TLR2/TLR9激动剂对鲍曼不动杆菌肺部感染的保护作用

目的评价toll-like receptor(TLR)2/TLR9激动剂对肺部感染鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Ab)小鼠的保护作用。方法将6~8周龄雌性C57小鼠分为PBS组、Pam_(2)CSK_(4)(Pam)组、CpG ODN(CpG)组和Pam+CpG组,以不同剂量滴鼻免疫后24 h进行Ab肺部致死性感染,观察小鼠生存率。构建亚致死剂量Ab肺部感染模型,测定感染后小鼠血液、肺脏、肝脏、肾脏和脾脏的细菌定植量,并取小鼠肺脏和肾脏进行HE染色,分析病理损伤程度。探索免疫1、3、7 d后对小鼠Ab感染的保护作用,明确保护时间窗。Pam+CpG体外刺激A549上皮细胞和RAW264.7细胞,考察两种细胞对Ab的杀伤或吞噬作用。结果与PBS组比较,Pam+CpG组能显著提高Ab致死感染小鼠的生存率(P<0.05,P<0.01),降低亚致死感染后小鼠血液(P<0.01)、肺脏(P<0.01)、肝脏(P<0.05)、肾脏(P<0.01)和脾脏(P<0.01)的细菌定植量,减轻感染导致的病理损伤;在感染之前1 d或3 d免疫均可显著提高小鼠的生存率(P<0.05),其中免疫后3 d保护效果最好。与PBS、Pam、CpG组比较,Pam+CpG组可以显著促进A549上皮细胞和R AW264.7细胞对Ab的杀伤或吞噬作用(P<0.01)。结论TLR2/TLR9激动剂合用对Ab致死和亚致死感染均具有显著的保护作用,可能的机制是其促进了肺上皮细胞和巨噬细胞对Ab的杀伤或吞噬作用。

SR9009光学异构体的合成及抗衰老作用研究

目的 合成核受体Rev-Erbs受体激动剂SR9009的光学异构体,并研究其抗衰老活性。方法 以5-硝基噻吩-2-甲醛、对氯苯甲醛、(S)-1-Boc-3-氨甲基吡咯烷或(R)-1-Boc-3-氨甲基吡咯烷等为起始原料,通过还原胺化、脱叔丁氧羰基(t-butyloxy carbonyl, Boc)保护基、酰胺缩合等4步,合成SR9009的光学异构体;并通过秀丽隐杆线虫实验,测试其抗衰老活性。结果 通过4步反应分别合成了SR9009光学异构体,(S)-异构体和(R)-异构体的总收率分别为54.8%和49.0%;与空白对照相比,(S)-异构体能够显著延长秀丽隐杆线虫的平均寿命7.8%。结论 首次报道了SR9009的光学异构体及其合成方法;其(S)-异构体具有较好的抗衰老活性,值得进一步研究。

香菇多糖对小鼠脾T/B淋巴细胞TLR4、TLR9表达的影响

目的研究香菇多糖(肿瘤化疗辅助药)产生抗肿瘤作用的分子机制。方法用香菇多糖对体外小鼠脾淋巴细胞的进行刺激,研究香菇多糖对TLR4、TLR9表达的影响。结果香菇多糖在初期可激活TLR4、TLR9的表达;进一步可激活肿瘤坏死因子α的表达。结论香菇多糖通过激活机体的免疫系统具有抑制肿瘤生长的活性。

磷酸化Tyr951信号蛋白在糖尿病大鼠创面组织内皮细胞迁移中的作用

目的观察糖尿病大鼠创面组织内皮细胞迁移信号通路中磷酸化Tyr951表达的变化规律。方法SD大鼠分为糖尿病组和非糖尿病对照组,建立深Ⅱ度烫伤模型,透明胶纸描计计算大鼠创面愈合率,于烫伤后0,1,3,7,10,14,21d,ELISA法检测创面组织中F-Actin的水平,免疫组织化学方法检测创面组织中磷酸化Tyr951的表达。结果与非糖尿病组相比,糖尿病组创面组织中磷酸化Tyr951表达水平显著降低(P<0.05),同时F-Actin表达水平也显著降低(P<0.05)。结论糖尿病大鼠创面组织内皮细胞迁移障碍与磷酸化Tyr951信号蛋白表达减少有关。

白芍总苷对系统性红斑狼疮患者外周血B细胞内TLR9表达的影响

目的探讨白芍总苷(TGP)对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血B细胞内Toll样受体9(TLR9)表达的影响。方法选取SLE患者60例和正常健康人30例,分离外周血单个核细胞(PBMC),每份标本均分为4组体外培养,即空白对照组、胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤-寡聚脱氧核苷酸(Cp G-ODN)组、Cp G-ODN+TGP组和TGP组。空白对照组仅加入RPMI-1640完全培养液,其他3组分别加入Cp G-ODN(ODN终浓度1μmol·L-1)、Cp G-ODN+TPG(TPG最适终浓度为1×10-4mol·L-1)、TPG。各组均培养48 h后提取细胞,应用流式细胞仪检测各组B细胞内TLR9表达。结果 1正常健康人:Cp G-ODN组和空白对照组TLR9的表达率分别为(9.10±2.12)%,(4.96±2.11)%(P<0.01);2SLE患者:Cp G-ODN组的TLR9表达率(14.86±3.42)%,显著高于空白对照组的(9.20±3.43)%(P<0.01),Cp G-ODN+TGP组的TLR9表达率(11.95±3.63)%,低于Cp G-ODN组(P<0.05);在SLE轻度活动患者中,Cp G-ODN组和空白对照组TLR9的表达率分别为(10.74±3.17)%,(5.19±2.05)%(P<0.05);在SLE中重度活动患者中,Cp G-ODN组和空白对照组TLR9的表达率分别为(16.51±1.72)%,(10.80±2.37)%(P<0.01),Cp G-ODN+TGP组TLR9的表达率(13.59±2.58)%,低于Cp G-ODN组(P<0.01)。结论 TGP可以拮抗Cp G-ODN对B细胞内TLR9表达的上调作用。

穿透肽嵌合金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysJS25-R9的表达及其活性分析

前期分离得到1株具有较强裂解能力的金黄色葡萄球菌噬菌体vB_SauM_JS25。测序后发现,噬菌体vB_SauM_JS25的裂解酶基因LysJS25与裂解酶LysK同源性最高,且可以广谱裂解金黄色葡萄球菌。为提高LysJS25细胞穿透效果,设计了穿透肽嵌合裂解酶LysJS25-R9,经原核表达和纯化,体外评价了LysJS25-R9裂解活性、细胞穿透活性及细胞内杀菌活性。结果表明:LysJS25-R9对葡萄球菌表现出较好的裂解能力,杀菌效率较原裂解酶提高2.1倍。激光共聚焦及细胞内杀菌活性实验证实LysJS25-R9进入MAC-T细胞内杀菌。该研究为穿透肽嵌合裂解酶的设计提供了一个良好的例证,同时有助于裂解酶细胞穿透性改造的设计。

SIGIRR对CpG诱导的人气道H292细胞TLR9表达的影响

目的研究SIGIRR对未甲基化的胞嘧啶磷酸鸟苷（CpG）诱导的人气道上皮细胞株H292细胞钟形受体9（TLR9）表达的影响。方法本实验对象包括6组，分别为H292组、空质粒转染组（eH292组）、SIGIRR转染组（SH292组），以及给予CpG刺激后的H292组（CH292组）、eH292组（CeH292组）和SH292组（CsH292组）。构建SIGIRR-EGFP融合蛋白的真核表达载体，运用脂质体转染的方法转染人气道上皮细胞株H292经CpG刺激后，Western blot检测人气道H292细胞TLR9的表达，ELISA检测人气道上皮细胞H292分泌IL-6的水平。结果CH292组、CeH292组和CsH292组细胞较H292组、eH292组、sH292组细胞TLR9蛋白表达量增加（P均〈0．01）；CSH292组细胞产生的IL-6（3．41±0．08pg／ml）少于CH292组（4．27±0．07pg／ml）及CeH292组（5．04±0．05pg／ml）（P均〈0．05）、而TLR9蛋白表达量差异无统计学意义。结论CpG可诱导Hm细胞表达TLR9蛋白，SIGIRR上调表达可抑制CpG诱导的H292细胞IL-6的产生，对TLR9表达无影响，

青蒿琥酯通过降低TLR4和TLR9mRNA表达保护大肠杆菌脓毒症模型小鼠

目的：观察抗疟药青蒿琥酯对脓毒症模型小鼠的保护作用，探讨其保护作用可能的机制。方法：采用热灭活大肠杆菌建立脓毒症小鼠模型，观察青蒿琥酯对小鼠生存率的影响；采用ELISA法和鲎试剂动态浊度法在体研究青蒿琥酯对脓毒症小鼠血清TNF-α及内毒素水平的影响；采用小鼠腹腔巨噬细胞和RAW264．7细胞从离体水平观察青蒿琥酯对不同致炎因子LPS、CpG ODN和热灭活大肠杆菌诱导细胞因子TNF-α和IL-6释放的影响；采用生物传感器技术、流式细胞技术及RT-PCR分别研究青蒿琥酯与LPS和cpG ODN的直接结合、对细胞表面结合及内吞及TLR4和TLR9mRNA表达的影响。结果：青蒿琥酯对热灭活大肠杆菌脓毒症小鼠具有明显保护作用，可明显降低血清TNF-α及内毒素水平；青蒿琥酯在体外不能直接中和或结合LPS和cpGODN，但可抑制抑制热灭活大肠杆菌、LPS和CpG ODNl826诱导的促炎细胞因子TNF-α、IL-6的释放；青蒿琥酯对细胞内吞或表面结合没有影响，但可抑制热灭活大肠杆菌、LPS和CpG ODNl826诱导的RAW264．7细胞TLR4和TLR9 mRNA高表达。结论：青蒿琥酯可通过降低血清TNF-α释放及内毒素水平保护大肠杆菌脓毒症模型小鼠，其作用可能与降低TLR4和TLR9 mRNA表达有关。

2009-2010年某医院抗感染药物应用情况分析R978

【目的】分析本院抗感染药物应用现状、趋势，为临床合理用药和降低医药费用提供参考。【方法】对2009～2010年本院抗感染药物应用的品种、数量、用药金额、用药频度（DDDs）、限定日费用（DDDc）等进行统计、分析。【结果】抗感染药物用药金额占全部药物用药金额比例呈下降趋势；注射剂型抗感染药物的用药金额比例呈下降趋势，抗感染药物金额所占比例平均为22．01％，此值低于全国医院27．97％的平均水平。【结论】本院抗感染药物临床应用总体来说较为合理。但注射剂型用药金额比例仍然偏大，头孢菌素类用药金额和DDDs偏大，故应进一步加强管理，做到合理使用。

美国FDA CDER9月份会议安排抗病毒药顾问委员会

9月5日，委员会将讨论Merck公司的整联蛋白抑制剂raltagravir potassium 400mg片剂的新药上市申请（NDA22-145），它将与其他抗逆转录病毒药联用，用于有治疗经验的HIV-1（人免疫缺损病毒-1）感染。这些病人尽管在进行抗逆转录药治疗但有证据表明仍存在HIV-1复制。

英国研究人员研制出治癌新药HXR9

（据新华网）针对与癌症有关的基因表达，英国专家研制出一种治癌新药，并且发现了有望用于前列腺癌检测的一种新方法。

国家药监局关于适用《Q3C(R9):杂质:残留溶剂的指导原则》国际人用药品注册技术协调会指导原则的公告(2024年第76号)

为推动药品注册技术标准与国际接轨,经研究,国家药品监督管理局决定适用《Q3C(R9):杂质:残留溶剂的指导原则》国际人用药品注册技术协调会指导原则[以下简称Q3C(R9)]。现就有关事项公告如下。一、申请人需在现行药学研究技术要求基础上,按照Q3C(R9)指导原则的要求开展研究;自2024-06-20起开始的相关研究(以试验记录时间点为准),均适用该指导原则。

羟氯喹抑制TLR9/MyD88/NF-κB通路减轻系统性红斑狼疮小鼠肾损伤作用

目的探讨羟氯喹对系统性红斑狼疮小鼠肾损伤的影响,并基于Toll样受体9/髓样分化因子88/核因子-κB(TLR9/MyD88/NF-κB)信号通路探索其潜在机制。方法采用ip降植烷的方法构建系统性红斑狼疮雌性小鼠模型,设模型组、羟氯喹(ig 80 mg/kg)组、TLR9抑制剂(ODN2088,ip 4 mg/kg)组、羟氯喹+ODN2088组,另设对照组,每组8只。分别1次/d连续给药5周后采集标本,称体质量、肾脏质量并计算肾脏指数(RI),检测24 h尿蛋白量(24 h-UTP)和血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平;苏木精-伊红染色法(HE)和Masson染色观察肾组织病变和纤维化程度,进行病理评分和胶原容积分数(CVF);检测肾组织干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)水平;RT-PCR法和Western blotting法检测肾组织TLR9、MyD88、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达。结果与模型组比较,羟氯喹组、ODN2088组和HCQ+ODN2088组小鼠体质量显著升高,RI、24 h-UTP、血清Scr、BUN水平均显著降低(P<0.05);肾组织病变和纤维化状况均明显改善,肾小球、肾小管病理评分和CVF均显著降低(P<0.05);肾组织IFN-γ、TNF-α、IL-4水平显著降低,IL-2水平显著升高(P<0.05);肾组织TLR9、MyD88、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达量均显著降低(P<0.05)。羟氯喹+ODN2088组对系统性红斑狼疮小鼠各检测指标的影响显著优于羟氯喹组和ODN2088组(P<0.05)。结论羟氯喹对系统性红斑狼疮小鼠肾损伤具有保护作用,其机制可能与抑制TLR9/MyD88/NF-κB信号通路,减轻炎症反应有关。

基于FAERS数据库的周期蛋白依赖性激酶4/6抑制剂血液毒性真实世界研究

目的 基于美国美国食品药品管理局(FDA)的不良事件报告系统(FAERS)分析3种周期蛋白依赖性激酶4/6(CDK4/6)抑制剂上市后的不良事件(AEs)信号,为临床用药安全提供参考。方法 提取FAERS数据库2015年第一季度至2022年第一季度共29个季度AEs,利用报告比值比法(ROR)和比例报告比值法(PRR)对CDK4/6抑制剂AEs进行数据挖掘。结果 CDK4/6抑制剂相关性血液毒性报告共有7 872份,各抑制剂血液毒性AEs占总AEs比例依次为哌柏西利(80.31%)>瑞博西利(15.36%)>阿贝西利(4.33%)。血液毒性常见中性粒细胞减少和贫血。哌柏西利(2 982/6 322,47.17%)和瑞博西利(613/1 209,50.70%)致中性粒细胞减少的报告占比较阿贝西利(117/341,34.31%)更高,血液毒性主要发生在药物开始使用后60 d内(1 630,61.86%),哌柏西利中位时间最长,且用药90 d后仍有32.9%的患者存在血液毒性,不同CDK4/6抑制剂血液毒性临床表现及发生强度存在差异。结论 哌柏西利、阿贝西利、瑞博西利均会导致明显的血液毒性,其中阿贝西利致血液毒性报告最少,但要警惕阿贝西利致贫血后导致死亡的风险。用药后的2个月内密切监测全血细胞计数,关注中性粒细胞、血红蛋白等水平,警惕CDK4/6抑制剂相关血液AEs的发生。

基于免疫调节探讨葛根汤颗粒治疗小鼠病毒性肺炎的作用机制

目的研究葛根汤颗粒对甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)致小鼠病毒性肺炎模型的药效评价及免疫调节作用。方法ICR小鼠,13~15 g,分为正常对照组、模型对照组,磷酸奥司他韦阳性药对照组及葛根汤颗粒高、中、低剂量组(6.6、3.3、1.7 g-1·kg^(-1)·d^(-1)),每组10只,采用IAV(FM1株)病毒液感染建立小鼠病毒性肺炎模型,同时给予相关药物治疗。观察各组小鼠肺指数及肺指数抑制率,RT-PCR法检测肺组织核酸,ELISA法检测小鼠肺组织因子白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子TNF-α;同时采用IAV(FM1株)病毒液滴鼻感染小鼠,造成死亡保护模型,观察小鼠感染后2周内的死亡情况,计算小鼠的死亡率、死亡保护率、平均存活天数和生命延长率。结果葛根汤颗粒中剂量组肺指数及肺组织病毒载量显著降低(P<0.01),肺指数抑制率为50.73%;葛根汤颗粒高、中剂量组肺组织炎性因子IL-10含量显著降低(P<0.01)、葛根汤颗粒中、低剂量组肺组织炎性因子TNF-α含量显著降低(P<0.01);葛根汤颗粒3个剂量组肺组织炎性因子IL-6含量显著降低(P<0.01);模型组小鼠死亡率90%,平均存活天数9.45 d,葛根汤颗粒3个剂量组小鼠死亡率显著降低、平均存活天数显著延长,生命延长率显著提高(P<0.01)。结论葛根汤颗粒可通过调节模型小鼠免疫炎性因子水平达到改善病毒性肺炎小鼠免疫功能的作用,同时可显著降低模型小鼠肺指数和肺组织病毒载量,从而减轻模型小鼠的肺部炎性损伤;对模型小鼠有死亡保护作用。

基于OBE理念的药物临床试验课程教学改革研究

首都医科大学将成果导向型教学(OBE)理念引入药物临床试验课程教学改革中。教师针对课程教学内容更新速度快、教学方式传统陈旧、考评模式较为单一等普遍存在的问题,以学生为中心组织和引导教学过程,优化教学大纲、改善教学方法、提升自身教学能力、完善学生评价体系,有效提升了教学产出和学生的创新性学习能力,可为相关课程教学改革提供借鉴。

对比罗沙司他与重组人促红细胞生成素对维持性血液透析患者冠状动脉钙化的影响

目的对比罗沙司他与重组人促红细胞生成素(rHuEPO)对维持性血液透析(MHD)患者冠状动脉钙化的影响。方法采用回顾性分析的方法,选取重庆医科大学附属第一医院血液净化中心2019年4月至2021年6月处方中含罗沙司他的56例MHD患者作为ROX组,同期处方中含rHuEPO的60例MHD患者作为EPO组,随访观察12个月,比较两组患者治疗前后实验室检查指标、冠状动脉钙化积分(CACS)、心脏超声参数的差异及随访期间心脑血管事件发生情况。结果治疗前及治疗后两组患者的CACS比较,差异均无统计学意义(P>0.05);但ROX组患者治疗前后的CACS差值明显低于EPO组患者(P<0.05)。两组患者治疗前后心脏超声参数及实验室检查指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。随访期间,ROX组患者的脑卒中和心肌梗死发生率显著低于EPO组(P<0.05),但两组间因心衰住院的发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论与rHuEPO比较,罗沙司他可能对延缓MHD患者冠状动脉钙化有积极作用,且可能有利于减少MHD患者心肌梗死、脑卒中的发生。

瑞舒伐他汀联合康复训练治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病合并高脂血症临床观察

目的探讨瑞舒伐他汀联合康复训练治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)合并高脂血症的临床疗效。方法选取医院2020年1月至2022年12月收治的冠心病合并高脂血症患者144例,按随机数字表法分为观察组和对照组,各72例。对照组患者予常规治疗和瑞舒伐他汀,观察组患者增加康复训练,两组均治疗12周。结果治疗后,两组患者的总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平均明显低于治疗前,高密度脂蛋白胆固醇水平明显高于治疗前(P<0.05),且观察组均明显优于对照组(P<0.05);两组患者的左室射血分数、每分输出量(CO)水平均明显高于治疗前,血清心肌肌钙蛋白I明显低于治疗前(P<0.05),且观察组均明显优于对照组(P<0.05);两组患者的健康调查简表(SF-36)生理功能、生理职能、活力、社会功能、总体健康评分均明显高于治疗前(P<0.05),且观察组明显高于对照组(P<0.05)。结论瑞舒伐他汀联合康复训练可有效改善冠心病合并高脂血症患者的心功能,调节血脂水平,提高生活质量。