型和跳台试验，研究了金丝桃甙（Ｈｙｐ）对脑缺血再灌损伤的保护作用。结果表明，在小鼠脑缺血再灌模型上，Ｈｙｐ（５０及１００ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｐ）可显著抑制脑组织乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性的下降；表明，Ｈｙｐ跳台试验对脑缺血再灌致小鼠学习记忆功能障碍有明显的改善作用；在大鼠四血管结扎模型上，Ｈｙｐ可显著抑制脑组织中ＬＤＨ、超氧物岐化酶（ＳＯＤ）及谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰｘ）活性的降低，减少脑组织脂质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）和一氧化氮（ＮＯ）的含量的增高，并促进ＥＥＧ变化的恢复。上述结果提示Ｈｙｐ对脑缺血再灌损伤有显著保护作用，其机制可能与其抗自由基、抑制ＮＯ的生成有关。

大鼠脑缺血再灌流脑区一氧化氮变化的研究

目的研究大鼠脑缺血及再灌流后脑部一氧化氮的变化。方法采用荧光法和放射免疫法测定４个脑区一氧化氮（ＮＯ）代谢产物ＮＯ２和环磷酸鸟苷（ｃＧＭＰ）。结果脑缺血１０ｍｉｎ，各脑区ＮＯ２和ｃＧＭＰ含量明显增高；脑缺血３０ｍｉｎ，各脑区ＮＯ２和ｃＧＭＰ含量开始下降。缺血１０ｍｉｎ再灌流１５ｍｉｎ以及缺血３０ｍｉｎ再灌流１５ｍｉｎ，各脑区ＮＯ２和ｃＧＭＰ含量再次增加，与单纯脑缺血组相比，有显著差异性（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。

大鼠海马脑片缺氧诱导Ca^(2+)/CaM PKII活性抑制机理的研究

采用大鼠海马脑片体外缺氧模型，观察了Ca2+和氯胺酮对海马脑片Ca2+／CaMPKⅡ活性的影响，同时观察了缺氧对神经元胞外谷氨酸堆积的影响。结果如下：（1）有钙或无钙培养时，酶活性随缺氧时间的延长均下降，但前者比后者酶活性下降更显著，提示外ca2+在神经元缺氧损伤中起重要作用。（2）海马脑片在体外缺氧30min，谷氨酸在胞外的堆积增加2倍多。（3）单纯过量外源性谷氨酸能引起酶活性显著下降，提示脑缺氧时酶活性的抑制与兴奋毒性有关。（4）氯胺酮对缺氧和单纯外源性谷氨酸所诱导的酶活性抑制均有明显的拮抗作用，说明脑缺氧引起酶活性下降与NMDA受体介导有关。我们的结论是：脑缺氧时该酶活性的抑制是与下列途径有关：谷氨酸→NMDA受体→Ca2+→Ca2+靶酶。

缺血性脑血管病患者血浆和血小板提取液神经肽Y与神经降压素的改变

目的和方法：采用放射免疫分析法，观察５８ 例不同病因的缺血性脑血管病（ＩＣＶＤ） 患者血小板提取液和血浆中神经肽Ｙ（ＮＰＹ） 与神经降压素（ＮＴ） 的含量变化。结果：在ＩＣＶＤ 患者血小板提取液中ＮＰＹ 含量明显低于对照组，血浆中ＮＰＹ 则明显高于对照组。血小板中ＮＰＹ 减少与血浆浓度的增高呈明显负相关（ ｒ ＝ － ０ ．６０ ， Ｐ＜ ０ ．０１） 。ＮＴ 含量在患者血小板液中显著增高。结论：ＮＰＹ 与ＮＴ 在ＩＣＶＤ 病理过程中，由血小板大量释放并积极参与了以缩血管效应为主的病理反应，是造成血栓形成。