闪光放射治疗对比常规放射治疗在放射性肺损伤中的机制探索

放射治疗是治疗肺癌的重要手段,但容易造成肺部损伤并降低患者生活质量。闪光放射治疗(Flash-RT)因其极短的辐射时间和高剂量率备受关注,其在保证肿瘤治疗强度的同时,能够减少正常组织毒性反应。Flash-RT能否减少放射性肺损伤成为近年重点研究课题。本综述基于文献分析方法,通过检索国内外相关文献,系统评估Flash-RT与常规剂量率放射治疗对肺损伤的影响及其机制。通过综述Flash-RT与常规剂量率放射治疗对肺损伤的影响及其机制对比,为肺癌患者的治疗提供科学依据。Flash-RT与常规剂量率放射治疗相比,可以显著减少肺损伤并提高患者生活质量。未来仍需深入探索Flash-RT的机制,开发适用于不同肿瘤的Flash-RT装置和开展大规模临床研究。

X射线激活氧化应激诱导DNA损伤及HaCaT发生细胞早衰研究

目的:探索不同剂量X射线照射人永生化角质形成细胞(HaCaT)后导致细胞氧化应激水平变化、DNA损伤及细胞早衰的发生。方法:对HaCaT进行X射线照射,根据照射剂量将其分为0 Gy组、5 Gy组和10 Gy组,使用2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,并用比色法测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。利用免疫荧光染色检测不同剂量X射线照射后HaCaT中的磷酸化组蛋白2A变异体(γ-H2AX)焦点变化。使用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)试剂盒检测不同剂量X射线照射HaCaT后对细胞增殖的影响,采用β-半乳糖苷酶染色检测早衰细胞比例。利用蛋白免疫印迹法检测X射线照射后p21、p53蛋白表达变化。结果:X射线照射HaCaT后24 h,5 Gy组、10 Gy组均较0 Gy组2',7'-二氯荧光素(DCF)荧光强度显著增加,MDA含量较0 Gy组显著升高,而SOD活性较0 Gy组显著下降,3组比较差异均有统计学意义(F=38.35、92.22、5.22,P<0.05)。照射后1 h,γ-H2AX焦点变化呈剂量依赖性显著增加,与0 Gy组相比差异均有统计学意义(F=129.3,P<0.05)。X射线照射HaCaT后6、24和48 h,5 Gy组、10 Gy组均较与0 Gy组相比细胞增殖能力降低,3组比较差异均有统计学意义(F=116.41、62.20、34.29,P<0.01),β-半乳糖苷酶活性增高,其差异均有统计学意义(F=1629.22,P<0.01)。不同剂量X射线照射HaCaT后72 h,5 Gy组和10 Gy组p21、p53蛋白表达量升高,3组比较差异均有统计学意义(F=104.4、66.69,P<0.01)。结论:电离辐射可诱导HaCaT细胞发生氧化应激和DNA损伤同时引起细胞早衰的发生。

大分割放射治疗不同瘤床补量技术对乳腺癌保乳术后放射性损伤的评价研究

目的:对比分析乳腺癌保乳术后患者大分割放射治疗中瘤床同步补量与序贯瘤床补量两种技术发生急性和(或)晚期乳房相关放射性损伤、美容效果及近期疗效的差异性,以提高乳腺癌保乳术后大分割放射治疗的安全性和有效性。方法:选取在医院行乳腺癌保乳术后大分割放射治疗的109例女性患者,根据瘤床补量技术的不同,将其分为观察组(56例)和对照组(53例),观察组行瘤床同步补量调强放射治疗(SIB-IMRT),对照组行全乳调强放射治疗(IMRT)后序贯瘤床电子线补量放射治疗。对两组患者急性放射性皮肤损伤、放射治疗结束2年后皮肤及皮下组织放射性损伤、放射治疗结束1个月和2年后美容效果以及近期疗效分别进行比较。结果:放射治疗后109例患者急性放射性皮肤损伤主要为≤1级(占91.7%),放射治疗结束2年后皮肤及皮下组织放射性损伤主要为≤1级(占86.2%),放射治疗结束1个月和2年后美容效果优良率分别为87.2%(95/109)和90.8%(99/109),2年局部肿瘤控制率、无疾病生存率均为100%。两组患者在放射治疗结束2年后出现皮肤及皮下组织放射性损伤、放射治疗结束1个月和2年后美容效果及近期疗效均无统计学差异。观察组患者≥2级急性放射性皮肤损伤发生率为1.8%(1/56),明显低于对照组[15.1%(8/53)],差异有统计学意义(x^(2)=6.367,P<0.05)。结论:乳腺癌保乳术后大分割放射治疗的安全性和疗效较好,应用瘤床同步补量技术更能够降低2级以上急性放射性皮肤损伤的发生率,可优先选择该方式治疗。

介质阻挡放电低温等离子体降解甲基红模拟染料废水的研究

利用介质阻挡放电低温等离子体技术对甲基红模拟染料废水进行降解研究,降解反应在同心管式反应器中进行。考察了放电功率、溶液初始浓度、初始pH、处理时间、气氛条件等单因素的改变对甲基红降解效果的影响,通过测定甲基红521 nm处的吸光度值、溶液pH及颜色变化,分析了甲基红降解历程,并推测了降解机理。研究结果表明:在本实验中,溶液在115 W低放电功率下的处理效果更好,由于处理效果受温度、湿度等影响,放电功率与处理效果间并不呈正相关关系;溶液的初始浓度越高,达到同样的降解效果所需的时间越长;相同条件下,模拟废水的初始pH越低,其处理后的降解效果越好,即酸性条件下更有利于甲基红断键降解。

通过PI3K/Akt信号通路调控p21对放射性肺损伤的防护作用

目的探讨通过PI3K/Akt信号通路调控p21对放射性肺损伤的防护作用。方法将56只雄性C57BL/6小鼠分为对照组、10Gy组、10Gy+LY294002组、15Gy组、15Gy+LY294002组、20Gy组、20Gy+LY294002组。照射14d后取材,用HE染色法观察肺组织病理变化,用IHC法检测p21蛋白表达水平,用RT-PCR法检测p21mRNA表达水平,用WesternBlot法检测p21、PI3K、p-Akt蛋白表达水平。结果HE观察结果显示,与对照组相比,单纯照射组随着照射剂量增加,小鼠肺损伤加重;与单纯照射组相比,同剂量照射+LY294002组肺损伤减轻。IHC、RT-PCR、WesternBlot检测结果显示,与对照组相比,各单纯照射组小鼠肺组织p21、PI3K、p-Akt蛋白表达水平升高(P<0.05);与单纯照射组相比,同剂量照射+LY294002组小鼠肺组织p21、PI3K、p-Akt蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论通过抑制PI3K/Akt信号通路,降低小鼠肺组织p21表达水平,对小鼠放射性肺损伤发挥防护作用。

铜离子转运蛋白参与辐射损伤的调控作用及其机制的研究进展

铜离子转运蛋白(CTR)是一系列参与机体铜离子吸收、转运、利用、贮存和清除等铜离子稳态调控的复杂体系,在铜离子参与调控氧化应激、能量产生、黑色素形成、神经肽生物发生和结缔组织成熟等过程中发挥重要作用。电离辐射诱导CTR表达的改变影响了铜离子在细胞中的分布,电离辐射诱导的细胞和组织中铜离子积聚伴有高亲和力铜离子转运蛋白1 (CTR1)表达水平明显升高以及铜外排转运蛋白铜离子转运ATP酶α肽(ATP7A)表达水平降低,进而激活胞内氧化还原反应,加重正常组织的辐射损伤。铜死亡是一种新的细胞死亡方式,目前已成为研究热点,CTR可促进电离辐射后铜死亡的发生,推测辐射引起CTR1表达上调和ATP7A降解进而导致细胞辐射敏感性增加可能通过铜死亡途径介导,提示放射损伤的发生发展与CTR介导的铜离子稳态调控有密切关联。现对几种关键铜稳态蛋白及其之间的相互作用、CTR介导的铜离子稳态调控在正常组织辐射损伤中发挥的生物学作用和调控机制及与铜死亡的关系进行全面综述,为正常组织辐射损伤的治疗提供新策略。

EGCG辐射保护作用的研究

采用MTT方法和脉冲场凝胶电泳方法 ,以人肝L0 2细胞株为研究对象 ,对没食子儿茶素没食子酸脂 (epigallocatechingallate ,EGCG)的辐射保护作用进行了研究。MTT结果表明 ,EGCG在 5— 5 0 μmol/L的浓度下 ,对细胞有明显的保护作用 ,并对细胞的修复有促进作用 ;脉冲场凝胶电泳方法结果显示 ,EGCG作用可减少辐射所致的DNA双链断裂水平。

含MT蛋奶粉对小鼠辐射损伤的保护作用

目的:研究含金属硫蛋白(MT)蛋奶粉对小鼠电离辐射损伤的保护作用。方法:小鼠受2.5Gy(12.5mGy·min-1)X射线照射后,灌胃给予含MT蛋奶粉,连续14d后检测外周血白细胞数、淋巴细胞增殖率、股骨骨髓细胞DNA含量、胸腺细胞周期进程以及肝脏和肾脏丙二醛(MDA)含量和抗氧化酶(SOD、CAT和GSHPx)活性。结果:受照射小鼠给予含MT蛋奶粉后,尤其是含中高剂量MT蛋奶粉组,白细胞数、淋巴细胞增殖率和股骨骨髓细胞DNA含量明显高于辐射对照组(P<0.01);含MT蛋奶粉加照射组胸腺细胞G0/G1期细胞数明显低于辐射对照组(P<0.01),S期和G2/M期细胞数明显高于辐射对照组(P<0.01或P<0.05);照射组小鼠肝脏和肾脏MDA含量较正常对照组显著增加(P<0.01或P<0.05),抗氧化酶SOD、CAT和GSHPx活性则较正常对照组显著降低(P<0.01或P<0.05),而含MT蛋奶粉加照射组与辐射对照组比较,肝脏和肾脏MDA水平明显降低(P<0.01),抗氧化酶SOD、CAT和GSHPx活性显著增高(P<0.01或P<0.05)。结论:含MT蛋奶粉可明显改善X射线照射对小鼠的损伤效应,具有保护作用。

放射性肺损伤肺成纤维细胞的活化机制研究

目的通过研究大鼠放射性肺损伤模型,探讨肺成纤维细胞在放射性肺损伤的作用及机制,为临床预防和治疗放射性肺损伤提供新的思路。方法建立Wistar大鼠半胸照射的放射性肺损伤实验动物模型,35只Wistar大鼠常规分为A～F、N组共7组,每组5只大鼠。A～F组在接受相同剂量照射后分别在放疗后1d,1、2、4、8和12周处死,N组在实验第1天处死作为正常对照组,分别以免疫组化检测双侧肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果照射后照射野内肺成纤维细胞(FB)免疫组化α-SMA呈强阳性,与对照组有显著差异(P=0.001);对侧未照射肺组织也可见散在分布梭形样形态的间质细胞,α-SMA阳性表达且与正常对照组有显著差异性(P=0.001)。结论肺内成纤维细胞无论射野内或射野外肺FB照射后均活化成为功能活跃的肌纤维母细胞(MF),由此猜测具有增殖和分泌活性的MF可能有部分来源于肺外,通过血液传递分布于肺组织照射野内或野外,可能参与了淋巴细胞性放射性肺损伤的发生。

γ射线与微波复合作用对小鼠造血系统功能及形态学的影响

目的探讨γ射线和微波复合照射对造血系统的损伤特点及规律,为进一步研究其损伤机制提供理论和实验基础。方法216只雄性昆明小鼠随机分为对照组、γ射线照射组(5·5Gy,简称射线组)、微波照射组(50mW/cm2,简称微波组)及γ射线与微波复合照射组(5·5Gy+50mW/cm2,简称复合组)。60Coγ射线(剂量率为91·1cGy/min)全身一次性照射后立即进行微波全身辐照(S波段,平均功率密度为50mW/cm2)5min。分别于照射后6h及1、3、7、14、28、90、180天活杀取材,观察胸骨骨髓组织学变化,并采股静脉血行常规检测,同时对复合照射后6h及第1、3、7天的胸骨骨髓进行超微结构观察。结果组织学观察发现无论γ射线还是复合照射均可导致骨髓组织经历典型的凋亡坏死、空虚、再生修复及恢复4个阶段的病理改变,但复合组的病变重于射线组,恢复也更为迟缓。外周血象检查发现小鼠经γ射线及复合照射后白细胞、红细胞、血小板数和血红蛋白含量均呈进行性下降,于照射后期逐渐恢复,但复合组比射线组下降更明显,恢复也更缓慢。超微结构观察发现复合照射后骨髓造血细胞出现明显的变性、凋亡及坏死等改变,以照射后6h最明显。结论一定剂量的γ射线和一定强度的微波复合照射可严重损伤小鼠造血系统,表现为骨髓组织发生明显的形态学改变和功能障碍,其损伤效应主要以γ射线为主,微波在一定程度上加重了γ射线的损伤。

天然活性成分抗辐射作用的研究进展

辐射容易对人的免疫系统、造血系统和生殖系统产生损伤。常用的含硫辐射防护剂毒副作用较大,通常只有在受到辐射前服用才会产生作用。近年研究发现,天然产物中的活性成分黄酮类、多糖类和皂苷类等对受到辐射的动物和人细胞具有良好的防护作用。本文通过查阅近年的相关文献资料,总结了天然活性成分抗辐射作用的研究进展。

放射复合伤口中Bax和Bcl-2蛋白表达与细胞凋亡的关系研究

目的 :研究 Bax和 Bcl 2蛋白在放射复合伤口愈合中的表达及其与细胞凋亡的关系。方法 :用原位末端标记 (TU NEL)法检测细胞凋亡 ,用免疫组织化学方法检测 Bax、Bcl 2蛋白表达。结果 :(1)与单伤组比较 ,照射后细胞凋亡的变化具有出现较早、频度较高、消失推迟 3个显著特点 ,可能是导致辐射延迟伤口愈合的重要原因。 (2 )观察伤口愈合过程中 Bax、Bcl 2蛋白表达及其与细胞凋亡的关系 ,发现随着细胞凋亡的增加 ,Bax蛋白的表达明显增强 ,并且与细胞凋亡发生频度具有良好的相应关系。而 Bcl 2蛋白水平在细胞凋亡达高峰时呈明显下降趋势 ;当凋亡明显下降时 ,Bcl 2蛋白表达增加 ,并逐渐恢复其正常水平。结论 :Bax和 Bcl

外源性rhEGF对放射复合创伤伤口愈合的促进作用

采用宏观、光镜、免疫组化 (显示Ⅲ型胶原 )和原位杂交 (检测Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA)等方法 ,动态观察外用rhEGF对大鼠放射复合创伤伤口愈合病变过程的影响。结果表明 :①rhEGF可促进放射复合伤口内肉芽组织的形成。伤后 7天见rhEGF用药创面肉芽组织含量较对照创面明显增多。②rhEGF可促进血管生成。伤后 7天见EGF用药创面肉芽组织中有较对照创面明显增多的新生毛细血管网。③应用rhEGF可间接增加Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成和分泌。④rhEGF可促进表皮重建 ,使用药创面较对照创面提前约 2天愈合。

放射损伤及放烧复合伤对小肠上皮损害的量效研究

用２８７只小鼠分别以变动照射剂量（８～２６Ｇｙ，８个剂量）和固定烧伤深度（１５％Ⅲ°），变动烧伤面积（５％、１０％、２５％Ⅲ°）和固定照射剂量（１２Ｇｙ）致放烧复合伤（放烧），与同剂量单纯放射损伤（单放）相对比，以小肠隐窝计数和氚－胸腺嘧啶脱氧核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）参入量为基本指标，结果说明放烧和单放时肠上皮效应与致伤因素间存在肯定而显著的量效关系，提出了系列数据和公式。照射剂量是决定效应的主要因素。发现１２～１６Ｇｙ照射复合１５％Ⅲ°烧伤和１２Ｇｙ复合３种烧伤伤情，均显示放烧的肠上皮修复较同剂量单放为好，剂量修饰系数（ＤＭＦ）为１．２０，进一步证实了一定程度烧伤有促进放射损伤肠上皮再生期的修复作用。１８～２６Ｇｙ照射后，几乎无存留肠上皮干细胞对烧伤因素产生反应。

鳖甲粗多糖预防辐射损伤效应的初步研究

研究了口服鳖甲粗多糖对受照射小鼠外周血白细胞数、巨噬细胞吞噬功能以及外周血淋巴细胞微核的影响。结果表明：预防口服３ｄ鳖甲粗多糖，可明显升高受６ＧｙＸ照射小鼠的外周血白细胞总数，显著提高吞噬百分率，消化百分率及吞噬指数，并能降低外周血淋巴细胞微核率。提示：鳖甲粗多糖具有良好的减轻放射损伤作用，临床应用前景广阔。

放射延迟伤口愈合机制的初步研究

目的 :初步探索放射延迟伤口愈合的机制。方法 :用光镜、电镜及原位末端标记法并结合图像分析技术 ,观察大鼠单纯创伤组和放射复合创伤组伤口病理形态学、伤口面积和伤口区细胞数量、细胞凋亡等方面的变化。结果 :(1)照射后伤口愈合 :早期炎症反应明显受抑 ,创面渗出物减少 ,出血、坏死明显 ;中期肉芽组织生长成熟减慢 ,伤口收缩受到抑制 ;后期上皮覆盖滞后 ,与单伤组相比愈合时间明显延长。伤口面积测定显示 :在伤口愈合过程中伤照组面积始终大于单伤组。 (2 )肉芽组织中细胞数量测定 :照射后伤口区细胞数量的增多明显滞后于单伤组 ,部分成纤维细胞出现变性、坏死。(3)细胞凋亡在伤口愈合中的发生规律分析 :与单伤组相比 ,伤照组细胞凋亡出现较早、频度较高、消失推迟。结论 :大剂量辐射确实可延迟伤口愈合 ;辐射后细胞数量、形态及功能异常 ,尤其是细胞凋亡发生过度 。

鼻咽癌放疗后脑神经损伤的MRI表现

目的探讨鼻咽癌放疗后脑神经损伤的原因及其MRI表现。方法选择临床和MRI资料完整的36例患者进行回顾性分析,采用1.5T MR行头颅、鼻咽部横轴位、冠状位和矢状位平扫以及增强扫描成像,对MRI图像进行分析。结果①脑神经第Ⅵ、Ⅴ、X、Ⅻ对损害占前四位;②鼻咽癌局部复发引起脑神经损伤17例,单纯放射性神经损害12例,复发与放射性脑病并存的7例。结论鼻咽癌放疗后脑神经损伤有肿瘤复发、放射性脑病和两者共存三方面原因。MRI检查能早期、准确显示脑神经损伤。

胰高血糖素样肽-2对放射损伤小鼠肠上皮恢复的影响

目的 探讨胰高血糖素样肽 2对放射损伤小鼠肠上皮恢复的影响。方法 昆明种小鼠经 8Gy60 Coγ射线一次性全身照射后随机分为放射损伤对照组和胰高血糖素样肽 2处理组 ,检测小肠粘膜组织DNA和蛋白含量 ,光镜和扫描电镜观察肠上皮形态结构变化。结果 放射损伤后小肠粘膜组织DNA和蛋白含量降低 ,肠绒毛高度下降、数量减少 ,部分绒毛顶端有糜烂缺损 ;胰高血糖素样肽 2处理可使肠粘膜组织DNA和蛋白含量增加 ,肠绒毛增长、数量增多 ,糜烂发生不明显。结论 胰高血糖素样肽

大豆复合物对γ射线辐射损伤防护作用

目的探讨大豆复合物对γ射线照射小鼠的辐射防护效应。方法清洁级雄性昆明小鼠分3批,每批按体重随机分为假照射组、照射模型组、大豆复合物低剂量组及大豆复合物高剂量组。各受试物组小鼠经口灌胃各组受试物,连续30d后用60Co-γ射线进行1次全身照射,照射后仍然给予受试物。第1批实验除假照射组外,均以3.0Gy照射剂量γ射线全身照射1次,分别于照射后第3d,第14d检测外周血白细胞数。第2批实验除假照射组外,均以5.0Gy剂量全身照射1次,于照射后第3d测定骨髓有核细胞数和骨髓细胞微核率。第3批实验除假照射组外,均以7.0Gy剂量全身照射1次,于照射后第7d,测定红细胞与肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果(1)照射后第3d和第14d,大豆复合物高剂量组和低剂量组小鼠的外周血白细胞数分别高于照射模型组(P<0.05);(2)各受试物组小鼠的骨髓有核细胞数均高于照射模型组(P<0.05),骨髓细胞微核率低于照射模型组(P<0.05);(3)与照射模型组比较,不同剂量的大豆复合物均可明显提高小鼠红细胞和肝脏SOD活性(P<0.05),降低血浆MDA水平(P<0.05)。结论大豆复合物能在一定程度上阻止由辐射引起的外周血白细胞和骨髓有核细胞数下降,减少微核产生,提高受照射小鼠的抗氧化能力,减轻辐射对机体的损伤。

放射性肺损伤中核因子κB和细胞间黏附分子1的表达及意义

目的探讨放射性肺损伤中核因子κB(NF-κB)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达情况及其在放射性肺损伤发生发展过程中的作用机制。方法实验对象为Wistar大鼠,照射组接受X线照射(分为15 Gy照射组和20 Gy照射组),未照射组不接受照射。照射后饲养28 d,通过免疫组化法测定NF-κB和ICAM-1的表达,免疫组化染色利用计算机图像分析系统进行定量测定。结果 NF-κB在未照射组少量表达,在15 Gy照射组和20 Gy照射组中表达均增强,与未照射组相比差异均有统计学意义(均P<0.001),且2个照射组比较NF-κB表达的差异有统计学意义(P<0.001)。未照射组ICAM-1几乎不表达,15 Gy照射组和20 Gy照射组与未照射组相比ICAM-1表达增强,差异均有统计学意义(均P<0.001),但2个照射组比较ICAM-1表达无统计学差异(P>0.05)。结论 NF-κB和ICAM-1是导致急性放射性肺损伤的重要因素。通过减少NF-κB的活化调控ICAM-1的表达,可能减少放射性肺损伤,这为放射性肺损伤的预防和治疗可能提供新的治疗靶点。