口服雷奈酸锶与胶原肽对尾吊大鼠骨丢失的抑制效应

目的观察口服雷奈酸锶(strontium ranelate,SR)与胶原肽(collagen peptides,CP)对尾吊(tail supended,TS)大鼠骨丢失的抑制效应。方法雄性SD大鼠24只随机平均分为3组:对照组(CN),尾吊模拟微重力组(TS),模拟失重同时给予SR和CP各750 mg/kg灌胃组(SR&CP),各组实验期均为28 d。采用全自动生化分析仪检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)含量,放射免疫法检测骨钙素(osteocalcin,OC)含量;Micro-CT分析骨微结构;Masson染色观察骨胶原纤维;双能X线(dual energy X-ray absorptiometry,DXA)检测股骨骨密度(bone mineral density,BMD)。结果 TS大鼠补充SR和CP显示骨保护作用:抑制TS诱导的血清ALP和OC含量的降低,改善骨微结构;显著抑制TS组大鼠股骨BMD的降低。结论口服SR和CP能明显抑制TS大鼠的骨丢失,从而为微重力环境下骨丢失的防治提供了实验依据。

牛骨胶原蛋白肽促进HOB增殖

目的研究牛骨胶原蛋白肽(Bovine Collagen peptides,BCP)对人成骨细胞(Human Oseoblast,HOB)增殖的影响。方法分离培养HOB,茜素红染色鉴定HOB的成骨特性,利用MTT实验检测胶原蛋白肽对HOB的增殖,流式细胞仪测定胶原蛋白肽对HOB细胞周期。结果茜素红矿化染色结果表明,HOB具有成骨能力。MTT实验表明0.3 mg/ml胶原蛋白肽能显著促进细胞的增殖,并能增加G2+S期的百分含量。结论牛骨胶原蛋白肽能够促进HOB增殖,为骨质疏松的预防和治疗提供理论依据。

骨胶原肽与柠檬酸钙对去卵巢大鼠骨丢失的预防及治疗效果

目的将牛骨胶原肽(collagen peptides,CP)与柠檬酸钙(calcium citrate,CC)联用给去卵巢(ovariectomy,OVX)大鼠进行灌胃以评价对OVX大鼠骨丢失预防及治疗是否比单独给药更有效。方法将80只12周龄Sprague-Dawley大鼠分为预防(术后2周开始灌胃,1次/d,连续3个月)及治疗(术后3个月开始灌胃,1次/d,连续3个月)2种给药方案,每种给药方案分为以下5组(n=8):假手术组(Sham),去卵巢组(OVX),OVX大鼠服用CP组(750 mg/kg CP),OVX大鼠服用CP(750 mg/kg)和CC(75 mg/kg),去卵巢大鼠服用CC(75 mg/kg)。采用全自动生化分析仪检测血清碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)含量,放射免疫法检测血清骨钙素(osteocalcin,OC)含量,双能X射线骨密度仪(dual energy X-ray absorptiometry,DXA)检测大鼠股骨骨密度(bone mineral density,BMD),骨生物力学测定股骨生物力学指标。结果CP-CC处理预防及治疗组OVX大鼠后呈现出骨保护效果:显著抑制OVX大鼠增加的血清ALP含量,显著抑制OVX大鼠股骨BMD的降低,显著抑制治疗组OVX大鼠股骨断裂强度的降低(P<0.05)。CP处理OVX大鼠CP后,显著抑制OVX大鼠增加的血清ALP含量,显著抑制治疗组OVX大鼠股骨BMD的降低;CC处理OVX大鼠后,显著抑制预防组OVX大鼠股骨BMD的降低,股骨断裂强度显著增加(P<0.05)。结论柠檬酸钙对去卵巢大鼠骨丢失预防具有抑制效果,而骨胶原肽联合柠檬酸钙对去卵巢大鼠骨丢失预防及治疗具有更好的效果,该结果为绝经后骨质疏松妇女骨丢失的防治提供了理论依据。

尾悬吊模拟失重大鼠卵巢组织中缺氧诱导因子-1α表达变化

目的研究模拟失重环境下大鼠卵巢组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达变化。方法取性成熟期健康雌性Wistar大鼠60只作为研究对象,体重200±20g,随机分为10组(n=6),按模拟失重时相分为悬吊0.25、0.5、1、2、3、5、7、14、21d组和0d组(对照组)。采用尾悬吊法建立模拟失重动物模型。各组大鼠卵巢组织中HIF-1α的表达分别应用免疫组织化学和RT-PCR方法进行检测。结果各实验组及对照组大鼠卵巢卵泡卵母细胞、颗粒细胞和膜细胞中均可见HIF-1α阳性染色细胞。对照组大鼠卵巢HIF-1α染色阳性颗粒主要位于细胞质中,悬吊0.25d和0.5d组大鼠卵巢卵母细胞、颗粒细胞和膜细胞的HIF-1α颗粒由细胞质向细胞核转移;尾悬吊1d组HIF-1α表达情况与对照组接近,HIF-1α核染色消失。尾悬吊0.25d、0.5d大鼠卵巢HIF-1αmRNA表达水平显著高于对照组(P<0.05),持续尾悬吊1d以后各组卵巢HIF-1α的蛋白和mRNA水平逐渐恢复至对照组水平。结论尾悬吊模拟失重使大鼠卵巢组织中HIF-1α蛋白及mRNA表达发生明显变化,早期同步过表达,提示卵巢HIF-1α表达变化与失重应激反应和失重耐受有密切关系。

牛骨胶原肽对成骨细胞分化的影响

目的研究3 mg/ml牛骨胶原肽(Bovine collagen peptides,BCP)对人成骨细胞(Human osteoblast,HOB),小鼠前成骨细胞系MC3T3分化的影响。方法 Western blot检测MC3T3细胞中BCP对Runx2表达的影响;分离培养HOB,利用对硝基苯磷酸比色法检测3 mg/ml BCP对碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)含量的影响;骨钙素(osteocalcin,OC)ELISA法测定BCP对OC含量的影响;茜素红矿化染色检测BCP对HOB矿化,然后用5%高氯酸进行脱色,用吸光度法检测BCP对人成骨细胞矿化程度。结果 Western blot检测表明,14 d后BCP处理的MC3T3细胞中Runx2蛋白表达水平(0.178±0.201)与CN组(0.146±0.582,P>0.05)比较,有增高趋势。ALP染色结果表明,BCP混合物处理组的ALP的染色面积(33859±8221)在第10d与CN组(19900±2796)相比,显著增加(P<0.05),表明BCP混合物能促进人成骨细胞早期的ALP表达量。BCP混合物处理组的OC吸光度值(0.137±0.014)在第14d高于CN组(0.086±0.023,P<0.05),表明BCP混合物能促进人成骨细胞晚期阶段的OC含量。茜素红矿化染色结果表明,3mg/ml BCP能显著促进HOB的矿化骨基质的形成。当使用5%的高氯酸脱色后,BCP处理组在490 nm处测吸光度值(0.579±0.093)显著高于CN组(0.193±0.021,P<0.01),表明BCP混合物能促进人成骨细胞的矿化。结论 BCP在成骨细胞分化和矿化骨基质的形成中发挥了积极作用。综合上述结果,本文为BCP混合物在骨关节炎和骨质疏松症潜在的预防和治疗提供了分子机理。

血清γ-干扰素诱导蛋白10在活动性肺结核患者中的诊断价值

目的探讨血清γ-干扰素诱导蛋白10(IP-10)在活动性肺结核患者中的诊断价值。方法选择新疆医科大学第一附属医院2017年1-12月收治的活动性肺结核病初诊患者72例(活动性肺结核组);另将本院呼吸科同期住院的肺炎、肺癌和肺气肿等其他肺部疾病患者列为非结核呼吸病组;对照组30例,来源于同期来本院的健康体检者。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测3组血清IP-10,实际操作按说明书要求进行。血清T-SPOT的检测按T-SPOT.TB试剂盒操作规范进行。结果 3组IP-10和IFN-γ水平之间差异有统计学意义(P<0.05)。活动性肺结核组IP-10以及IFN-γ经检验均明显高于非结核呼吸病组和对照组(P<0.05),但健康对照组和非结核呼吸病组组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。经相关性检验,活动性肺结核组IFN-γ及IP-10水平呈正相关关系(r=0.154,P=0.004)。IFN-γ与IP-10 2个指标诊断活动性肺结核的ROC曲线下面积为0.927和0.975。IFN-γ和IP-10诊断活动性肺结核的灵敏度分别为90.5%和95.9%,特异度分别为92.3%和97.1%。以对照组和非结核呼吸病组为对照,血清IP-10检测活动性肺结核的敏感性和特异性(95.5%、97.1%)高于血清T-SPOT的敏感性和特异性(75.4%、72.6%),同时也高于IFN-γ的敏感性和特异性(90.5%,92.3%)。结论采用ELISA检测血清IP-10水平,操作方法简便,质量控制明确,敏感性和特异性均呈较高水平,今后可进一步扩大样本证实其敏感性与特异性,为活动性肺结核的快速诊断提供理论依据。

肺结核患者血清差异表达环状RNA的筛选

目的探讨结核病患者血清差异表达环状RNA(circRNA)的筛选。方法收集肺结核患者(病例组)及健康对照者(对照组)各3例,利用表达谱芯片将病例组和对照组的全血circRNA进行检测并筛选差异表达的circRNA,将circRNA的差异基因通过基因本体(GO)富集分析和信号通路的显著性分析筛选出结核病差异基因。结果本研究发现3000个上调circRNA,2484个下调circRNA。具备差异特性的circRNA 835个(P<0.05),其中上调的circRNA 249个,下调的circRNA 586个。GO富集分析表明差异基因主要富集在突触间隙中乙酰胆碱分解代谢过程、对水浸抑制应力酸受体信号通路、受体循环调节、细胞外基质分解等生物学过程。信号通路的显著性分析表明差异基因主要参与阿尔茨海默氏病、子宫内膜癌、甲状腺癌、结核、噬菌体、系统性红斑狼疮、FcγR介导的吞噬作用等信号通路调节。结论结核病患者血清中存在差异表达的circRNA,差异circRNA通过其靶基因参与多个生物学过程和信号通路调节。