桂皮醛对抗血小板聚集和血栓形成的特点

目的:观察桂皮醛对血小板聚集和血栓形成的影响。方法:实验于2005-07/11在第四军医大学药学系药物研究所实验室完成。①体外血小板聚集实验:制备大鼠洗涤血小板,观察0.15,0.30和0.60mmol/L桂皮醛对胶原蛋白(100mg/L)和凝血酶(3U/mL)诱导的大鼠体外血小板聚集的抑制作用。桂皮醛购自中国医药集团上海化学试剂公司,纯度>98%。②出、凝血时间测定及胶原蛋白-肾上腺素诱发体内血栓形成实验:取BALB/c小鼠60只,随机分成6组(n=10),生理盐水组灌胃生理盐水;阿司匹林组灌胃阿司匹林100mg/kg为阳性对照;还设置桂皮醛灌胃(250,500mg/kg)和腹腔注射(50,100mg/kg)4个剂量组。所有动物每天给药1次,10μL/g,连续11d。第10天给药后1h采用断尾法和玻片法测定小鼠出血、凝血时间;第11天给药后1h观察小鼠尾静脉注射胶原蛋白(3.57mg/kg)-肾上腺素(0.143mg/kg)混合血栓诱导剂后5min内的存活率。③动-静脉旁路血栓形成实验:SD大鼠48只,随机分为6组(n=8),生理盐水组灌胃生理盐水;阿司匹林组灌胃阿司匹林80mg/kg为阳性对照;桂皮醛分为灌胃200,400mg/kg组和腹腔注射40,80mg/kg4个剂量组。所有动物每天给药1次,10μL/g,连续10d。末次给药后1h测定动-静脉旁路丝线上的血栓湿质量。结果:小鼠60只和大鼠48只全部进入结果分析。①桂皮醛能够明显抑制胶原蛋白和凝血酶诱导的大鼠体外血小板聚集,并呈剂量依赖性,与对照组比较差异显著(P<0.05,0.01)。②桂皮醛显著延长小鼠出、凝血时间,与对照组比较差异非常显著(P<0.01)。③胶原蛋白-肾上腺素诱发性小鼠肺动脉栓塞存活率:生理盐水组为10%,阿司匹林组为80%,桂皮醛各剂量组为70%～100%。④动-静脉旁路丝线上的血栓湿质量:阿司匹林组和桂皮醛各剂量组均低于生理盐水组(P<0.01);桂皮醛各剂量组对大鼠血栓的抑制率范围为30%～43.4%。结论:桂皮醛体外能够明显抑制胶原蛋白和凝血酶诱导的大鼠血浆中血小板的聚集;体内能够显著延长小鼠断尾后的出、凝血时间,减轻大鼠动-静脉旁路丝线上血栓的质量。提示桂皮醛具有明显抗血小板聚集和体内抗血栓作用。

甘草苷对慢性应激抑郁模型大鼠的抗抑郁作用

目的:观察甘草苷对慢性抑郁模型大鼠的疗效,探讨其抗抑郁样作用的可能机制。方法:实验于2005-06/07在北京大学医学部完成。72只成年雄性SD大鼠,根据其体质量采用区组随机化的方法将大鼠分为6组,每组12只:正常对照组、模型组(应激+灌胃双蒸水)、氟西汀组(应激+灌胃氟西汀),以及甘草苷10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg组(应激+灌胃甘草苷)。采用慢性应激加孤养造模,应激持续5周,从第3周起进行药物干预。盐酸氟西汀原料药由常州四药公司提供。甘草苷由北大药学院生药学生物技术研究室提供。采用糖水消耗实验和强迫游泳实验观察大鼠行为学改变。实验结束后断头取血,分离血浆和红细胞,用试剂盒测定红细胞超氧化物歧化酶活性和血浆丙二醛浓度。结果:实验中,1只大鼠脚趾受伤,2只造模时意外溺亡,共69只大鼠进入结果分析。①慢性应激大鼠糖水消耗量较正常对照组明显降低[(8.3±0.9),(14.4±0.8)g,P<0.01];治疗后糖水消耗量增加,差异均具有显著性[甘草苷10、20、40mg/kg组分别为(11.4±1.2),(14.1±1.0),(14.0±0.8)g,氟西汀组为(13.0±1.9)g,P<0.05或0.01]。②与对照组相比,模型组大鼠不动时间显著延长[(37±9),(96±10)s,P<0.01];与模型组相比,给药各组大鼠的不动时间均显著缩短[甘草苷10、20、40mg/kg组分别为(66±10),(26±8),(41±11)s,氟西汀组为(63±8)s,P<0.05或0.01]。③模型组红细胞超氧化物歧化酶活性低于正常对照组[(35.4±6.8),(44.5±4.6)μkat/g,P<0.01];甘草苷各组后超氧化物歧化酶活性均高于模型组[20、40mg/kg组分别为(42.2±3.8)μkat/g,P<0.05;(45.3±7.9)μkat/g,P<0.01];氟西汀组超氧化物歧化酶活性与模型组相比差异无显著性。④模型组血浆丙二醛浓度高于正常对照组[(3.4±0.6),(1.9±0.4)μmol/L,P<0.01];甘草苷治疗组血浆丙二醛浓度降低[20、40mg/kg组分别为(2.2±0.9)μmol/L,P<0.05;(1.9±0.7)μmol/L,P<0.01]。结论:甘草苷可以改善抑郁模型中快感缺乏的症状,并能对抗绝望行为,支持甘草苷具有抗抑郁样作用的假设。甘草苷抗抑郁样作用可能通过提高机体超氧化物歧化酶活性,清除自由基,阻止脂质的过氧化,减少丙二醛的生成实现的。

三七总皂苷对阿尔茨海默病大鼠脑胆碱能神经的保护作用(英文)

背景:现代医学目前对阿尔茨海默病尚无有效的治疗方法,三七总皂苷治疗阿尔茨海默病已引起重视和关注,但其作用机制仍不十分清楚。目的:观察具有化瘀止血、活血定痛功效的三七总皂苷对阿尔茨海默病动物模型大脑胆碱能神经病理损害的保护作用。设计:完全随机分组设计,对照试验。单位:广西中医学院神经科学研究所。材料:实验于2003-06/2005-04在广西中医学院中药药效研究实验室完成,选用清洁级健康Wistar大鼠90只,雌雄各半。其中15月龄老年鼠75只,3月龄青年鼠15只。方法:实验于2003-06/2005-04在广西中医学院中药药效研究实验室(广西重点实验室)完成。①选用清洁级健康Wistar大鼠90只,雌雄各半。其中15月龄老年鼠75只,3月龄青年鼠15只。设3月龄15只为青年对照组。于15月龄75只中随机抽取15只作为老年对照组。对其余60只大鼠进行造模。以D-半乳糖腹腔注射致亚急性损伤合并鹅膏蕈氨酸损毁双侧大脑Meynert基底核建立阿尔茨海默病大鼠模型。青年对照组和老年对照组均在相同条件下以生理盐水作平行对照。②2周后将存活的造模大鼠随机分为4组:模型组,三七总皂苷高、低剂量组和石杉碱甲组,每组12只。三七总皂苷高、低剂量组分别按200和100mg/kg灌胃三七总皂苷(云南玉溪维和制药厂生产),1次/d;石杉碱甲组按0.3mg/kg灌胃给药,1次/d,连续4周;模型组、青年对照组和老年对照组以等体积的生理盐水灌胃,连续4周。③给药结束后行大脑组织病理切片,利用免疫组织化学方法检测大脑切片胆碱乙酰基转移酶免疫反应活性及阳性神经元数量及形态学改变。应用IBAS图像分析系统对胆碱乙酰转移酶免疫阳性神经元进行图像分析处理,测定胆碱乙酰转移酶免疫阳性细胞平均截面积和平均吸光度(A值);用显微镜测微尺测定计算胆碱乙酰转移酶阳性神经元数目。④采用单因素方差分析进行计量资料间差异比较。主要观察指标:三七总皂苷对阿尔茨海默病大脑胆碱能神经元分布和胆碱乙酰基转移酶的影响。结果:老年大鼠75只和青年大鼠15只均进入结果分析。①青年对照组胆碱乙酰转移酶免疫阳性神经元最多,免疫阳性物质染色最深;三七总皂苷高剂量组免疫阳性神经元明显多于石杉碱甲组和模型组;模型组免疫阳性神经元较其他各组的神经元小,且数目明显减少,胞体的轴突及树突变短。②基底前脑胆碱乙酰转移酶免疫阳性细胞数:模型组明显少于其他各组(P<0.05),三七总皂苷低剂量组、石杉碱甲组、模型组明显少于老年对照组(P<0.05),石杉碱甲组、模型组明显少于三七总皂苷高、低剂量组(P<0.05),青年对照组明显高于其他各组(P<0.05)。基底前脑胆碱乙酰转移酶免疫阳性细胞平均A值:变化与各组免疫阳性细胞数变化基本相同。基底前脑胆碱乙酰转移酶免疫阳性细胞平均截面积:三七总皂苷低剂量组和模型组明显小于青年对照组(P<0.05),其他各组间差异不明显(P>0.05)。结论:三七总皂苷对老年性痴呆大鼠动物模型大脑胆碱能神经元具有较强的保护作用,通过改善和修复受损神经元而提高细胞存活的数量和质量、提高胆碱乙酰转移酶的含量和活性,从而保护和改善中枢胆碱能系统的功能,发挥抗老化、抗痴呆的作用。

夜来香正丁醇提取物对离体豚鼠右心房收缩特性的影响

目的:观察夜来香树属植物夜来香正丁醇提取物对豚鼠离体右心房收缩性的影响,并分析其可能的作用途径。方法:实验于2005-06/2005-09在赣南医学院机能实验室完成。取豚鼠8只,开胸迅速取出心脏,在持续充以纯氧的条件下,用眼科剪仔细游离出右心房,两端穿线结扎,置于麦氏浴槽中,加入Krebs营养液,保持一定的静息张力、温度、pH值。采用累积给药前后对照的实验方法,采用JZ100型张力换能器分别测定给药前及质量浓度为0.1,0.3,1,3,10,30,100g/L的夜来香正丁醇提取物对其离体右心房收缩幅度、收缩速度、舒张速度的影响,记录于Medlab-U/4CS生物信号采集处理系统,计算右心房收缩幅度、收缩和舒张速度影响的变化率[变化率%=(给药前值-给药后值)/给药前值×100%]。分析其对豚鼠离体右心房收缩性的影响。结果:实验动物8只全部进入结果分析,无脱失。①夜来香正丁醇提取物低浓度(0.1,0.3g/L)对右心房收缩幅度具有轻度增加作用,但差异无显著性意义;1g/L时明显增加其收缩幅度的作用,增加率达15.2%,而在高浓度(3,10,30,100g/L)时,则呈明显的浓度依赖性负性作用,抑制率分别为12.2%,20.9%,23.7%,37.3%(P<0.05～0.01)。②夜来香正丁醇提取物在低浓度(0.1,0.3,1g/L)时对右心房收缩速度具有轻度增加的作用,但差异无显著性意义;而在高浓度(3,10,30,100g/L)时,则呈明显的浓度依赖性负性作用,其中10,30,100g/L3个浓度作用明显,抑制率分别为19.6%,33.5%,53.4%(P<0.05～0.01)。③夜来香正丁醇提取物在低浓度(0.1,0.3,1g/L)时对右心房舒张幅度具有增加的作用,但无统计学意义;而在高浓度(3,10,30,100g/L)时,则呈明显的负性作用,抑抑制率分别为6.75%,19.11%,20.36%,41.64%(P<0.05～0.01)。结论:不同质量浓度夜来香正丁醇提取物对离体豚鼠右心房的收缩性呈双相调节作用。

黄芩茎叶总黄酮预处理对缺血再灌注心肌超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量的影响

目的:分析黄芩茎叶总黄酮预处理对缺血再灌注心肌过氧化损伤的保护作用。方法:实验于2005-02/12在承德医学院解剖学研究室完成,选择雄性Wistar大鼠40只,按随机数字表法分为5组,即黄芩茎叶总黄酮预处理0.05,0.1,0.2g/(kg·d)组、缺血再灌注组和假手术组,每组8只。术前分别给予黄芩茎叶总黄酮预处理0.05,0.1,0.2g/(kg·d)组大鼠黄芩茎叶总黄酮0.05,0.1,0.2g/(kg·d)灌胃,连用1周;缺血再灌注组和假手术组给予等量生理盐水,至手术前24h。除假手术组外,其余大鼠均麻醉开胸暴露心脏,穿线结扎冠状动脉缺血30min,再灌注1h,制备缺血再灌注模型。假手术组只穿线不结扎。将实验过程中不符合要求的动物剔除。实验结束后,摘取大鼠心脏,测定心肌组织超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量。结果:实验过程中将不符合要求的动物剔除,并予以补足,进入结果分析40只大鼠。①各组大鼠心肌组织超氧化物歧化酶活性比较:缺血再灌注组大鼠心肌组织中超氧化物歧化酶活性显著低于假手术组[(3.68±1.35,4.83±1.33)μkat/g(P<0.01)],黄芩茎叶总黄酮预处理0.05,0.1,0.2g/(kg·d)组均显著高于缺血再灌注组[(4.49±1.44,4.84±1.67,4.81±1.56)μkat/g(P<0.05～0.01)]。②各组大鼠心肌组织丙二醛含量比较:缺血再灌注组大鼠心肌组织中丙二醛含量显著高于假手术组[(6.77±4.38,3.86±1.76)nmol/g(P<0.01)],黄芩茎叶总黄酮预处理0.05,0.1,0.2g/(kg·d)组均显著低于缺血再灌注组[(2.73±1.99,3.81±2.10,2.82±2.29)nmol/g(P<0.05～0.01)]。结论:黄芩茎叶总黄酮预处理能通过增强心肌抗氧化酶的活性,抵制脂质过氧化反应,减轻自由基损害,对缺血再灌注心肌产生保护作用。3种剂量的黄芩茎叶总黄酮对缺血再灌注心肌均有不同程度的保护作用,其中0.1g/(kg·d)剂量组效果较好。

海洛因成瘾者美沙酮维持治疗效果评价指标体系研究

目的建立海洛因成瘾者美沙酮维持治疗效果评价指标体系,为评价海洛因成瘾者参加美沙酮维持治疗效果提供技术支持。方法运用文献分析法和专家咨询法进行指标的筛选,应用层次分析法计算各级指标的权重。结果构建了海洛因成瘾者美沙酮维持治疗效果评价指标体系并确立了各级指标的权重。结论在海洛因成瘾者美沙酮维持治疗效果评价指标体系研究中,专家咨询法和层次分析法是科学和可行的方法。

南昌市美沙酮维持治疗门诊海洛因依赖者心理健康调查分析

目的了解南昌市美沙酮维持治疗门诊内的海洛因依赖者的心理健康状况,为开展心理治疗提供科学依据。方法采用预先制订的问卷收集海洛因依赖者的人口学数据;SCL-90症状自评量表测定海洛因依赖者的心理症状;海洛因依赖者SCL-90评分与常模比较采用t检验。结果269例海洛因依赖者中男性为主,占76.2%;心理障碍主要表现为抑郁、躯体化和焦虑。结论南昌市美沙酮门诊内的海洛因依赖者均不同程度存在心理问题,门诊必须开展心理治疗促进吸毒者心理康复。

美沙酮维持治疗者脱失的影响因素单中心调查分析

目的分析单中心美沙酮维持治疗者脱失的资料,探讨治疗脱失相关影响因素。方法样本来源于上海市虹口区精神卫生中心美沙酮维持治疗门诊的海洛因依赖者。研究组(n=54)为服药时间不足3个月退出治疗者,对照组(n=107)为服药时间超过6个月仍在维持治疗者。调查两组研究对象的社会人口学特征、成瘾程度、戒毒治疗、应对方式、社会支持等情况,分析各种潜在因素对海洛因依赖患者美沙酮维持治疗依从性的影响。结果对维持治疗的认识缺乏、低积极应对水平、高消极应对水平、社会支持差是影响美沙酮维持治疗脱失的危险因素。结论应针对危险因素实施综合干预,降低美沙酮维持患者的脱失率。

无锡市美沙酮维持治疗门诊患者焦虑情况及其影响因素分析

目的探索美沙酮维持治疗患者的焦虑情况及其影响因素。方法采用SAS量表和自编调查表,对患者的焦虑状况以及一般社会人口学特征、家庭、社会功能情况进行一对一调查。结果被调查患者的SAS量表总分均值为34.50±5.43,明显高于常模(29.78±10.07),其中有焦虑症状者占11.3%;经过统计分析,患者的性别及烦恼时的倾诉方式对患者的焦虑状况有影响。结论美沙酮维持治疗患者中普遍存在一定程度的焦虑,在治疗过程中应该加以重视,并采取相应的心理方面的干预措施。

复方中药降尿酸合剂干预高尿酸血症大鼠血尿酸水平的剂量依赖性

目的:观察复方中药降尿酸合剂干预高尿酸血症大鼠后,大鼠血尿酸水平变化,并分析该变化是否具有剂量依赖性。方法:实验于2003-07/2004-05在青岛大学医学院附属医院动物实验室完成。①选用健康雄性Wistar大鼠48只。按随机抽签法分为6组:对照组,高尿酸血症组,降尿酸合剂低、中、高剂量组,苯溴马隆组。②对照组和高尿酸血症组给予羧甲基纤维素钠乳剂(蒸馏水配制)每次1mL/100g,2次/d;降尿酸合剂低、中、高剂量组分别给予由青岛大学医学院附属医院药剂科制备提供的复方中药降尿酸合剂。实验过程中所用中药萆榭、土茯苓、红花、薏苡仁、怀牛膝等均一次性采购,制剂科制剂人员负责药品质量控制及制剂工艺:各生药混匀,水煎两遍,取两次溶液混匀分装,250mL/瓶,高温消毒后封瓶,置冰箱中保存备用。按国家中药管理局的相关规定,以人鼠单位体质量用药量直接换算后剂量的5,10,20倍作为低、中、高剂量(5.5,11.0,23.0mL/kg,2次/d);苯溴马隆组给予苯溴马隆乳悬液5mL/kg,2次/d,连续灌胃4d。于给药后第1天给予对照组羧甲基纤维素钠乳剂(生理盐水配制)10mL/kg,其余各组给予25g/L氧嗪酸钾10mL/kg,1h后灌胃给药同前,灌胃给药后1h大鼠断尾取血,应用Sysmexchemix180生化分析仪采用尿酸酶-EHSPT法测定血尿酸。③计量资料差异比较采用方差分析,组间两两比较采用Q检验。结果:由于取血样失败,对照组,降尿酸合剂低、高剂量组,苯溴马隆组各脱失1只,最终进入结果分析:高尿酸血症组和降尿酸合剂中剂量组各8只,对照组和降尿酸合剂低、高剂量组及苯溴马隆组各7只。血尿酸水平:高尿酸血症组,降尿酸合剂低、中、高剂量组,苯溴马隆组明显高于对照组(P<0.01);降尿酸合剂高剂量组和苯溴马隆组明显低于高尿酸血症组(P<0.05,0.01),降尿酸合剂低、中剂量组虽低于高尿酸血症组,但差异不明显(P>0.05);降尿酸合剂低、中、高剂量组均高于苯溴马隆组,但差异不明显(P>0.05)。结论:降尿酸合剂可以降低高尿酸血症大鼠的血尿酸水平并呈剂量依赖性。

80 Hz电刺激伏隔核对吗啡诱导的大鼠条件性位置偏爱行为形成的影响

目的探讨80Hz电刺激伏隔核对吗啡诱导的大鼠条件性位置偏爱形成的影响。方法雄性SD大鼠30只,随机分为吗啡-刺激组、吗啡-假刺激组、正常对照组,每组各10只。3组大鼠分别在不同条件下进行条件性位置偏爱实验,其中吗啡-刺激组、吗啡-假刺激组分别进行预测试、手术、训练、刺激、测试5个阶段实验,正常对照组进行预测试、手术、训练、测试4个阶段实验;在训练阶段,吗啡-刺激组和吗啡-假刺激组每天交替注射吗啡和生理盐水各1次,正常对照组每天注射2次生理盐水;在刺激阶段,吗啡-刺激组采用80Hz电刺激伏隔核,吗啡-假刺激组不刺激伏隔核。分别记录预测试和测试阶段3组大鼠在白箱内平均停留时间,并给予比较。结果吗啡-假刺激组训练后,在白箱内平均停留时间明显长于训练前和同期的正常对照组(P<0.01),吗啡诱导的心理依赖模型建立成功。吗啡-刺激组在伏隔核刺激条件下完成条件性位置偏爱训练后,在白箱停留时间长于吗啡-假刺激组(P<0.01),表明电刺激伏隔核显著强化了大鼠的觅药行为。结论80Hz电刺激大鼠双侧伏隔核可明显地促进吗啡诱导的位置偏爱行为的形成,表明该频率电刺激可强化吗啡诱导的心理依赖。

丹参酮ⅡA对大鼠血管平滑肌细胞的增殖作用

目的:观察丹参酮ⅡA对高糖诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用,分析该作用与丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路的关系。方法:实验于2004-01/2005-06在东南大学医学院发育与疾病相关基因实验室完成。①取大鼠胸主动脉,用组织贴壁法原代培养大鼠血管平滑肌细胞并传代,实验使用第4～8代细胞。②按实验分组干预细胞,正常对照组,培养液含5mmol/L葡萄糖;高糖组,培养液含30mmol/L葡萄糖;高糖对照组,培养液含30mmol/L葡萄糖+10g/L二甲亚砜;丹参酮ⅡA组,培养液含30mmol/L葡萄糖+0.5mg/L丹参酮ⅡA;U0126组,培养液含30mmol/L葡萄糖+25μmol/LU0126。③用二步法测定0.125,0.25,0.5,1.0,2.0,5.0,10.0mg/L丹参酮ⅡA对血管平滑肌细胞的毒性。④BrdU掺入DNA的ELISA法测定细胞内DNA合成水平。⑤同位素示踪法测定丝裂原活化蛋白激酶活性。结果:①高糖诱导的大鼠血管平滑肌细胞呈现快速增殖状态。②当丹参酮ⅡA剂量大于1.0mg/L时,有一定的细胞毒性。四甲基噻唑蓝法测定结果表明1.0,2.0,5.0,10.0mg/L丹参酮ⅡA组血管平滑肌细胞线粒体脱氢酶活性明显低于正常对照组(分别为0.654±0.023,0.580±0.032,0.465±0.041,0.376±0.053,0.840±0.085,P<0.01),表明此浓度可造成细胞功能障碍,有明显的细胞毒性。③随着丹参酮ⅡA作用浓度的增加,细胞内BrdU掺入DNA的量逐渐下降,0.03125mg/L丹参酮ⅡA与高糖对照组相比差异有显著性意义(分别为0.958±0.086,1.059±0.047,P<0.05),0.0625,0.125,0.25,0.5mg/L丹参酮ⅡA与高糖对照组相比差异有非常显著性意义(分别为0.865±0.058,0.781±0.099,0.738±0.071,0.616±0.028,1.059±0.047,P<0.01)。④高糖组血管平滑肌细胞内丝裂原活化蛋白激酶的活性相对于正常对照组显著升高[分别为(1048.59±94.78),(395.82±43.53)μkat/g,P<0.01],丹参酮ⅡA组和U0126组丝裂原活化蛋白激酶活性低于高糖组[分别为(450.55±50.47),(417.30±62.96),(1048.59±94.78)μkat/g,P<0.01]。结论:丹参酮ⅡA对高糖诱导的血管平滑肌细胞增殖具有明显抑制作用的机制可能是其部分阻断了丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路。

黄芩茎叶总黄酮对正常及肾动脉狭窄模型大鼠血压的影响(英文)

背景:黄芩茎叶的主要有效部位黄芩茎叶总黄酮具有改善冠脉血流量、脑血流量、延长凝血及凝血酶原时间、降血脂等作用。目的:观察黄芩茎叶总黄酮对正常大鼠和肾动脉狭窄模型大鼠血压的作用。设计:完全随机对照实验。单位:河北省中药新药研究与开发重点实验室。材料:选择鼠龄为2个月的Wistar大鼠70只,清洁级,体质量(250±50)g,雌雄各半,由中国医学科学院实验动物研究所繁育场提供(动物许可证号:01-3003);黄芩茎叶总黄酮由承德医学院中药研究所植化研究室提供;牛黄降压片由哈药集团世一堂制药厂生产,批号:9802304。方法:实验于1999-01/1999-10在承德医学院中药研究所完成。实验室环境:温度(22±1)℃,相对湿度50%～55%,光照时间:照明12h,黑暗12h。①实验1,黄芩茎叶总黄酮对正常大鼠血压的影响:摸球法随机抽取Wistar大鼠30只,用抽签法将大鼠随机分为黄芩茎叶总黄酮100mg/kgriabaicalen-(x±s,n=10)aHg)组、黄芩茎叶总黄酮50mg/kg组和盐水对照组,每组10只。将大鼠腹腔戊巴比妥钠麻醉后,通过MecLab/4e四道生理仪,描记各组大鼠血压后,分别对3组大鼠灌胃给予黄芩茎叶总黄酮100mg/kg,黄芩茎叶总黄酮50mg/kg及生理盐水(0.5mL/100g)。30min后连续观察各组大鼠血压的变化。②实验2,黄芩茎叶总黄酮对肾动脉狭窄高血压模型大鼠血压的影响:采用抽签法将剩余40只Wistar大鼠随机分为黄芩茎叶总黄酮100mg/kg组、黄芩茎叶总黄酮50mg/kg组、盐水对照组、牛黄降压片组,每组10只。按文献方法对各组大鼠制备慢性肾动脉狭窄型高血压模型,术后2周,每天对黄芩茎叶总黄酮50和100mg/kg组大鼠分别给予黄芩茎叶总黄酮100mg/(kg·d),50mg/(kg·d),牛黄降压片组给予牛黄降压片1200mg/(kg·d),盐水对照组给等容积生理盐水。各组均灌胃给药,给药容积0.5mL/100g,连续用药30天后,测量各组大鼠颈动脉血压。主要观察指标:①黄芩茎叶总黄酮对正常大鼠血压的影响。②黄芩茎叶总黄酮对肾动脉狭窄高血压模型大鼠血压的影响。结果:①实验1,黄芩茎叶总黄酮对正常大鼠血压影响:黄芩茎叶总黄酮50mg/kg和100mg/kg组大鼠给药后血压略低于给药前,与盐水对照组比较差异无显著意义(P>0.05)。②实验2,黄芩茎叶总黄酮对肾动脉狭窄高血压模型大鼠血压的影响:盐水对照组高血压模型大鼠血压明显升高;黄芩茎叶总黄酮50mg/kg组、100mg/kg组和牛黄降压片组高血压模型大鼠血压均低于盐水对照组犤(126.3±14.5)mmHg,(120.2±15.9)mmHg,(127.8±23.4)mmHg,(139.6±15.8)mmHg;P<0.01-0.05犦,以黄芩茎叶总黄酮100mg/kg组最明显。结论:黄芩茎叶总黄酮对肾动脉狭窄高血压模型大鼠有显著的降压作用,对正常大鼠血压无明显影响。

扶正排毒片对氢化可的松致免疫抑制小鼠免疫功能的调节

目的:观察扶正排毒片对氢化可的松所致的免疫抑制小鼠免疫功能的影响,探讨扶正排毒片的益气滋阴,清热解毒的功效。方法:实验于2005-02/10在河南中医学院动物实验中心完成。实验分为3批,每批选用小鼠60只,随机数字表法分为6组,每组10只,其中5组皮下注射氢化可的松制备免疫抑制小鼠模型。于造模第1天,高、中、低剂量扶正排毒片组分别灌服0.15,0.10,0.05g/mL扶正排毒片(主要由西洋参64.0g,黄芪160.0g,连翘106.7g,白花蛇舌草160.0g,甘草64.0g等药组成,河南中医学院第三附属医院)混悬液(200mL/kg),香菇多糖片组灌服5g/L香菇多糖片混悬液(200mL/kg),模型组灌服同体积的生理盐水。另有一组为空白对照组,每鼠仅灌服同体积的生理盐水。每天给药1次,连续给药7d。①实验1:第1批小鼠于第7天早上每鼠均腹腔注射5%鸡红细胞液0.5mL,于给鸡红细胞2h后给药,给药后2h,即给鸡红细胞后4h处死小鼠,脱颈椎处死小鼠。观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬情况。②实验2:第2批小鼠于给药第1天每鼠腹腔注射5%鸡红细胞液0.2mL,于最后一次给药后2h,小鼠眼眶取血,分离血清。取上清液于UV-2000型分光光度计540nm处比色。处死小鼠后,取脾细胞混悬液,取上清液于UV-2000型分光光度计413nm处比色。观察溶血素形成和空斑形成细胞情况。③实验3:第3批小鼠于给药第1,2,3天每鼠加肌注0.8g/L植物血凝素(8mg/kg),于最后一次给药后2h,小鼠剪尾取血,推片,瑞氏染色,油镜观察,计算外周血淋巴细胞转化百分率。结果:纳入小鼠180只,均进入结果分析。①实验1:高、中、低剂量扶正排毒片组和香菇多糖片组腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数高于模型组[分别为(52.8±7.6)%,(55.6±7.2)%,(45.9±7.1)%,(48.7±8.3)%,(35.3±7.1)%,P<0.01;0.82±0.08,0.84±0.07,0.66±0.10,0.67±0.11,0.55±0.10,P<0.05,0.01]。②实验2:高、中、低剂量扶正排毒片组和香菇多糖片组小鼠溶血素形成和空斑形成细胞(A)高于模型组(分别为0.120±0.015,0.131±0.019,0.101±0.017,0.104±0.018,0.063±0.020;0.446±0.047,0.498±0.016,0.383±0.060,0.387±0.064,0.221±0.061,P<0.01)。③实验3:高、中、低剂量扶正排毒片组和香菇多糖片组小鼠外周血淋巴细胞转化率高于模型组[分别为(60.9±5.0)%,(54.8±6.7)%,(49.3±5.9)%,(51.9±10.4)%,(32.5±4.5)%,P<0.01]。结论:扶正排毒片可显著促进氢化可的松所致免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,显著促进溶血素形成和空斑形成细胞,显著促进外周血淋巴细胞转化。

姜黄素对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化的影响

目的:脂肪细胞分化障碍是肥胖引发胰岛素抵抗的途径之一,观察中药姜黄提取物姜黄素对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化的影响,在细胞水平分析姜黄素防治糖尿病可能的机制。方法:实验于2005-12/2006-03在哈尔滨医科大学营养与食品卫生学教研室完成。以3T3-L1前脂肪细胞为靶细胞,在常规培养时,分别加入0,5,10,15,20,25,30,35,40,50,80和100μmol/L浓度的姜黄素(购自美国Sigma公司),每个剂量设12个平行孔,培养3d,在此期间,分别在24,48,72h时,于姜黄素各剂量组中分别选取4个平行孔,以MTT法测定其增殖情况。在诱导分化时,设一组空白对照,实验组与诱导液同步加入0,2.5,5,10,15和20μmol/L的姜黄素,于诱导分化的第6天,采用油红O染色方法测定3T3-L1前脂肪细胞分化程度。结果:①姜黄素作用3T3-L1前脂肪细胞48h,5,10μmol/L剂量组的细胞吸光度值与空白对照相比显著增加(0.67±0.01,0.69±0.02,0.57±0.01,P<0.01),15μmol/L剂量组细胞吸光度值与空白对照相比差异无显著性意义(0.54±0.01,P>0.05),其余剂量组(20,25,30,35,40,50,80和100μmol/L)细胞吸光度值显著降低(0.53±0.01,0.47±0.01,0.42±0.03,0.45±0.03,0.18±0.01,0.2±0.01,0.16±0.04,0.44±0.05,P<0.01)。②姜黄素作用细胞48h时,促进或抑制细胞增殖的作用最强,40μmol/L以上浓度的姜黄素出现细胞毒性作用,大部分细胞成片脱落死亡。72h时,15～35μmol/L姜黄素组细胞的生长率有所增加,而40μmol/L以下姜黄素处理组细胞生长率仍维持在较低水平。③脂肪细胞油红O染色分光光度法结果显示2.5,5,10,15和20μmol/L姜黄素剂量组的细胞吸光度值与空白对照相比显著增加(0.38±0.05,0.49±0.04,0.56±0.06,0.75±0.06,0.77±0.1,0.83±0.06,0.38±0.05,P<0.05～0.01)。结论:不同浓度姜黄素对3T3-L1前脂肪细胞具有促进增殖和抑制增殖双重作用,低浓度姜黄素促进细胞增殖,高浓度姜黄素抑制细胞增殖。姜黄素通过促进3T3-L1前脂肪细胞的分化,从而增加脂肪细胞对胰岛素的敏感性,这可能是其防治糖尿病的机制之一。

别隐品碱对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响

目的:观察中药伏生紫堇块茎夏天无中提取的生物碱别隐品碱对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响。方法:实验于2003-11/2005-09在解放军总医院老年心血管病研究所病理生理实验室完成。采用酶解法制备SD大鼠心室肌单细胞,采用全细胞膜片钳记录大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流。①保持电位-80mV,施予-40mV,20ms的预刺激失活钠通道,紧接着给予+50mV,300ms的去极化脉冲,记录外向钾电流。记录正常电流后,与细胞池灌流含别隐品碱的细胞外液,药物终浓度分别为3,10,30,100μmol/L,待药物浓度在细胞池稳定后记录电流的改变,观察瞬时外向钾电流对别隐品碱浓度依赖性。②保持电位-80mV,施予-40mV,20ms的预刺激,紧接着给予-40～+60mV,300ms的去极化脉冲,记录外向钾电流。记录正常电流后,与细胞池灌流含别隐品碱的细胞外液,药物终浓度为10μmol/L,待药物浓度在细胞池稳定后记录电流的改变。分别测量各膜电位下的瞬时外向钾电流,以各脉冲下电流幅值对相应膜电位作图得各电流Ⅰ-Ⅴ曲线。③保持电位-80mV,施予-40mV,20ms的预刺激,紧接着给予-40～+60mV,500ms的去极化脉冲,记录外向钾电流。记录正常电流后,与细胞池灌流含别隐品碱的细胞外液,药物终浓度为10μmol/L,待药物浓度在细胞池稳定后记录电流的改变。将各电位下电流换算成电导,以标准化电导对各膜电位作图得稳态激活曲线。④保持电位-80mV,施予-40mV,20ms的预刺激,紧接着给予-100～+20mV,1000ms的去极化脉冲,在每一条件脉冲后紧跟一固定去极化至+50mV,50ms的测试脉冲,记录瞬时外向钾电流。记录正常电流后,与细胞池灌流含别隐品碱的细胞外液,药物终浓度为10μmol/L,待药物浓度在细胞池稳定后记录电流的改变。以标准化电流对各膜电位作图得稳态失活曲线。结果:①去极化+50mV时,别隐品碱10μmol/L使瞬时外向钾电流从给药前的(21.3±4.6)pA/pF降至(16.4±3.3)pA/pF(P<0.01,n=19)。别隐品碱3～100μmol/L浓度依赖性地阻滞瞬时外向钾电流,IC50为12.7μmol/L(95%可信范围:9.7～15.5μmol/L)。②别隐品碱10μmol/L使各膜电位瞬时外向钾电流幅值降低,降低幅度Ⅰ-Ⅴ曲线上移,虽然各电压下降低幅度有所不同,但差异无显著性。③别隐品碱10μmol/L使激活曲线右移,V1/2从(-1.5±1.8)mV移至(8.9±2.6)mV(P<0.01,n=16),k值基本无变化,给药前为(13.9±2.2)mV,用别隐品碱后为(13.04±1.87)mV。④别隐品碱10μmol/L使曲线左移,V1/2从(-29.37±3.01)mV移至(-35.32±4.01)mV(P<0.05,n=16),给药前k值为(11.25±2.76)mV,用别隐品碱后为(9.94±1.48)mV,虽有差异但不显著(P>0.05,n=16)。结论:别隐品碱具有抑制心室肌细胞瞬时外向钾电流的作用。

活络健骨胶对大鼠佐剂性关节炎的抗炎免疫效应

目的:观察活络健骨胶囊对大鼠佐剂性关节炎的抗炎免疫作用。方法:实验于2005-12-25/2006-01-23在湖南环境生物学院医学部药理实验室完成。①将48只wistar大鼠采用随机数字法分成6组,正常对照组和模型组:均给予等量蒸馏水;阳性对照组:给予雷公藤多甙7mg/kg;活络健骨胶囊高、中、低剂量组:剂量分别为15,10,5g/kg。活络健骨胶囊为老中医祖传经验方(由制川乌、赤芍、桂枝10多味中草药组成,原料药购于衡阳药材公司,鉴定为合格品,实验药液由本实验制备)。造模前3d开始给药,造模后连续给药25d。给药途径为灌胃,给药体积为等容15mL/kg。②建立大鼠后右足佐剂性关节炎模型。③造模后第2,5,10,15,20,25d分别测各鼠右后足容积,计算各组大鼠右后足在不同时间的肿胀度。④每周观察大鼠体质量增长率及造模后26d计算脾、肾上腺指数。增长率=(给药后体质量-给药前体质量)/给药前体质量×100%;器官指数=器官湿重/大鼠体质量×100。⑤观察大鼠佐剂性关节炎渗出液中白细胞介素2,白细胞介素6及前列腺素E2含量。结果:48只大鼠全部进入分析。①活络健骨胶囊对大鼠体质量及脾、肾上腺素的影响:活络健骨胶囊高、中剂量组能抑制造模鼠体质量的减轻(P<0.01);对肾上腺指数有促进作用(P<0.05)。②活络健骨胶囊对大鼠佐剂性关节炎足跖肿胀的影响:活络健骨胶囊各剂量组对造模足跖有抑制作用,而中、高剂量组的抑制作用更显著(P<0.01)。③活络健骨胶囊对佐剂性关节炎渗出液中白细胞介素2、白细胞介素6及前列腺素E2含量的影响:活络健骨胶囊各剂量组对大鼠佐剂性关节炎中白细胞介素6及前列腺素E2的生成均有显著抑制作用(P<0.01),而对白细胞介素2的含量无明显影响。结论:活络健骨胶囊具有良好的抗炎免疫效果,其作用机制之一可能是与抑制单核吞噬细胞的激活、分化及介导有关。

茶色素对吗啡依赖小鼠和大鼠的戒毒作用

目的:观察茶叶中提取物茶色素对吗啡依赖小鼠和大鼠催促戒断症状的抑制作用并分析其可能的作用机制。方法:实验于2003-03/2004-03在大连医科大学药理教研室完成。选择昆明种小鼠110只;SD大鼠40只,将小鼠随机分为正常对照组(n=20)、吗啡依赖组(n=20)、茶色素高、中、低剂量组(n=20),左旋咪唑阳性对照组(n=10)。将所有大鼠随机分为正常对照组、吗啡依赖组、茶色素高、低剂量组,每组10只。所有动物均采用皮下注射吗啡的方法建立小鼠及大鼠吗啡依赖模型。采用催促戒断治疗试验测定10min内小鼠及大鼠出现的跳跃反应次数及潜伏期,比较跳跃反应前后1h的体质量变化,同时进行免疫功能测定,超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量的测定。结果:各实验组小鼠及大鼠全部进入结果分析。①催促戒断治疗试验结果:与小鼠吗啡依赖组比较,高剂量组的小鼠跳跃次数明显减少(P<0.05),高、中剂量组的小鼠跳跃反应潜伏时间均明显延长(P<0.05)。跳跃反应后,高剂量组体质量明显下降(P<0.05),与大鼠吗啡依赖组比较,大鼠茶色素高、低剂量组的戒断症状分值均明显降低,高剂量组的体质量明显下降。②吗啡依赖小鼠免疫功能的测定结果:与吗啡依赖组比较,茶色素高、中、低剂量组及左旋咪唑组的血清半数溶血值均有提高,并具有显著性差异(P<0.05),茶色素高、中剂量组及左旋咪唑组能显著提高小鼠对二硝基氟苯所致足掌肿胀值(P<0.01～0.05),茶色素高剂量组及左旋咪唑组的胸腺指数提高(P<0.05)。③超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量的测定结果:与正常对照组比较,吗啡依赖组小鼠超氧化物歧化酶活力明显降低,丙二醛含量明显升高(P<0.05)。与吗啡依赖组相比,茶色素高剂量组能显著提高小鼠的超氧化物歧化酶活力,中剂量组虽也提高了小鼠血清中超氧化物歧化酶活力但差异无显著性,高、中剂量组丙二醛含量显著降低(P<0.05),但低剂量组降低不明显。结论:茶色素对吗啡依赖小鼠及大鼠有戒毒作用,其作用可能与增强免疫功能和抗自由基作用有关。

柴胡黄芩配伍不同提取部位对大鼠急性酒精性肝损伤保护作用的比较

目的:以湿热气滞瘀阻为病机,从中医整体观念、肝胃同治出发,观察具有疏肝理气,清热燥湿功效的中药柴胡、黄芩不同提取部位对大鼠急性酒精性肝损伤的防治作用。方法:实验于2004-08/12在河南中医学院中药学实验室完成,取健康Wistar大鼠84只,分为正常组、模型组、石油醚组,乙酸乙酯组,正丁醇组,水提取物组,当飞利肝宁胶囊组共7组,每组12只。柴胡黄芩药液制备:柴胡120g、黄芩240g混匀,经700mL/L乙醇两次连续回流提取,过滤,浓缩成浸膏;将浸膏依次用石油醚、乙酸乙酯、水饱和的正丁醇萃取,回收有机溶剂,低温烘干;用50mL/L聚山梨酯80配成浓度为0.9g/mL的溶液,使用时将上述药液按所需浓度稀释。当飞利肝宁胶囊,以当药、水飞蓟提取物配伍组成,四川美大康药业股份有限公司生产(批号040102)。各组大鼠除正常对照组(以等体积的蒸馏水灌胃)外,其余各组均予560mL/L乙醇造急性酒精性肝损伤模型。自造模第1天起,正常组和模型组灌服等体积的蒸馏水(含聚山梨酯80),其余各组分别灌胃给予相应的药液,剂量皆为12g/kg穴10mL/kg雪,2次/d,连续10d。通过对一般状况、脏器指数的比较,胃粘膜一氧化氮、内皮素含量的测定,胃组织病理形态学变化观察,从整体调节角度阐述柴胡黄芩配伍抗急性酒精性肝损伤的作用。结果:灌胃操作不当死亡3只,酒精中枢抑制作用和消化系损伤死亡11只,最终共70只纳入结果分析。正常组12只,模型组9只,石油醚组9只,乙酸乙酯组10只,正丁醇组10只,水提取物组10只,利肝宁胶囊组10只。①与正常组比较,模型组大鼠脾脏指数、胸腺指数、肾上腺指数均显著降低(t=4.830,2.903,4.544,P<0.01)。正丁醇组与模型组比较,胸腺指数、肾上腺指数均有显著升高穴t=3.326,2.847,P<0.01～0.05雪;利肝宁胶囊组与模型组比较,脾脏指数、胸腺指数、肾上腺指数均明显升高穴t=3.430,4.842,4.436,P<0.01雪。②各组大鼠之间胃组织一氧化氮的含量无显著变化。模型组与正常对照组比较,胃组织内皮素含量显著升高穴t=4.292,P<0.01雪;正丁醇组和利肝宁胶囊组能降低胃组织中升高的内皮素含量,与模型组比较,趋于正常(t=2.214,2.272,P<0.05)。③模型组大鼠胃粘膜下层充血,粘膜上皮细胞近胃腔部腺上皮脱落。各给药组胃粘膜病理形态学改变明显恢复,尤以正丁醇组和利肝宁胶囊组作用显著,基本趋于正常组织。结论:柴胡黄芩配伍后可改善机体一般情况,调整机体的内分泌和免疫系统,尤以正丁醇萃取作用显著,降低乙醇引起的内皮素水平升高对胃粘膜起到保护作用。