白藜芦醇对甲状腺鳞癌细胞株SW579生长及CDC25B蛋白表达的影响

目的通过观察白藜芦醇对甲状腺鳞癌细胞株SW579生长及CDC25B蛋白(cell division cycle 25B)表达的影响,探讨白藜芦醇的抗癌作用机制。方法取对数生长期SW579细胞培养12h后,按浓度梯度25、50、100、200、400μmol.L-1加入白藜芦醇(实验组),对照组加入等体积含对应浓度DMSO的培养基,应用噻唑蓝(MTT)比色法和流式细胞术检测细胞增殖和细胞周期的变化,同时应用Western Blot方法检测CDC25B蛋白表达情况。结果不同浓度(25、50、100、200、400μmol.L-1)白藜芦醇对SW579细胞生长均有抑制作用,且呈剂量依赖性(P<0.05),并且改变细胞周期分布,实验组(100μmol.L-1白藜芦醇)S期[(28.55±0.58)%]比例明显高于对照组[(19.49±1.27)%](P<0.05),G2/M期[(8.79±0.74)%]比例显著低于对照组[(15.88±0.81)%](P<0.01),细胞分裂被阻滞。白藜芦醇作用24h后,与对照组(0.421±0.004)相比,实验组(100μmol.L-1白藜芦醇)(0.062±0.012)CDC25B蛋白表达明显下降(P<0.01)。结论白藜芦醇能够显著抑制SW579细胞株的增殖,使其处于S期阻滞,其抑制作用可能与CDC25B蛋白表达下降有关。

药品检测机构仪器设备计量分类管理模式的建立及应用

目的初步建立药品检测机构仪器设备计量分类管理模式。方法根据国内外法律法规对设备计量的要求,结合药品检测机构仪器设备的特点,首次提出将药品检测机构仪器设备分为必须计量、选择性计量和不需要计量3种类别,针对不同类别设备提出具体的计量管理方法。结果与结论初步建立药品检测机构仪器设备计量管理模式并应用于实践,为药品检测机构仪器设备计量规范化管理提供依据。

干法包衣技术及应用

目的综述了干法包衣技术的特点、设备、常用辅料及影响因素,并对其在药剂学上的应用进行了简述。方法查阅国内外文献,对干法包衣进行整理、归纳、总结。结果干法包衣技术应用范围广,操作简便。结论干法包衣技术发展迅速,为药物制剂发展提供了广阔的前景。

药品检测实验室仪器设备性能管理的思考与建议

目的为加强药品检测实验室仪器设备的性能管理,加速我国药品检测实验室与国际先进实验室接轨提供参考。方法研究了国内外同类药品检测实验室在仪器设备性能管理方面的先进经验。结果与结论结合中国合格评定国家认可委员会对检测实验室仪器管理的要求和我国实际情况,提出改进药品检测实验室仪器性能管理工作的建议。

动物实验室药品检定设备管理初探

目的为食品药品的检定工作提供条件保障。方法介绍了对动物实验室检定用仪器设备的管理经验,阐述仪器设备管理对食品药品检定工作的重要意义。结果提高了动物实验室检定用仪器设备的管理水平。结论总结设备管理工作经验,促进检验质量提升,保证人民用药安全。

药品实验室分析仪器验证规范的探讨

分析仪器验证是药品实验室质量管理的重点,是符合制药业良好操作规范的关键部分,也是国内外制药行业在实施过程中的难点。本文结合国际上相关规范和标准,对药品实验室分析仪器验证要求和过程进行探讨。仪器验证是一个整体、周期性的过程,是由不同阶段的活动组成,需要仪器制造商、供应商和使用者三方共同参与。文章将仪器验证分为三个阶段进行阐述,从仪器和制造商、供应商的选择到仪器的安装、测试和批准使用,包括仪器的定期核查、校准和维护,分别介绍每个阶段活动的实施要点和记录要求,为我国药品实验室分析仪器验证提供参考,促进实验室质量管理标准与国际接轨。

流式细胞术检测IgD与IgD受体结合实验方法的建立

目的建立非放射性荧光标记的配体受体结合实验,检测Ig D与其受体结合的作用特性。方法以配体受体结合理论为基础,利用荧光标记抗体技术,建立非放射性配体受体结合实验方法。利用流式细胞术检测人CD4+T细胞和人滑膜细胞上Ig D与Ig D受体结合的亲和力。结果人CD4+T细胞上Ig D与Ig D受体结合的解离常数(KD)和受体最大结合容量(Bmax)分别是8.10×10-10mol/L和6 605相对值/104细胞,人滑膜细胞上Ig D受体与Ig D结合的KD和Bmax值分别是7.02×10-10mol/L和5 977相对值/104细胞。结论该方法避免了传统受体与配体结合分析中放射性标记的问题,操作简便、稳定性好、灵敏度及选择性均较高,可为分析配体受体结合提供新的方法。

实验室快速筛查的思考与实践

目的利用药品检测车运行资源,建立药品快速筛查第三种模式-实验室快速筛查。方法针对药品标准检查项部分内容进行合理设计与改进,并积极实践。结果达到了快速发现质量可疑药品的实效。结论符合基层药品监督抽验实际。

高效液相色谱法同时测定人血清中卡马西平及地尔硫浓度

目的建立反相高效液相色谱(HPLC)法,以安定为内标,同时测定血清中卡马西平(CBZ)和地尔硫(DZ)的浓度。方法采用Waters产μBondapak C18柱,甲醇-磷酸盐缓冲液(内含0.04%二乙胺,pH 6.82)=70∶30为流动相,紫外检测波长为237 nm。结果CBZ两种浓度(5、10 mg/L)的平均回收率及其日内精密度RSD分别为101.6%、100.1%及0.8%、1.0%。DZ两种浓度(100、200μg/mL)的平均回收率及其日内精密度RSD分别为99.6%、101.1%及2.7%、3.0%。结论HPLC法较灵敏、准确、简便。可用于两药合用时血药浓度及药动学变化的研究。

不同固定液对内皮细胞形态和EP4荧光染色的影响

采用4种固定液对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)进行固定:1-20℃无水甲醇溶液;2新鲜配制4 g/L多聚甲醛溶液;3久置(≥1个月)4 g/L多聚甲醛溶液;4 3.7%甲醛溶液。观察细胞形态和前列腺素受体4(EP4)免疫荧光染色效果。结果表明3.7%甲醛溶液固定后进行免疫荧光染色显示大部分细胞维持梭形或不规则多边形,EP4荧光染色效果较佳;所以3.7%甲醛溶液固定液固定细胞20 min,HUVECs形态典型,EP4的荧光染色效果最佳。

干燥方法对商洛半夏质量的影响

目的确立商洛半夏产地加工的干燥工艺,为制订半夏药材生产标准操作规程(SOP)提供数据支撑。方法将新采挖的鲜半夏随机等分为4组,分别采用阴干、晒干、60℃烘干、微波4种方法进行干燥,以半夏出干率、L-左麻黄碱、水溶性浸出物的含量为观察指标,分别测定其有效成分的含量。结果半夏采挖后,洗净,去皮,分别用4种方法干燥,以微波中火3min干燥,半夏出干率、L-左麻黄碱的含量最高。结论生产中半夏药材干燥以微波法为好,既降低劳动强度、节省干燥时间,又提高有效成分含量。

新型永生化人肝细胞系HepZJ的安全性研究

目的对新型永生化人肝细胞系Hep ZJ进行安全性研究。方法获取Hep ZJ培养上清液,通过PCR联合琼脂糖凝胶电泳法进行支原体检测,通过显色基质法进行内毒素检测;将Hep ZJ细胞悬液经尾iv进入SD大鼠后观察其生存情况并于不同时间点进行剖检,通实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法分析该细胞系的生物分布;将Hep ZJ细胞悬液sc进入BALB/c-nu裸鼠后分析其致瘤性。结果 Hep ZJ支原体检测电泳图未见阳性条带;内毒素检测浓度<2 EU/m L;SD大鼠尾iv Hep ZJ后生存情况良好,血液、肺脏、脾脏在不同时间点出现不同程度的GAPDH-Human和TERT-Human基因表达,血液中12 h后、肺脏和脾脏中1周后基本被清除,剖检过程中未见肿块形成;裸鼠sc Hep ZJ后无硬性肿物形成。结论新型永生化人肝细胞系Hep ZJ无支原体、细菌污染,进入体内后无明显副反应及致瘤性,具备应用安全性。