尖吻蝮蛇毒中一种新抗凝血因子的纯化及特性研究

应用阴离子交换色谱和凝胶过滤色谱,从尖吻蝮蛇毒中分离出一个新的抗凝血因子。经Superdex75HR10/30预装柱检测,纯度达99.9%。SDS-PAGE检测为单一条带,相对分子量52.2k。该因子有显著的抗凝血活性,延长白陶土部分激血活酶时间的临界浓度为0.2mg/ml,无纤溶活性、磷脂酶A2活性和出血活性。

沙蝰蛇毒磷脂酶A_2分子进化特征的研究

目的 :了解沙蝰蛇毒 PL A2 分子在进化过程中的特点 ,特别是基因水平上的特点。方法 :采用不加权成对群算术平均法( UPGMA)构建来自沙蝰蛇毒的 5种 PL A2 的分子进化树 ;将 PL A2 c DNA顺序中编码区内的碱基进行两两比较 ,统计和分析编码氨基酸密码的三个碱基不同位置的取代数及同义取代 ( S)和非同义取代 ( N )数目 ;并分别统计和分析这些 PL A2 的二联碱基胞嘧啶 -鸟嘌呤 ( Cp G)和鸟嘌呤 -胞嘧啶 ( Gp C)的数目及分布情况。结果 :1成功地构建了与 PL A2 性质、功能和彼此间关系相符的分子进化树 ;2碱基取代以第 、 位为多 ,同义取代的数目也远低于非同义取代的数目 ,S/ N远小于 1;3编码区内的二联碱基顺序 Cp G出现的频率非同寻常的高 ,Gp C/ Cp G之比为 1.12～ 1.2 5。非编码区内 Cp G则明显受到压抑而数目很少。结论 :沙蝰蛇毒的 PL A2 基因有加速进化的情况发生 ,可能与其基因中异常高的 Cp

略论衰老、应激、亚健康的生化同源性

1关于应激与亚健康的相关性1．1亚健康上世纪80年代中期，前苏联学者N·布赫曼教授以及后来的许多学者通过研究发现，人体存在着一种非健康非患病的中间状态，人们把这种状态称为亚健康状态，也称病前状态、临床前期、潜病期等。由于现代人类社会的环境恶化加剧和运行速度加快，人类面临着越来越多的紧张和压力，这些压力通过心理生理过程转变成为人体的应激状态或称之为亚健康胁迫。1．

活化C蛋白样酶的筛选与特性研究Ⅱ.分离纯化与特性研究

运用阴离子交换色谱和凝胶过滤色谱从蝮蛇毒中分离出活化C蛋白样酶(APCL)。经SDS-PAGE和凝胶过滤色谱检测纯度,表明该蛋白为单一组分。SDS-PAGE测得分子量为15.3k,等电聚焦法测得等电点为4.80。酶学动力学研究表明APCL水解显色肽反应的Km为3.16×10-5mol/L、Vmax为1.16×10-4mol·L-1·min-1。

蝮蛇毒介导小鼠急性心肌损伤及心肌组织TNF-α表达的研究

目的探讨蝮蛇毒介导小鼠心肌组织中TNF-α蛋白表达变化与不同蝮蛇毒剂量、中毒时间的关系。方法确定LD50蝮蛇毒注射剂量。将96只小鼠随机分为空白对照组、蛇毒低剂量(0.5mg/kg)组、蛇毒高剂量(1.0mg/kg)组,并按中毒时间设4水平组,即3、6、24、48h组,采集小鼠心肌标本,免疫组化检测心肌组织中TNF-α蛋白的表达情况。结果蛇毒低剂量组及蛇毒高剂量组小鼠心肌TNF-α蛋白表达明显高于空白对照组(均P<0.05);而蛇毒高剂量组明显高于低剂量组(P<0.05);6h组明显高于3h组(P<0.05);24h组高于6h组(P<0.05);48h组高于24h组(P<0.05)。随着蝮蛇毒剂量的增加、中毒时间的延长,心肌TNF-α蛋白的表达越高。结论蝮蛇毒导致小鼠急性心肌损伤,TNF-α蛋白表达增高,且随着蝮蛇毒剂量的增加、中毒时间的延长,心肌TNF-α蛋白的表达越高,呈一定的时间、剂量效应趋势,提示TNF-α蛋白过度表达可能是蝮蛇毒导致小鼠急性心肌损伤的机制之一。

钙流拮抗药对眼镜蛇心脏毒升高大鼠心肌胞浆Ca^（2＋）作用的影响

Ｆｕｒａ－２荧光测定实验显示，眼镜蛇心脏毒（ＣＴＸ）能明显升高新鲜分离的大鼠心肌细胞的胞浆Ｃａ２＋浓度。维拉帕米在完全阻断高Ｋ＋引起胞浆Ｃａ２＋升高的浓度下（１μｍｏｌ·Ｌ－１）．能明显抑制ＣＴＸ作用，但不能阻断之。１．５μｍｏｌ·Ｌ－１ＣＴＸ使离体大鼠Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ心脏收缩幅度逐渐减少，最后心脏停搏于收缩期。维拉帕米及硝苯吡啶均能明显延长心脏的搏动时间，但不能阻止ＣＴＸ引起的心脏停搏。结果提示，ＣＴＸ引起膜去极化使电位依赖性Ｃａ２＋通道开放不是ＣＴＸ触发Ｃａ２＋内流的唯一机理。

虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ-(HWTX-Ⅰ)28肽类似物的化学合成与活性鉴定

虎纹捕鸟蛛毒素-(huwentoxin-,HWTX-)是从我国虎纹捕鸟蛛毒素中分离纯化得到的一种多肽类神经毒素.该多肽分子由33个氨基酸残基组成,含三对二硫键.其一级结构和三级结构均已测定.弄清该毒素的活性部位,是研究其结构功能关系的基础.用固相Fmoc化学合成的方法,合成了虎纹捕鸟蛛-的28肽类似物.该突变体去掉了天然毒素分子N端的Alal和C端的Lys30-Trp31-Lys32-Leu33共5个残基.用氧化还原型谷胱甘肽法完成二硫键配对,并用HPLC进行纯化,所得突变体与天然HWTX-的紫外光谱相似.质谱鉴定确认合成产物正确,分子量为3124,浓度为1×10-5g/ml的突变体能可逆阻断小白鼠膈神经-膈肌的接头传递,阻断时间为60～70min.与天然毒素比较,活性有所下降.结果说明HWTX-的N端、C端残基对其生物活性有一定影响,但不是位于活性中心的重要残基.由结果推测。

日本药品风险管理简介及启示

为建立我国药品风险管理体系提供参考。立足日本药品风险管理,研究构成风险管理体系的重要元素:法律法规、组织系统、监测和评价系统、安全信息公开制度、药害救济制度等;在对比分析中探讨日本先进经验对建立我国药品风险管理体系的启示。通过完善立法,建立我国药品风险管理法规系统;通过职能调整,完善我国风险管理行政和技术支撑机构;通过再审查、再评价,形成严密的上市后监测和评价系统;通过公开信息,提高风险管理水平和科学决策能力;通过制度配套,构建我国药品风险管理体系。

尖吻蝮蛇毒中一种新类凝血酶的分离纯化

用阴离子交换色谱和凝胶过滤色谱技术,从尖吻蝮蛇毒中纯化得到一个具有凝血活性的组分。经Superdex75HR10/30预装柱检测,纯度达99.91%。SDS-PAGE显示为单一条带,还原、非还原条件下分子量分别为59.25k、52.58k。该组分的凝血酶比活为41.5u/mg,精氨酸酯酶比活为14.29u/mg,但不激活血浆凝血因子ⅩⅢ。EDTA不能抑制其凝血活性,而苯甲磺酰氟则产生不可逆抑制作用。结果表明该酶是一种新尖吻蝮蛇毒类凝血酶。

两个东亚钳蝎神经毒素cDNA的克隆和序列分析

构建了东亚钳蝎毒腺组织 c DNA文库 ,用 PCR筛选到两个新的神经毒素全长 c DNA,其开放阅读框(ORF)包括 :信号肽、成熟毒素和 /或额外氨基酸序列 ,它们编码的成熟毒素分别命名为 BmαTX9和 Bm IT( cp) 2 .序列分析表明 ,BmαTX9为抗哺乳动物神经毒素 ;Bm IT( cp) 2为痉挛型昆虫毒素 .文章还对东亚钳蝎神经毒素的命名 ,分类以及进化等问题进行了初步的探讨 .

272例围术期病人抗生素应用分析

目的 :了解围术期抗生素使用情况 ,推动抗生素的合理应用。方法 :调查我院 1998～ 2 0 0 0年住院手术病人围术期抗生素的应用状况 ,包括抗生素使用频次、种类、联合用药、药敏试验等。结果 :围术期使用抗生素的病例占总病例的 97.0 % ,联合用药中二联用药占 78.0 % ,治疗过程中使用了 3种以上抗生素的有17 0 % ,使用抗生素在 4d以上的达 72 .4 %。结论 :必须重视围术期抗生素的合理应用。

7种蝎毒的高效液相分析及毒理学研究

目的：观察来源于钳蝎科中不同亚科及属的７种蝎毒的蛋白／多肽图谱和毒性。方法：采用高效反相液相色谱法和小鼠半数致死量（ＬＤ５０）测定法。结果：主产于我国的ＢｕｔｈｕｓｍａｒｔｅｎｓｉＫａｒｓｃｈ（东亚钳蝎，ＢＭＫ）蝎毒中的蛋白／多肽图谱与ＬｅｉｕｒｕｓｑｕｉｎｑｕｅｓｔｒｉａｔｕｓｆｒｏｍＮｏｒｔｈＡｆｒｉｃａ（ＬＱ），ＢｕｔｈｏｔｕｓＪｕｄａｉｃｕｓ（ＢＪ）和Ｂｕｔｈｕｓｔａｍｕｌｕｓ（ＢＴ）相近，与ＴｉｔｙｕｓＳｅｒｕｌａｔｕｓ（ＴＳ）和ＣｅｎｔｒｕｒｏｄｅｓＳｃｕｌｐｔｕｒａｔｕｓ（ＣＳ）稍远之，而与ＳｃｏｒｐｉｌＭａｕｒｕｓＰａｌｍａｔｕｓ（ＳＭＰ）差别尤甚。从ＢＭＫ中分离出的活性组分ＳＶＣ在ＴＳ中含量较低，而在ＣＳ，ＳＭＰ中未见。７种不同种属蝎毒对小鼠的ＬＤ５０有明显差异。７种蝎毒的毒性（腹腔注射）大小依次排列如下：ＬＱ＞ＴＳ＞ＣＳ＞ＢＴ＞ＢＪ＞ＢＭＫ＞ＳＭＰ。结论：上述结果为比较钳蝎科亚科间蝎毒的理化特性及毒性差异提供了新的实验依据，对不同来源蝎毒的鉴别及有效成分的分离、纯化均有重要的参考价值。

化妆品引起皮肤不良反应120例临床探讨

目的为了解化妆品引起皮肤各种不良反应状况。方法对门诊128例化妆品不良反应患者进行临床分析,并对患者做了可疑致病化妆品斑贴试验。结果患者中以中青年女性居多,临床表现主要为接触性皮炎(95%),大部分是由一般化妆品引起,其次为祛斑增白,16例患者做了可疑化妆品斑贴试验,有8例阳性。结论及时处理化妆品不良反应,减少并发症。

A-超家族芋螺毒素研究进展

芋螺毒素是生物毒素中迅速发展的新领域,是很有价值的药物或药物先导化合物,其中A-超家族芋螺毒素是研究最早、了解较为全面的芋螺毒素家族之一,由于其高丰度、化学多样性、强专一性作用等突出特点成为创新药物发展的宝库。A-超家族芋螺毒素因能选择性阻断nAChRs的某种亚型,使它们可作为鉴定nAChRs及其亚基的有效工具。此外,在药理学方面,A-超家族芋螺毒素除了作为镇痛药物已进入临床研究外,也有望开发成用于治疗焦虑症、帕金森氏病、肌肉紧张和高血压等病症的药物。

重组肠激酶酶切Trx-rPA融合蛋白的研究

重组肠激酶(rEK)酶切重组硫氧还蛋白瑞特普酶融合蛋白(Trx-rPA),环境pH较高,rEK的酶切活性也较强,但融合蛋白裂解后产生的瑞特普酶(rPA)易转化成降解rPA。Lys对rEK酶切Trx-rPA的活性及对rPA向降解rPA的转化均无抑制作用。氨基己酸对rEK酶切活性的抑制作用与Arg相似,但对rPA有较好的保护作用。

O-超家族芋螺毒素研究进展

O-超家族芋螺毒素是芋螺毒素中较复杂的超家族之一,它包括δ-、μO-、ω-、κ-等若干成员,通常由24～33个氨基酸组成,具有相同的三对二硫键骨架,形成ICK模体,能特异性作用于电压门控离子通道。本文主要对该芋螺毒素生物化学及分子遗传学特征、生理学和药理学特征、结构与性能的关系及应用研究与前景等进行综述。

我院2011～2012年住院患者病原菌检测及常用抗菌药物的耐药分析

目的：探讨分析我院常见病原菌类型及其对抗菌药物的耐药性。方法选择2011～2012年在我院接受诊治患者中获取的368株病原菌作为研究标本，检测病原菌类型，同时检测分析其对常用抗菌药物的耐药性。结果病原菌检测结果显示以革兰阴性菌为主，主要包括大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌；革兰阳性菌主要包括金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌。耐药性检测结果显示，革兰阴性菌对第三代头孢药物、阿米卡星、阿莫西林/克拉维酸钾、氨苄西林、氨曲南以及亚胺培南的耐药性较低；革兰阳性菌对利福平和万古霉素的耐药性较低。结论通过对患者病原菌类型以及病原菌对常用抗菌药物的耐药性检测，能够为临床合理使用抗菌药物提供参考，提高疾病治疗的有效率，预防和控制医院感染的发生。