目的探究线粒体钙单向转运体(mitochondrial calcium uniporter,MCU)在模拟失重状态下对巨噬细胞极化的调控作用及其机制。方法体外培养小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow derived macrophage,BMDM),采用配对比较法将野生型(wild ty pe,...目的探究线粒体钙单向转运体(mitochondrial calcium uniporter,MCU)在模拟失重状态下对巨噬细胞极化的调控作用及其机制。方法体外培养小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow derived macrophage,BMDM),采用配对比较法将野生型(wild ty pe,WT)小鼠的BM DM分为2D回转模拟失重组和同步对照组,2D回转模拟失重组细胞在2D细胞回转仪中回转24 h模拟失重效应,同步对照组细胞在2D细胞回转仪中静置24 h;按照小鼠基因型将2D回转模拟失重的细胞分为LysM Cre、MCU f l/f l与同窝对照MCU f l/f l组,2组均在2D细胞回转仪中回转24 h模拟失重效应。采用实时荧光定量核酸扩增检测系统(realtime quantitative PCR detecting system,Q-PCR)和流式细胞术检测BMDM向M1、M2型巨噬细胞极化的能力;蛋白免疫印迹检测B M D M在模拟失重状态下巨噬细胞线粒体融合分裂蛋白的表达水平;实时荧光定量核酸扩增检测系统检测B M D M线粒体D N A拷贝数;转染线粒体特异性绿色荧光钙质粒Ad-4 m t-G C a M P 6检测B M D M线粒体钙信号;D C F H-DA活性氧探针检测BMDM活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果在24 h回转模拟失重处理后,WT小鼠的BMDM向M1型巨噬细胞极化的能力减弱(t=6.409、4.800、7.808、6.506,P均<0.01),向M2型巨噬细胞极化的能力增强(t=3.265、4.458,P均<0.05);线粒体融合蛋白Mfn2和OPA1表达下降,分裂蛋白Drp1表达增加;线粒体DNA拷贝数增加(t=10.06,P<0.01),ATP数目下降(t=15.6,P<0.01);线粒体Ca2+与ROS水平上升;BMDM MCU mRNA与蛋白表达水平都显著升高(t=7.824,P<0.01);敲除MCU后的BM DM向M2型巨噬细胞极化被抑制(t=8.574、5.155,P均<0.05),ATP水平显著下降(t=3.317,P<0.05),线粒体Ca2+与ROS水平的升高也受到抑制。结论在模拟失重状态下,MCU作为线粒体Ca2+内流的关键调控蛋白介导线粒体钙超载导致ROS水平上升,从而促进了巨噬细胞向M2型巨噬细胞极化。展开更多
目的回顾空军飞行人员急性缺血性卒中(acute ischemic stroke,AIS)的临床资料,为飞行人员AIS的诊治和航空医学鉴定提供借鉴。方法通过空军特色医学中心电子病历系统、中国知网和PubMed数据库检索飞行人员AIS病例,总结分析飞行人员AIS特...目的回顾空军飞行人员急性缺血性卒中(acute ischemic stroke,AIS)的临床资料,为飞行人员AIS的诊治和航空医学鉴定提供借鉴。方法通过空军特色医学中心电子病历系统、中国知网和PubMed数据库检索飞行人员AIS病例,总结分析飞行人员AIS特点及航空医学鉴定情况。结果总共检索到9例飞行人员AIS病例,均为男性,年龄36~50岁,其中飞行员6例,领航员1例,空中通信员1例,空中机械师1例。所有患者的美国国立卫生研究院卒中量表(National Institute of Health Stroke Scale,NHISS)评分均≤3分。按急性卒中治疗Org10172试验(trial of org 10172 in acute stroke treatment,TOAST)分型,2例为小动脉闭塞型,2例为心源性栓塞型,1例为嗜酸性粒细胞增多症,4例因存在多种病因或检查不全面而归因为不明原因型。共8例飞行人员经过航空医学鉴定,4例随访后无复发和后遗症,结论为特许飞行合格;2例暂时飞行不合格仍在地面观察;2例鉴定结论为飞行不合格。结论飞行人员AIS多为轻型卒中,其预后航空医学鉴定应结合病情程度、病因、复发风险、治疗结果、飞行岗位、飞行机种和飞行意愿等多因素进行综合评定。展开更多
文摘目的探究线粒体钙单向转运体(mitochondrial calcium uniporter,MCU)在模拟失重状态下对巨噬细胞极化的调控作用及其机制。方法体外培养小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow derived macrophage,BMDM),采用配对比较法将野生型(wild ty pe,WT)小鼠的BM DM分为2D回转模拟失重组和同步对照组,2D回转模拟失重组细胞在2D细胞回转仪中回转24 h模拟失重效应,同步对照组细胞在2D细胞回转仪中静置24 h;按照小鼠基因型将2D回转模拟失重的细胞分为LysM Cre、MCU f l/f l与同窝对照MCU f l/f l组,2组均在2D细胞回转仪中回转24 h模拟失重效应。采用实时荧光定量核酸扩增检测系统(realtime quantitative PCR detecting system,Q-PCR)和流式细胞术检测BMDM向M1、M2型巨噬细胞极化的能力;蛋白免疫印迹检测B M D M在模拟失重状态下巨噬细胞线粒体融合分裂蛋白的表达水平;实时荧光定量核酸扩增检测系统检测B M D M线粒体D N A拷贝数;转染线粒体特异性绿色荧光钙质粒Ad-4 m t-G C a M P 6检测B M D M线粒体钙信号;D C F H-DA活性氧探针检测BMDM活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果在24 h回转模拟失重处理后,WT小鼠的BMDM向M1型巨噬细胞极化的能力减弱(t=6.409、4.800、7.808、6.506,P均<0.01),向M2型巨噬细胞极化的能力增强(t=3.265、4.458,P均<0.05);线粒体融合蛋白Mfn2和OPA1表达下降,分裂蛋白Drp1表达增加;线粒体DNA拷贝数增加(t=10.06,P<0.01),ATP数目下降(t=15.6,P<0.01);线粒体Ca2+与ROS水平上升;BMDM MCU mRNA与蛋白表达水平都显著升高(t=7.824,P<0.01);敲除MCU后的BM DM向M2型巨噬细胞极化被抑制(t=8.574、5.155,P均<0.05),ATP水平显著下降(t=3.317,P<0.05),线粒体Ca2+与ROS水平的升高也受到抑制。结论在模拟失重状态下,MCU作为线粒体Ca2+内流的关键调控蛋白介导线粒体钙超载导致ROS水平上升,从而促进了巨噬细胞向M2型巨噬细胞极化。
文摘目的回顾空军飞行人员急性缺血性卒中(acute ischemic stroke,AIS)的临床资料,为飞行人员AIS的诊治和航空医学鉴定提供借鉴。方法通过空军特色医学中心电子病历系统、中国知网和PubMed数据库检索飞行人员AIS病例,总结分析飞行人员AIS特点及航空医学鉴定情况。结果总共检索到9例飞行人员AIS病例,均为男性,年龄36~50岁,其中飞行员6例,领航员1例,空中通信员1例,空中机械师1例。所有患者的美国国立卫生研究院卒中量表(National Institute of Health Stroke Scale,NHISS)评分均≤3分。按急性卒中治疗Org10172试验(trial of org 10172 in acute stroke treatment,TOAST)分型,2例为小动脉闭塞型,2例为心源性栓塞型,1例为嗜酸性粒细胞增多症,4例因存在多种病因或检查不全面而归因为不明原因型。共8例飞行人员经过航空医学鉴定,4例随访后无复发和后遗症,结论为特许飞行合格;2例暂时飞行不合格仍在地面观察;2例鉴定结论为飞行不合格。结论飞行人员AIS多为轻型卒中,其预后航空医学鉴定应结合病情程度、病因、复发风险、治疗结果、飞行岗位、飞行机种和飞行意愿等多因素进行综合评定。