次苷酸查尔酮对LPS诱导的RAW264.7细胞iNOS和COX-2表达的影响

补骨脂为豆科植物补骨脂(Psoraleacorylifolia L.)果实,具有温肾助阳、温脾止泻的功效[1],临床上被用于治疗皮肤病、肾炎、骨折等[2-3]。次苷酸查尔酮(corylifol A,CYA)是中药补骨脂的活性成分之一,是一种异黄酮类化合物,具有抗炎、抗菌、抗氧化、抗骨质疏松的特性[4-5]。有研究表明,CYA能明显抑制破骨细胞的分化,且能明显降低LPS诱导的巨噬细胞一氧化氮(NO)的生成[6-7]。

硝化应激在肺动脉高压中的研究进展

肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)是一种进行性发展的肺血管疾病,病理基础包括内皮功能障碍、平滑肌细胞异常增生、炎症浸润以及肺纤维化。PH的发生机制尚不完全清楚,但硝化应激已经证实在PH中发挥了重要作用。该文综述了活性氮(reactive nitrogen species,RNS)的种类及肺循环中RNS的来源,以及由此引发的硝化应激在PH发生发展中的作用,以期为靶向抗硝化治疗的临床应用提供参考依据。

Cs4-SeNPs对BV2小胶质细胞炎症反应作用及机制

目的 探讨虫草多糖功能化纳米硒(Cs4-SeNPs)对脂多糖(LPS)诱导BV2小胶质细胞炎症反应的作用及其可能机制。方法 以不同浓度(0.01、0.10、1.00μmol/L)Cs4-SeNPs作用LPS诱导的BV2小胶质细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测BV2小胶质细胞活力,免疫印迹技术检测BV2小胶质细胞硒蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达,荧光定量PCR技术检测不同时间(4、8、12 h)BV2小胶质细胞促炎因子环氧化酶-2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达。结果 0.01、0.10、1.00μmol/L的Cs4-SeNPs对BV2细胞活力无明显影响。与对照组相比,LPS组GPX4蛋白表达降低(F=25.47,q=6.43,P<0.01);0.01、0.10和1.00μmol/L的Cs4-SeNPs处理组GPX4蛋白表达较LPS组明显升高(q=5.72~14.07,P<0.01),且1.00μmol/L Cs4-SeNPs作用效果最好(q=6.04~8.35,P<0.01)。LPS组COX-2与iNOS mRNA表达较对照组显著上调(F=25.00、37.34,q=12.18、12.06,P<0.001)。1.00μmol/L Cs4-SeNPs预处理12 h可显著抑制COX-2基因表达(q=6.10,P<0.05);预处理8和12 h可显著抑制iNOS mRNA表达(q=4.71、6.97,P<0.05)。结论 Cs4-SeNPs对LPS诱导的BV2小胶质细胞炎症反应具有抑制作用,其机制可能与硒蛋白GPX4的调控有关。

外源性硫化氢对肾小球系膜细胞缺氧/复氧损伤的影响及其机制

目的探讨外源性硫化氢(hydrogen sulfide,H_(2)S)对肾小球系膜细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的影响,并阐明其相关作用机制。方法H/R诱导小鼠肾小球系膜细胞系(SV40MES13)建立细胞损伤模型。细胞增殖试剂盒(CCK8)检测细胞活力,荧光探针技术分别检测H_(2)S和活性氧(ROS)含量,生化试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,Hoechst 33342染色检测细胞凋亡率;Western blot检测胱硫醚-γ-裂解酶(cystathione-gamma-lyase,CSE)、细胞凋亡相关蛋白(cleaved-caspase-3、Cyt c和Bcl-2)表达及信号通路相关蛋白(ERK1/2、Phospho-ERK1/2)活性。结果与对照(Control)组相比,缺氧/复氧(H/R)组细胞活力、内源性H_(2)S含量CSE蛋白表达、SOD活性及Bcl-2蛋白表达均明显降低;细胞凋亡率、MDA和ROS含量、Cyt c及cleaved caspase-3蛋白表达均显著升高;同时,磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)活性明显降低。与H/R比较,H/R+NaHS(外源性H_(2)S供体)逆转了H/R对上述指标的影响。另外,PD98059(ERK1/2抑制剂)减弱了NaHS对磷酸化ERK1/2的作用。结论肾小球系膜细胞H/R损伤与内源性CSE/H_(2)S系统下调有关;外源性H_(2)S通过上调ERK1/2通路抑制氧化应激和细胞凋亡,减轻肾小球系膜细胞H/R损伤。

黄芪多糖对镉染毒大鼠肝肾损伤改善和肠道菌群结构调节的作用

目的探讨黄芪多糖对镉染毒大鼠肝肾损伤改善和肠道菌群结构调节的作用。方法以CdCl 2腹腔注射建立镉染毒大鼠模型,经黄芪多糖持续灌胃处理5周后,采集尿液、肝脏、肾脏和粪便,应用原子吸收光谱法检测尿液、肝脏和肾脏中的镉残留,HE染色观察肝肾病理学变化,Illumina PE250测序和生物信息学软件分析肠道菌群结构。结果注射CdCl 2后,尿液、肝脏和肾脏中镉蓄积明显增加,部分肝肾细胞出现肿胀、坏死、炎性细胞浸润等病理损伤,Chao、ace和shannon指数明显减小,simpson明显增大,OTU减少,Ruminococcus、Bacteroides、Flavonifractor、Roseburia和Elusimicrobium丰度明显下降,Lactobacillus、Lachnospiracea_incertae_sedis、Parasutterella、Clostridium XlVb、Clostridium XI、Intestinimonas和Fusobacterium丰度明显上升,与正常组相比,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);黄芪多糖处理后,尿液、肝肾中镉蓄积明显降低,肝肾细胞损伤减轻、炎性细胞浸润减少,Chao、ace和Shannon指数明显上升,simpson明显下降,OTU增加,Prevotella、Bacteroides、Parasutterella、Elusimicrobium和Barnesiella丰度明显上升,Ruminococcus、Oscillibacter、Flavonifractor、Clostridium XlVa、Roseburia、Lactobacillus、Ruminococcus2、Lachnospiracea_incertae_sedis、Clostridium IV、Clostridium XlVb、Clostridium XI和Intestinimonas丰度明显下降,与单纯镉染毒组比较,差异有统计意义(P<0.05或P<0.01)。结论黄芪多糖可能通过减少镉染毒大鼠体内镉蓄积和调节肠道菌群结构,从而改善肝肾组织损伤。

三甲基氯化锡中枢神经毒性机制及防治研究进展

三甲基氯化锡(trimethyltin chloride,TMT)是聚氯乙烯(polyvinyl chloride,PVC)塑料制品合成过程中所产生的一种剧毒副产物。它具有选择性中枢神经毒性作用,主要表现为诱导人和动物边缘神经系统的神经元死亡,尤其是海马神经元。TMT中毒后会出现癫痫、腹泻及学习记忆功能障碍等多种临床表现,严重者甚至出现昏迷或死亡。为了提高对TMT中枢神经毒性的认识,现对TMT中枢神经毒性的分子机制及治疗药物的研究进展进行综述,旨在为TMT中枢神经毒性的预防或治疗提供新的研究思路。

大鼠主动脉血管内皮细胞原代培养方法改良及氧化损伤模型构建

目的改良大鼠原代主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)的提取和培养方法,并构建稳定的AVECs氧化损伤模型。方法采用六孔板植块联合胶原酶消化改良法建立大鼠原代AVECs提取和培养方法,倒置显微镜下观察细胞形态,免疫荧光染色法检测vW因子(vWF)进行细胞鉴定。选用2~4代的AVECs,用不同浓度的POVPC干预24 h,检测细胞增殖、细胞骨架、成管能力、细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS),构建POVPC诱导的AVECs氧化损伤模型。结果植块联合胶原酶消化法提取培养的内皮细胞具有典型的“铺路石”样特性,生长状态良好,vWF免疫荧光染色阳性,阳性率占0.95,鉴定为内皮细胞。该法可缩短细胞传代时间。采用4.375~70μmol·L^(-1)的POVPC干预培养AVECs,POVPC在17.5~70μmol·L^(-1)时可明显抑制AVECs增殖(P<0.05);POVPC在8.75~70μmol·L^(-1)时,可导致细胞骨架交叉断裂堆积、解聚、结构模糊,且细胞成管能力明显降低(P<0.01),细胞内ROS水平明显升高(P<0.05)。以上改变在POVPC浓度为35μmol·L^(-1)时尤为明显。结论采用六孔板植块联合胶原酶消化改良法可获得较多的内皮细胞,细胞生长状态良好,缩短了细胞的生长周期,是一种简便、可行的AVECs培养方法。17.5~705μmol·L^(-1)的POVPC可构建稳定AVECs氧化损伤模型。

NaAsO_(2)通过Hippo通路影响PC12细胞形态和突触蛋白

砷是一种自然环境中广泛存在的非金属元素[1]。人类在自然环境和工业活动中长期接触受砷污染的水、空气和食物而中毒,造成组织器官损伤、甚至癌变。此外,砷引起神经系统损害也受到人们越来越多的关注[2]。但目前砷引起神经损伤的具体机制仍不是十分明确。Hippo信号通路是一条在进化上高度保守的激酶级联信号通路,主要控制器官大小、组织稳态和组织再生[3]。本课题组已经证实,NaAsO_(2)可通过激活Hippo信号通路,诱导PC12细胞凋亡。突触后致密蛋白95(post synaptic density protein,PSD95)、突触素蛋白(synaptophysin,SYN)作为神经突触功能相关蛋白,其表达和缺失在神经系统疾病中十分重要[4]。因此,本实验在前期研究的基础上探讨Hippo通路是否参与NaAsO_(2)对PC12细胞活性、形态以及PSD95、SYN神经突触相关蛋白表达的影响。

水溶性金属卟啉的合成、表征及其清除有毒活性氧的研究

目的 合成并结构表征了4种水溶性金属卟啉配合物[5,10,15,20-四[4-(4’-吡啶-1)丁氧基苯基]金属卟啉溴化盐[锌卟啉(Ⅰ)、铜卟啉(Ⅱ)、锰卟啉(Ⅲ)和钴卟啉(Ⅳ)],作为抗活性氧(O2-,H2O2,HO-)模拟酶。方法核黄素-蛋氨酸光照测其清除O2-作用,H2O2氧化Vit C法测其催化H2O2的分解,Fenton-苯甲酸钠荧光法测其对HO-清除作用,小鼠肝匀浆法测其抗脂质过氧化作用。结果 1.0×10-5-1.0×10-6mol·L-1均具有良好的清除O2-作用;1.5×10-6-1.0×10-6mol·L-1均具有分解H2O2作用;2.0×10-8-1.0×10-8mol·L-1均具有清除HO-的功能;1.0×10-7mol·L-1均可使脂质过氧化产物明显减少。结论 合成4种水溶性金属卟啉配合物可作为抗多种活性氧(O2-,H2O2,HO-)模拟酶。

盐酸左氧氟沙星眼用纳米粒温敏凝胶的制备及体外释放考察

目的制备盐酸左氧氟沙星眼用纳米粒温敏凝胶,考察其体外释药行为。方法采用离子交联法制备眼用盐酸左氧氟沙星壳聚糖纳米粒,以泊洛沙姆407和188为温敏基质,以人工泪液稀释前后的胶凝温度为评价指标,采用二因素五水平的中心复合设计-响应曲面法优选温敏凝胶处方,释放度检测法考察该处方的体外释药性。结果载药纳米粒的平均粒径为(60.7±5.1)nm,包封率为(62.5±1.8)%,载药量为(10.43±0.30)%;最佳温敏凝胶基质组成为泊洛沙姆407∶泊洛沙姆188(22%∶6%),胶凝温度为(32.3±0.2)℃,载药纳米粒温敏凝胶24h释放总量达71.9%。结论盐酸左氧氟沙星纳米粒温敏凝胶结合纳米粒和原位凝胶的优点,具有理想的胶凝温度和缓释效果,有望成为眼部给药新剂型。

硒纳米颗粒的合成、安全性、作用及其机制的研究进展

硒作为必不可少的微量元素,在抗氧化和维持各种代谢过程中的氧化还原稳态方面起到非常重要的作用。随着纳米技术的发展,硒纳米颗粒(selenium nanoparticles,SeNPs)由于其低毒性、易降解和高药效而成为极具潜力的生物医学药物。由于具有激活凋亡或自噬和调节活性氧产生的能力,SeNPs广泛用于抗癌治疗和病原菌的杀灭或清除。另外,SeNPs具有极好的稳定性和药物的包装能力,而成为一种有效的纳米载体,用于抗癌、抗炎和抗感染治疗。有趣的是,SeNPs在免疫调节方面的重要作用(如巨噬细胞和T效应细胞的活化),为抗癌和抗感染治疗提供了新的纳米-免疫协调治疗策略。该文评述了SeNPs的制备方法、安全性,以及在抗感染和抗癌方面的作用及其机制的最新进展,旨在促进其临床研究及应用。此外,该文还阐述了SeNPs在其它方面的功能,为促进其在科学和临床研究提供帮助。

多酸药物化学研究进展

目的介绍近年来多酸药物化学的研究进展。方法查阅国内外文献进行归纳和总结。结果和结论多酸具有抗艾滋病、抗肿瘤、抗病毒以及抗糖尿病的作用,具有很大的研究开发潜力和良好的应用前景。

改良液体氯化钾口服方法的效果观察

目的观察改良液体氯化钾口服方法对提高患者服药依从性的效果。方法将2010年8月～2011年7月在我院普外科及肿瘤科住院需口服液体氯化钾治疗患者78例,随机分为观察组40例和对照组38例。观察组采用改良口服方法,对照组采用传统口服方法。观察两组服药依从性。结果两组服药依从性比较有显著性差异(P<0.01)。结论改良后液体氯化钾口服方法使患者服药的依从性提高,充分发挥药物疗效,促进患者康复。

Hippo-YAP通路参与NaAsO 2对PC12细胞周期及细胞凋亡的影响

目的探讨NaAsO 2对PC12细胞YAP蛋白核质分布的影响及Hippo-YAP通路在NaAsO 2影响细胞周期及细胞凋亡中的作用。方法以PC12细胞作为研究对象,利用核质分离及免疫荧光观察NaAsO 2对YAP蛋白核质分布的影响。再将细胞分为control组、NaAsO 2组和NaAsO 2+XMU-MP-1(MST1/2抑制剂)组、XMU-MP-1组,利用流式细胞术、Western blot验证Hippo-YAP通路在NaAsO 2影响细胞周期及细胞凋亡中的作用。结果相较于control组,核质分离与免疫荧光结果都表明NaAsO 2组细胞质中YAP蛋白明显增加(P<0.05),细胞核中YAP蛋白明显下调(P<0.01);并且NaAsO 2组p-MST1、p-LATS1、p-YAP以及凋亡相关蛋白P53和BAX表达明显上调(P<0.05),BCL-2蛋白表达明显下调(P<0.01);G 0/G 1期细胞比例降低(P<0.01),S期比例上升(P<0.05);细胞凋亡率增加(P<0.01)。与NaAsO 2组相比,NaAsO 2+XMU-MP-1组上述指标均有逆转(P<0.05)。结论Hippo-YAP通路可能参与NaAsO 2对PC12细胞周期及细胞凋亡的影响。

氢氧化镧通过阻断HIF-1α信号通路抑制慢性肾病所致的血管钙化

目的研究氢氧化镧对慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)所致大鼠肾损伤及血管钙化的治疗作用及其机制。方法通过给予腺嘌呤构建CKD模型,造模后随机分为模型组、氢氧化镧低、中、高剂量组、碳酸镧组、碳酸钙组。8周后,检测血清磷(Pi)、钙(Ca)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)、成纤维细胞生长因子23(fibroblast growth factor 23,FGF23)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(tartrate-resistant acid phosphatase 5b,TRAP-5b)水平;组织病理学染色评估血管钙化程度;对血管中平滑肌蛋白22α(smooth muscle protein 22α,SM22α)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、低氧诱导因子1(hypoxia inducible factor 1,HIF-1)通路mRNA及其蛋白表达水平进行检测。结果氢氧化镧可明显降低CKD大鼠血清Pi、Scr、BUN、PTH、FGF23及TRAP-5b水平,明显减少CKD大鼠胸主动脉的钙沉积、胞质中BMP-2、VEGF及胞核内RUNX2、HIF-1α的表达,增加SM22αmRNA及蛋白的表达。结论氢氧化镧可明显改善CKD大鼠高磷血症,其可能通过阻断HIF-1α信号通路发挥改善CKD大鼠血管钙化的作用。

N-叔丁氧羰基-2-硫杂-5-氮杂二环[2,2,1]庚-3-酮的合成

目的:改进和优化合成美罗培南侧链中间体的方法。方法:以反-4-羟基脯氨酸为起始原料,经酰化-取代-环合反应,合成目标化合物N-叔丁氧羰基-2-硫杂-5-氮杂二环[2,2,1]庚-3-酮。结果:目标化合物结构经核磁氢谱、红外光谱、质谱及元素分析确证,比较发现用叔丁氧羰基(BOC)保护氨基和二苯基膦酰氯(Ph2POCl)保护羧基产率最高。结论:采用的合成方法效率较高,可用于美罗培南的合成。

抗肿瘤吡咯三嗪类激酶抑制剂的合成

目的:设计与合成具有分子靶向性、低毒高效新型血管生成抑制剂类抗肿瘤药物吡咯三嗪。方法:以羟胺磺酸和2-吡咯甲醛为原料合成2,4-二氯吡咯[2.1-f][1.2.4]三嗪,然后进一步胺化、催化氢化得到11个吡咯三嗪类衍生物。结果:合成的化合物及中间体均经过核磁共振氢谱与质谱进行了结构表征,确证结构与目标产物一致。结论:合成了11个抗肿瘤吡咯三嗪类激酶抑制剂,该合成方法可靠、质量可控,能用于抗肿瘤吡咯三嗪类激酶抑制剂的合成。