龙岩地区黄疸新生儿G6PD缺乏症基因突变类型分析

目的探讨龙岩地区黄疸新生儿G6PD缺乏症基因突变类型。方法选取我院新生儿科住院的黄疸患儿1253例,对生化诊断G6PD缺乏的142例患儿采用Snapshot技术平台进行常见的12种G6PD基因突变检测。结果142例患儿中男性135例,女性7例,均检出G6PD基因突变位点,共检出8种单一位点突变,分别是c.1376G>T(70例)、c.1388G>A(46例)、c.1024C>T(7例)、c.871G>A(5例)、c.95A>G(5例)、c.392G>T(4例)、c.1360C>T(2例)、c.487G>A(1例);2种复合突变c.1388C>A/c.1376G>T(1例)、c.1376G>T/c.871G>A(1例),其中c.1376G>T和c.1388G>A总占比81.69%。结论龙岩地区黄疸新生儿人群G6PD缺乏症发病率较高,男性检出率显著高于女性;c.1376G>T、c.1388G>A是龙岩地区黄疸新生儿G6PD缺乏症较常见的基因突变类型。

m6A甲基化修饰在前列腺癌发生发展中的调控机制

N6-腺苷甲基化(N6-adenosine methylation)是腺苷N6位点的甲基化形式,常出现在真核生物的mRNA中,是最常见的RNA内部修饰的方式之一。研究表明,m6A通过调节基因的表达来影响细胞的生物过程;同时m6A的调控因子也在各种癌症的发生、发展中发挥着关键作用。前列腺癌(prostate cancer,PCa)是一种常见的男性恶性肿瘤,超过60岁的男性的患病风险逐年攀升,并且随着人口老龄化的问题,可以预计PCa的患病数目会继续升高。近年来,关于m6A在肿瘤发生发展中的作用逐渐受到广泛关注,但是m6A甲基化修饰在PCa中的研究仍然有限,因此,进一步探讨二者之间的关系显得尤为重要。本文综述了近年来关于m6A甲基化修饰在PCa中的作用、机制及应用的研究进展,尤其详细综述了METTL3,FTO,YTHDF2三种经典的m6A相关调控蛋白质在PCa中的作用机制;并阐述了m6A在晚期PCa(例如:去势抵抗性前列腺癌,骨转移性前列腺癌)中的潜在应用。从甲基化修饰角度为PCa的早期诊断、治疗和预后挖掘一套有效治疗策略,为实现个体化治疗提供更多理论参考。

药物制剂中抗氧化技术的研究进展

药物的氧化给药物的使用带来了较大的安全隐患,采用有效的抗氧化技术后,药物中容易氧化的有效成分被保护起来,可为药物制剂工艺的发展带来很大益处。但相关数据库中很少有药物制剂中抗氧化技术的研究报道。在制剂技术中,通过加入抗氧剂、加入惰性气体隔绝空气、采用新型包装材料、新剂型等方法抗氧化,这些方法可以在很大程度上降低药物的氧化率。

超微粉碎技术用于脾胃宝外敷散制备工艺的优化研究

目的:对经微粉化与常规粉碎法制备的脾胃宝外敷散进行溶出情况对比研究,探索超微粉碎对外敷散质量的影响。方法:采用HPLC法测定两种粉碎方法制备的脾胃宝外敷散中主要有效成分阿魏酸、丁香酚的溶出情况。结果:超微粉碎工艺可使脾胃宝外敷散中当归和丁香的有效成分溶出量增加,最优工艺均为超微粉碎5 min,过200目筛。结论:超微粉碎技术可应用于脾胃宝外敷散中当归和丁香的制备,且均接近于生药材含量。

乳酸羟基乙酸共聚物微泡声学造影剂的制备与评估实验研究

目的制备乳酸羟基乙酸共聚物(polylactic-co-glycolicacid,PLGA)微泡声学造影剂,考察其理化及声学特性。方法复乳法制备不同聚乳酸/聚羟基乙酸(PLA/PGA)的微泡,考察其理化特性;体内外显影评价不同剂量、不同机械指数条件下微泡造影剂的声学密度(AD)变化规律。结果 PLGA微泡成品呈白色粉末状,以生理盐水或PBS稀释溶解后为乳白色混悬液,pH为6.5±0.3;光镜显示微泡大小均匀,分散程度好;微泡平均粒径1.2μm;Coulter计数显示0.01g多聚体微泡冻干粉溶于10ml蒸馏水中的浓度为(2～4)×109/ml;4℃与常温干燥储存的PLGA微泡10周后再分散其浓度、粒径、pH值无明显差异;体外显影显示声学密度随微泡浓度的升高而增大,同浓度下声学密度与机械指数(mechanicalindex,MI)呈直线相关关系;兔心脏造影检查可观察到PLGA微泡造影剂能顺利通过肺循环实现左心显影,当MI为0.2时,左室内声学密度值较其他3组(MI为0.6、1.0、1.2)均有非常显著性差异。结论 PLGA微泡造影剂具有较高的可控性和稳定性,微泡共振频率较高,可以顺利通过肺循环实现左心室显影。

应用多种教学方法优化生物化学教学效果

目的优化生物化学教学效果,提高教学质量。方法采用讲授法、案例法、互动式等教学方法传授生物化学基本知识。结果将抽象的生物化学知识、繁杂的代谢途径简单化、形象化,有助于学生理解和掌握,增加学生的学习兴趣和学习的主动性。结论应用适当的教学方法优化了生物化学教学效果,提高了教学质量。

后腹腔镜治疗输尿管上段结石67例临床分析

目的探讨后腹腔镜技术治疗输尿管上段结石的安全性和可行性。方法 2008年10月至2012年2月我院采用后腹腔镜技术治疗输尿管上段结石病例67例,其中男41例,女26例;年龄21～72岁,平均48岁;左侧40例,右侧27例;结石直径0.9～2.6 cm,平均1.42 cm;以尖刀、切开刀或百克剪切开输尿管,取出结石后放置双J管,用5或4个0号可吸收缝线缝合输尿管1～3针。结果本组共67例,3例因术中病情变化转开放手术;手术时间50～260 min,平均104 min,其中2010年6月之前早期开展手术平均时间154 min,2010年7月至今共开展46例,平均手术时间约81 min;术中出血20～100 ml,平均40 ml;术后3～7 d拔除后腹腔引流管,3～8 d后拔除尿管;术后住院时间4～10 d,平均6 d。2例出现早期漏尿现象,给予继续留置导尿观察均于术后2周内愈合。术后门诊随访10～36个月,均未见结石复发和输尿管狭窄。结论后腹腔镜输尿管切开取石术治疗输尿管上段结石安全、有效,随着操作的熟练和技巧的提高,手术时间会不断缩短。

海参皂苷nobiliside A脂质体及其溶血行为的初步研究

本文旨在制备海参皂苷nobiliside A(Nob A)脂质体,建立脂质体中Nob A的含量和包封率的测定方法,考察该脂质体的体内外溶血行为。以高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定脂质体中Nob A含量,微柱离心法测定其包封率。以溶血率和包封率、粒径为指标,单因素考察了制备方法、磷脂用量、胆固醇用量和药脂比。根据单因素的考察结果,以薄膜超声法制备3批脂质体,与同浓度的药物溶液进行体内外溶血行为的比较。结果显示:用于含量测定和包封率测定的HPLC-ELSD和微柱离心法准确、快速,采用薄膜超声法制备的脂质体形态圆整,粒径较为均匀。当磷脂与胆固醇比例为2∶1,药脂比为1∶40时,Nob A脂质体的平均包封率为95.7%,平均粒径为87.6nm。Nob A以脂质体作为给药载体,其体内外溶血行为大大降低,有望成为静脉注射用脂质体。

pH及温度敏感型生物可降解嵌段共聚物的研究进展

pH及温度敏感型生物可降解嵌段共聚物是指生物可降解材料与pH敏感单体聚合或其本身按照一定序列聚合而成的一种高分子材料,对环境的pH及温度变化产生应答。本文结合近年的研究报道,阐述了各种pH及温度敏感型生物可降解嵌段共聚物的作用机制和应用特点。目前,对pH及温度敏感型生物可降解嵌段共聚物的研究备受关注,其能较好的控制药物释放速度,并具有良好的生物相容性,在智能给药系统研究领域有着广阔的应用前景。

地塞米松磷酸钠温度敏感原位凝胶的特性研究

本文以泊罗沙姆Pluronic F127为温度敏感原位凝胶材料,考察了PluronicF127与Pluronic F68不同浓度处方对地塞米松磷酸钠温度敏感原位凝胶的胶凝温度、相转变温度、凝胶强度、稳态黏度、溶蚀和药物释放行为等特性的影响。采用试管倒转法测定胶凝温度;旋转流变仪测定相转变温度、弹性模量、稳态黏度等流变学参数;无膜溶出法测定凝胶的溶蚀行为;HPLC测定地塞米松磷酸钠的释放度。结果表明,随着处方中F127浓度的增高,凝胶的胶凝温度和相转变温度降低,黏度和弹性模量增加,溶蚀速率和药物释放速率减慢;而处方中F68对凝胶特性的影响与F127相反。温度敏感原位凝胶在低温时为牛顿流体,黏度很小;随着温度升高,黏度增大;当增至相转变温度附近,表现出典型的假塑性流体特征;药物释放速率受控于凝胶溶蚀速率,二者遵循零级动力学方程。处方中含F12722.5%/F682.5%的地塞米松磷酸钠温度敏感原位凝胶的性质与临床治疗要求基本吻合,有望在临床中获得应用。

紫杉醇自组装核壳型纳米胶束的制备与性能

本文合成了聚乙二醇-聚谷氨酸苄酯（polyethylene glycol-polybenzyl-L-glutamate，PEG-PBLG）两亲嵌段共聚物，并采用超微透析法制备了紫杉醇／PEG-PBLG核壳型纳米胶束。通过高效液相色谱测定了胶束的载药量及药物包封率；采用动态光散射法测定了胶束的粒径及分布；通过体外试验研究了紫杉醇／PEG-PBLG胶束的释药特性；采用四噻唑蓝法考察了紫杉醇／PEG-PBLG胶束的体外细胞毒性；通过裸鼠的抑瘤试验评价了紫杉醇胶束对人肝癌细胞的疗效。结果表明，PEG-PBLG胶束能包埋疏水性药物紫杉醇；紫杉醇／PEG-PBLG胶束的粒径为80—265nm，且随着载体共聚物PBLG嵌段相对分子质量的升高而增大；紫杉醇／PEG-PBLG胶束的体外释放具有缓释特性；当紫杉醇浓度大于20μg·mL^-1时，紫杉醇／PEG-PBLG胶束的细胞毒性低于相应浓度的紫杉醇／聚氧乙烯蓖麻油注射剂（P〈0．05），紫杉醇／PEG-PBLG胶束具有与紫杉醇／聚氧乙烯蓖麻油注射剂相似的抑制肿瘤作用。综上所述，紫杉醇／PEG-PBLG纳米胶束具有较均匀的粒径及粒径分布、缓释特性、低毒和较好的抗肿瘤作用。

斑蝥素对A549细胞增殖抑制作用的研究

目的研究斑蝥素对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用和机制。方法采用MTT法检测斑蝥素对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪分析A549细胞周期及斑蝥素对细胞周期的影响。结果斑蝥素对A549细胞的增殖有抑制作用;其抑制作用机制为使A549细胞周期出现明显的G2/M期阻滞。结论斑蝥素对人肺癌A549细胞的增殖有抑制作用。

体外扩散池法评价瑞巴派特经大鼠肠黏膜的透过特性

研究瑞巴派特经空肠、回肠和结肠黏膜的透过特性。制备大鼠不同区段肠黏膜样本,使用体外扩散池法,评价80μmol.L-1瑞巴派特经空肠、回肠和结肠黏膜的经时吸收方向(M-S)和分泌方向(S-M)的透过量和透过系数(Papp),瑞巴派特在接受室中的浓度用HPLC法测定。结果表明,瑞巴派特经空肠和回肠的透过性高于结肠。比较M-S方向和S-M方向的透过性发现,药物在空肠和结肠经两个方向的透过性无显著差异,但经回肠透过时,分泌方向的透过性高于吸收方向的透过性(P<0.05)。瑞巴派特经大鼠肠黏膜的透过性存在区段差异。瑞巴派特可能不受肠黏膜P-糖蛋白转运体的调控。

miR-21慢病毒载体构建及对骨髓间充质干细胞凋亡的影响

背景:骨髓间充质干细胞移植后凋亡成为治疗化疗性卵巢早衰效果欠佳的主要原因。miR-21参与细胞增殖与凋亡的调控,有重要的抗凋亡作用。目的:构建miR-21慢病毒载体并感染骨髓间充质干细胞,观察其对化疗药物磷酰胺氮芥诱导的骨髓间充质干细胞凋亡的影响。方法:构建携带miR-21基因慢病毒表达载体LVX-shRNA2-rno-miR-21-5p,双酶切及基因测序鉴定证实载体构建成功。对载体进行包装、测定病毒滴度。将慢病毒颗粒以不同感染复数(20和40)感染骨髓间充质干细胞,检测感染效率,使用real-time PCR法检测骨髓间充质干细胞中miR-21的表达。流式细胞仪、Hoechst33342染色检测骨髓间充质干细胞在磷酰胺氮芥模拟的化疗微环境中的凋亡率。结果与结论:(1)成功构建miR-21慢病毒载体,病毒滴度约为6×10^(11) CFU/L;(2)载体转染骨髓间充质干细胞效率达90%以上;(3)miR-21组1(感染复数为20)、miR-21组2(感染复数为40)miR-21表达量明显高于骨髓间充质干细胞组及空载组(P=0.000);(4)转染组骨髓间充质干细胞的凋亡率、凋亡指数均低于空载组及骨髓间充质干细胞组(P=0.001);(5)实验成功构建大鼠miR-21慢病毒载体系统,miR-21上调能抑制骨髓间充质干细胞凋亡,促进细胞增殖。

我国木本药用植物开发利用发展思路

木本药用植物不仅是森林的重要组成部分,也是药用植物不可缺少的资源。以我国木本药用植物为研究对象,从该种类的特点到产业生产现状、存在的主要问题及开发利用主要技术措施等方面展开了阐述,为我国木本药用植物开发利用提供了建设性的发展思路和科学依据。

盐酸奥昔布宁贴剂的制备及质量评价

目的制备盐酸奥昔布宁透皮贴剂,并对其质量进行评价。方法以丙烯酸树脂为基质材料,制备奥昔布宁贴剂,采用.HPLC法测定贴剂中药物含量;采用改良Franz扩散池法,考察贴剂的经皮渗透速率;采用《中国药典》附录法考察贴剂的体外释放行为和黏附性能。结果奥昔布宁贴剂体外72 h释药可达85%以上,其透皮稳态流量为8.01μg·(cm^2·h)^(-1),并可维持3~4 d的零级透皮速率,初黏力钢球号在16~18之间,持黏力在30~35 min之间。结论自制盐酸奥昔布宁贴剂基本达到国外上市药品质量标准。

大株红景天注射液治疗晚期非小细胞肺癌患者的临床效果

目的探讨大株红景天注射液治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的临床效果。方法选取2018年1~12月于滨州医学院附属医院住院的120例晚期NSCLC患者作为研究对象,采用随机数字表法将其分为对照组和治疗组,每组各60例。对照组予以复方苦参注射液及对症治疗,治疗组在此基础上给予大株红景天注射液进行治疗。比较两组患者治疗前后的血清肿瘤标志物水平、中医症状积分及免疫功能指标水平;比较两组患者的近期疗效;比较两组患者治疗前后的生活质量评分。结果两组患者治疗后的癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、糖类抗原19-9(CA19-9)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平均低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组患者治疗后的CEA、CYFRA21-1、CA19-9、NSE均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后的咳嗽咯痰、胸闷气短、腹胀纳呆、恶心欲吐和四肢无力中医症状积分低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组患者治疗后的咳嗽咯痰、胸闷气短、腹胀纳呆、恶心欲吐和四肢无力中医症状积分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组患者的治疗总有效率、稳定率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者的CD4+、CD4+/CD8+高于治疗前,CD8+低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组患者治疗后的CD4+、CD4+/CD8+高于对照组,CD8+低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组患者治疗后的呼吸困难、食欲减退、咳嗽、咳血、疼痛评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大株红景天注射液可以缓解晚期NSCLC患者中医证候,提高晚期NSCLC患者的临床治疗效果,提高免疫功能,改善临床症状,值得临床应用。

溴脱氧尿苷标记滞留细胞表达干细胞标记物神经巢蛋白

背景:干细胞和某些种类的肿瘤细胞都存在永生化DNA链的不对称分裂现象,具有自我更新长期存活以及相对无限增殖等特征,这些生物学特性为它们多重变异累积提供潜在的可能性。溴脱氧尿苷能够在细胞代谢过程中掺入到DNA双链中,可以观察标记物长期存在状况。目的:拟应用免疫荧光双染法观察C6胶质瘤细胞中的溴脱氧尿苷标记滞留细胞是否表达干细胞标记物神经巢蛋白。设计、时间及地点:观察对比细胞学实验,于2006-01/2007-02在哈尔滨医科大学第一临床附属医院神经外科研究所完成。材料:Wistar大鼠由哈尔滨医科大学第一临床医院实验动物室提供,C6胶质瘤细胞由哈尔滨医科大学第一临床医院神经外科研究所提供。方法:C6胶质瘤细胞处于指数生长期时加入溴脱氧尿苷,细胞培养2d后更换不含溴脱氧尿苷的细胞培养液。分别在不同时间点用免疫荧光法测定溴脱氧尿苷阳性细胞数目变化,确定溴脱氧尿苷在肿瘤细胞中的标记滞留时间,同时用免疫荧光双染法检测这些溴脱氧尿苷标记滞留细胞是否能够表达干细胞标记物神经巢蛋白。主要观察指标:C6细胞中溴脱氧尿苷免疫荧光染色细胞随时间变化的情况,溴脱氧尿苷-神经巢蛋白免疫荧光双染色细胞数目。结果:细胞指数生长期时溴脱氧尿苷的标记阳性率达97%以上,溴脱氧尿苷标记结束之后,随着时间的延长,阳性细胞数目逐渐减少,到第12天,仅残留少量阳性细胞,数目占细胞总数的1.77%,随后的一两天阳性细胞几乎无法测出。溴脱氧尿苷标记后第12天,溴脱氧尿苷标记滞留的阳性细胞神经巢蛋白染色也为阳性,阳性率为1.61%。结论:C6胶质瘤细胞中的溴脱氧尿苷标记滞留时间为12d,溴脱氧尿苷标记滞留细胞能够表达神经巢蛋白。

右美托咪定对胸腔镜肺癌根治术患者围手术期炎症反应及氧化应激反应的影响

目的观察右美托咪定对胸腔镜肺癌根治术患者围手术期炎症反应及氧化应激反应的影响。方法全麻单肺通气行胸腔镜肺癌根治术的患者100例,随机分为右美托咪定组(A组)和对照组(B组),每组50例。A组麻醉诱导前20min静脉注射盐酸右美托咪定负荷量1μg·kg-1,15min输完,随后给予维持量0.5μg·kg-1·h-1,手术结束前20min停药;B组给予等量0.9%氯化钠溶液。气管插管后5min(t0)、单肺通气(OLV)30min(t1)、OLV60min(t2)、完成手术时(t3)采静脉血,酶联免疫吸附测定(ELISA)法测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-8浓度,检测丙二醛(MDA)浓度和超氧化物歧化酶(SOD)水平。行动脉血气分析,计算氧合指数。结果与t0比较,t1-t3两组血清SOD活性、氧合指数均降低,MDA、TNF-α、IL-6及IL-8浓度均升高(P<0.01);与B组比较,A组t1-t3时间点血清SOD活性、氧合指数更高,MDA、TNF-α、IL-6及IL-8浓度更低(P<0.01)。结论右美托咪定可减轻胸腔镜肺癌根治术患者围手术期炎症反应及氧化应激反应。