UPLC-Q-Orbitrap HRMS法结合分子网络分析吴茱萸汤的化学成分

采用UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术结合分子网络,全面快速地分析和鉴定吴茱萸汤中的化学成分。使用Waters Acquity UPLC HSS T3型色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.8μm)进行色谱分离,离子源为HESI,在正、负离子模式下进行数据采集。随后,将质谱数据导入GNPS平台生成分子网络对化合物进行分类,再将质谱数据导入Compound Discover 3.2软件进一步对化合物进行鉴定。最终在吴茱萸汤中共鉴定出100个化合物,其中以黄酮类、生物碱类、有机酸类、萜类、糖类化合物为主,还有少量的苯丙素类、苯酚类、苷类化合物。其分析方法和结果对中药复杂体系的成分表征具有借鉴价值。

温脾养胃颗粒中黄芪甲苷和芍药苷含量测定方法及其应用

为了对中药方剂温脾养胃颗粒进行科学的质量控制,本研究建立了君药黄芪和白芍的主要成分含量测定方法并应用于制剂的稳定性研究。分别建立适用于温脾养胃颗粒中黄芪甲苷和芍药苷含量测定的UHPLC-MS/MS和HPLC-UV方法,并以芍药苷含量为指标,通过影响因素试验和经典恒温试验进行制剂稳定性研究,拟定贮藏条件,预测有效期。结果表明,黄芪甲苷和芍药苷的线性范围分别为1~60μg/mL(r=0.999 8)、10~100μg/mL(r=0.999 6),颗粒剂中黄芪甲苷和芍药苷的平均含量分别为0.126 mg/g、1.02 mg/g。颗粒剂的指标成分含量受温度及光照影响较小,但对环境湿度相对敏感,应密封置阴凉干燥处保存,有效期至少为1年。

非完全消化-火焰原子吸收法测定蛇蜕及蝉蜕中微量元素

目的测定蛇蜕、蝉蜕中钙、铁、锰、锌。方法用非完全消化法处理样品 ,以火焰原子吸收法测定。结果试液的黏度与其空白溶液的一致 ,无背景吸收干扰。对样品处理条件、化学干扰、检出限及特征浓度进行了考察。相对标准偏差小于 2. 9%。测定结果与灰化法一致 ,相对误差小于±3. 3%。结论在火焰原子吸收法中 ,用非完全消化法取代灰化法对蛇蜕、蝉蜕样品进行预处理是可行的。

血塞通泡腾片的制备及质量控制

目的制备血塞通泡腾片并建立相应的质量控制方法。方法以乳糖、甜菊素、酒石酸、碳酸氢钠、聚乙二醇-6000（PEG6000）等为辅料研制该泡腾片，高效液相色谱梯度洗脱法测定该片中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1的含量。结果崩解时限试验表明该泡腾片在5min内崩解。人参皂苷Rbl在3．4～27．21μg、人参皂苷Rg1在3．65-29．2μg、三七皂苷R1在0．85～6．8μg与峰面积具有良好的线性关系，r值分别为0．9999、0．9998、0．9999。其平均回收率分别为100．02％、99．85％、99．63％，RSD分别为1.48％、1．12％、1．51％（n=6）。结论血塞通泡腾片制备方法可行，质量控制方法可靠。

高效液相色谱法测定复方双花颗粒绿原酸的含量

目的建立复方双花颗粒中绿原酸的含量测定方法。方法高效液相色谱法PhenomenexC18分析柱(5μm,4.6mm×250mm);乙腈-0.4磷酸(10∶90,三乙胺调pH值为3.0±0.2)为流动相;流速:1.0mL/min;检测波长327nm。结果绿原酸回归方程为Y=3621.3701X+2.1458,r=0.9999(n=5),绿原酸浓度在12.0～28.0μg.mL-1范围内呈线性关系,平均回收率为98.53%,RSD为0.57%。结论方法简便、准确、快速,可作为该制剂的定量方法。

蚓激酶白蛋白纳米粒中的酶活力测定

目的:测定蚓激酶白蛋白纳米粒中蚓激酶的活力。方法:以对甲基苯磺酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐(TAME)为底物测定蚓激酶的活力,通过载药量与包封率2个指标进行质量评价。结果:白蛋白测定方法的RSD均小于0.3%,高、中、低浓度平均回收率分别为(99.47±0.93)%,(98.51±1.42)%,(98.69±2.43)%;蚓激酶测定方法的高、中、低浓度的RSD分别为0.62%,0.37%,1.82%,平均回收率分别为(99.25±1.98)%,(97.61±1.13)%,(97.15±2.21)%。蚓激酶白蛋白纳米粒的载药量为(4.84±0.41)%,包封率为(84.14±3.41)%。结论:通过测定蚓激酶白蛋白纳米粒中蚓激酶活性和白蛋白的含量,确定蚓激酶载药量与包封率,所建立的酶学测定方法快速简便、适用可行。

七氟烷和氯胺酮用于小儿麻醉后苏醒质量比较观察

目的:观察比较以七氟烷或氯胺酮为主导用于患儿麻醉后的苏醒质量。方法:将围手术期患儿60例分为七氟烷和氯胺酮组各30例。记录患儿出现体动或睁眼时间、出手术室时间、完全清醒时间及麻醉后并发症发生情况,并对其进行分析比较。结果:七氟烷组麻醉苏醒时间明显短于氯胺酮组(P<0.05),烦躁及噩梦等不良反应明显少于氯胺酮组(P<0.05)。结论:患儿麻醉后苏醒质量七氟烷组明显优于氯胺酮组。

HPLC法测定高原康胶囊中氨茶碱的含量

目的建立HPLC法以茶碱作对照测定高原康胶囊中氨茶碱的含量。方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,甲醇-0.05 mol.L-1磷酸二氢钠溶液(含0.2%三乙胺,磷酸调pH 4.0)(35∶65)为流动相,检测波长为245 nm;流速:1.0 m.l min-1;柱温:30℃。结果茶碱在16.34～65.38μg.ml-1的范围内线性关系良好(r=1.0000),平均回收率为99.59%,RSD为0.85%(n=9)。结论本方法简便、测定结果准确,重复性好,可用于高原康胶囊中氨茶碱的含量测定。

高效液相色谱法测定人血浆罗哌卡因浓度

目的建立罗哌卡因血浆药物浓度的高效液相色谱测定方法。方法采用安捷龙1101色谱分析系统;色谱柱：Nova-pak C18柱（3.9 mm×150 mm）,内标为布比卡因;流动相：甲醇∶蒸馏水=2∶1,流速1 ml/min,检测波长230nm。结果罗哌卡因标准曲线线性方程为C=0.990A-0.031（n=8,r=0.995,P〈0.01）,线性浓度范围为（0.10-4.00）mg/L;最低检测浓度0.10 mg/L。平均回收率为100.16%,日内及日间变异均小于6%。结论反相高效液相色谱法简便、灵敏、准确,可以用于临床上罗哌卡因血浆药物浓度的监测和药代动力学研究。

异氟烷对人精子运动功能和顶体反应影响研究

目的:观察异氟烷对人精子运动功能、体外获能以及精子顶体反应的影响,对有生育要求的男性提供临床用药依据。方法:收集我院男科门诊就诊的男性精子标本,从中筛选出18份活力正常精子的精液作为标本,每例精液均分成3份,分别放置于3个试管中,分别给予1.1%异氟烷(ISO1组)、2.2%异氟烷(ISO2组)和空气作为对照组,把所有的有机玻璃箱放置于孵箱培养5h,对精子的运动、获能、顶体反应进行评价。结果:1.1%和2.2%浓度的异氟烷作用于精子5h以后,与对照组相比,精子的运动活力、直线速度、曲线速度、平均速度均明显下降,P<0.05,差异有统计学意义,ISO1组和ISO2组比较,ISO2组的下降更为明显,呈现剂量依赖关系,即随着浓度的升高,精子的运动功能抑制越明显。对于精子获能的影响,与对照组比较,两种浓度的异氟烷均明显地抑制精子的体外获能,P均<0.05,差异均有统计学意义,ISO1组和ISO2组比较无明显差异,P>0.05。两组精子发生顶体反应的百分率均较处理前明显增加,P<0.05,差异有统计学意义。但是处理后两组间比较无明显差异。结论:异氟烷能够抑制精子的运动和获能,并且随着浓度的增加,抑制作用增强;异氟烷对精子顶体反应影响不明显。

HPLC法测定醒脑库克亚片中芦荟苷的含量

目的建立HPLC法测定维吾尔药醒脑库克亚片中芦荟苷含量的方法。方法色谱柱为Shimadzu ODS VP（4.6mm×250mm，5μm）；流动相为乙腈-水（25：75）；流速为1.0ml／min；检测波长为360nm；柱温：30℃。结果芦荟苷进样量在0.238-2.38℃g范围内呈良好的线性关系（r=0．9999），平均加样回收率为98．80％，RSD为2．0％（n=5）。结论本方法操作简单、结果准确、重复性好，可用于该制剂的质量控制。

HPLC法测定肾衰宁胶囊中的4种成分

目的建立HPLC法同时测定肾衰宁胶囊中丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B和大黄素的含量。方法采用Agilent Zorbax Eclipse XDB-C 18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈(A)-甲醇(B)-5 mL·L^-1磷酸溶液(C),梯度洗脱;流速:1.0 mL·min^-1;柱温:30℃;丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B的检测波长均为280 nm,大黄素的检测波长为254 nm。结果丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B和大黄素分别在66.79~1068.64(r 1=0.9996),5.63~90.15(r 2=0.9999),748.80~11980.80(r 3=0.9998)和500.00~8067.68μg·mL^-1(r 4=0.9999)范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为98.24%(RSD=0.13%),98.55%(RSD=0.45%),98.37%(RSD=0.30%)和99.44%(RSD=0.41%)。结论该方法分离效果好、简便、重复性好,适用于肾衰宁胶囊的质量控制。

呼吸道感染患者不同黏液型铜绿假单胞菌的分布及其耐药性比较

目的:比较呼吸道感染患者不同黏液型(黏液型和非黏液型)铜绿假单胞菌的分布及其在体外药物敏感性试验中对各种抗菌药物的耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供参考。方法:抽取2015年1月1日—12月31日间呼吸道感染患者标本中分离出的黏液型与非黏液型铜绿假单胞菌的鉴定和药敏试验资料,分析其对抗菌药物的耐药性。结果:2015年院内分离出铜绿假单胞菌541株,其中黏液型34株,非黏液型507株;标本主要来自呼吸内科、感染疾病科、中医科和内分泌等科室,非黏液型铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药性显著高于黏液型铜绿假单胞菌(P<0.05)。结论:黏液型铜绿假单胞菌体外药敏试验敏感性较高,但体内用药治疗效果不佳,可与能抑制细菌表面生物膜活性的药物联用治疗效果较为理想。

抗心绞痛新药雷诺拉嗪

雷诺拉嗪是一个新型的抗心绞痛药物,其抗心绞痛作用机制同其抑制心肌细胞动作电位中的晚期钠离子流及改善能量代谢有关。临床研究表明雷诺拉嗪可提高运动耐量,减少心绞痛发作次数,减少硝酸甘油用量。

孟鲁司特钠咀嚼片有关物质HPLC法的比较与优化

目的对国外药典收载的孟鲁司特钠咀嚼片的各种有关物质方法进行比较考证,通过优化建立专属性更好的HPLC方法。方法采用反相HPLC法,色谱柱为苯基柱(4.6mm×50mm,1.8μm),梯度洗脱,流动相A为20mmol·L-1Na2HPO4水溶液(用磷酸调pH至5.7),流动相B为乙腈;流速为1.2mL·min-1;检测波长为238nm;柱温为30℃。结果孟鲁司特钠咀嚼片的各个杂质在此色谱条件下能得到有效分离。结论该方法可用于孟鲁司特钠咀嚼片的有关物质检查与质量控制。

高效液相色谱法测定肝微粒体中氯胺酮代谢速率

目的为氯胺酮（KET）体外代谢研究提供新方法。方法于人体肝组织线粒体孵育液中加入不同浓度的KET；用高效液相色谱法（HPLC）测定孵育液中不同时点KET的药物浓度，计算KET的代谢速率。结果20例人肝脏微粒体中KET的代谢速率为5．4～11．2（平均8．2）nmol／（min·mg）protein；KET与内标布比卡因分离完全，不受微粒体内源性物质的干扰，保留时间分别为3．4min和5．8min。结论HPLC检测肝微粒体KET体外孵育液中的浓度灵敏度高，专一性强，适用于药物体外代谢速率的研究。

更昔洛韦药物-树脂复合物的体外释药动力学研究

目的制备更昔洛韦药物-树脂复合物并对其体外释药动力学进行考察。方法考察更昔洛韦药物树脂在不同释放介质、不同离子浓度及不同温度下的释药动力学。结果确定更昔洛韦药物树脂体外释药控制在37℃下,以0.1 mol.L-1HCl为释放介质进行释放度考察,其体外释药行为符合Viswannathan方程。结论体外释药动力学研究表明,更昔洛韦药物树脂的释药行为与释放介质中的离子种类及温度有关,离子强度对释药行为的影响不大。

银杏叶提取物诱导大鼠肝脏细胞色素P450酶蛋白的表达

【目的】研究银杏叶提取物对大鼠肝脏细胞色素 P450酶 CYP1A1、CYP1A2、CYP2B1/2、CYP3A1蛋白表达的影响。【方法】银杏叶提取物10mg/kg 和100mg/kg 两个剂量,大鼠经灌胃处理10d 后,取出肝脏,称重,制备肝微粒体,以未经处理者为对照组,测定 CYP1A1、CYP1A2、CYP2B1/2、CYF3A1的蛋白表达。【结果】CYP1A1、CYP1A2、CYP2B1/2、CYP3A1的蛋白表达在给药后比对照组显著升高,且存在明显的剂量依赖性。【结论】银杏叶提取物能显著诱导大鼠CYP1A1、CYP1A2、CYP2B1/2、CYP3A1的蛋白表达水平,故有可能影响与之同时服用的药物的疗效。

薄层扫描法测定汝安膜中盐酸小檗碱的含量

目的建立汝安膜中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法采用薄层扫描法对汝安膜中的盐酸小檗碱进行定量。结果盐酸小檗碱点样量在0.05～0.5μg呈良好的线性关系,平均回收率为99.22%,RSD=1.2%(n=6)。结论该方法准确、可靠、重现性好,可作为该膜剂的质量控制方法。