hUMSCs外分泌上清联合替莫唑胺在不同胶质瘤细胞系中的协同增敏作用

目的:探讨人脐带间充质干细胞外分泌上清(hUMSC-CM)联合替莫唑胺(TMZ)在不同胶质瘤细胞系中的协同增敏作用及潜在机制。方法:采用2种血清剥夺法(24和48 h分批次撤血清法)收集hUMSC-CM并制备成冻干粉,设置5种浓度(0、1、3、6和9 g/L)处理大鼠恶性胶质瘤细胞系RG-2、人星形细胞瘤细胞系U251和人胶质母细胞瘤细胞系LN-428。通过CCK-8实验检测hUMSC-CM作用于胶质瘤细胞24、48和72 h后的肿瘤抑制可行性及敏感度。HE染色结合CCK-8法确定6种浓度(0、25、50、100、200和400µmol/L)的TMZ作用于胶质瘤细胞48 h后化疗敏感性的差异。筛选出低、高2种浓度(3和9 g/L)的hUMSC-CM和低、中、高3种浓度(50、100和200µmol/L)的TMZ配伍,作用于胶质瘤细胞后检测细胞活力和病理形态学变化。TUNEL染色检测细胞凋亡;流式细胞术分析细胞周期变化;Western blot检测凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、cleaved caspase-8和cleaved PARP1,以及自噬相关蛋白beclin-1和LC3的表达变化,探讨hUMSC-CM与TMZ体外联合给药协同增敏的作用机制。结果:3种胶质瘤细胞系对hUMSC-CM和TMZ的敏感度为RG-2>U251>LN-428。hUMSC-CM(3和9 g/L)与TMZ(50、100和200µmol/L)配伍给药对胶质瘤细胞生长的抑制作用比单独给药组显著增强(P<0.05),且随着配伍药物剂量的增加而增强。其中,9 g/L hUMSC-CM(C9)与50µmol/L TMZ(T50)配伍可有效抑制胶质瘤细胞生长。与C9或T50组相比,CCK-8实验显示C9+T50组细胞活力显著下降(P<0.05),HE染色和TUNEL检测结果显示C9+T50组细胞形态变化明显,出现典型凋亡形态学特征,流式细胞术结果显示C9+T50可诱导胶质瘤细胞周期发生阻滞,Western blot结果显示C9+T50组细胞中cleaved caspase-3、cleaved caspase-8、cleaved PARP1、beclin-1和LC3-II/LC3-I水平显著升高(P<0.01)。结论:(1)hUMSC-CM与TMZ配伍给药对胶质瘤细胞的抑制作用具有广谱性,且两者之间存在增敏作用,在不同细胞系中呈现不同的增敏效果。(2)hUMSC-CM提高胶质瘤细胞对TMZ敏感度的机制可能与调节caspase-8/caspase-3/PARP1信号通路及自噬通路、诱导胶质瘤细胞发生凋亡和自噬有关。

干细胞移植患者白消安暴露量的估算模型研究

目的采用有限采样法建立接受自体造血干细胞移植(autologous stem cell transplantation,ASCT)的淋巴瘤患者体内白消安暴露量-药时曲线下面积(area under the concentration-time curve,AUC)的估算模型。方法选取12名适合接受ASCT的淋巴瘤患者,采用含白消安105 mg·m^(-2),静脉滴注3 h的预处理方案,分别于白消安第1剂输注开始后1 h,输注结束后5 min,1、2、4、6、18 h采集血样,采用液质联用法进行白消安血药浓度测定。采用传统药动学方法计算白消安的临床药动学参数后,采用多元线性逐步回归分析法,建立有限采样法的白消安的AUC 0-t估算模型。以Jackknife法和Bootstrap法进行模型内部验证,采用Bland-Altman图评价经典药动学方法与有限采样法的一致性。结果采取有限采样法得出以AUC对C 60min、C 180min、C 300min进行多元线性回归的方程分析,方程的线性关系和预测效果最好,为AUC 0-t=295.003C 60min+233.050C 180min+273.163C 300min-1202.713,其中r 2为0.995,平均预测误差为-0.87%,均方根误差为2.40%。结论采用三点法估算的有限采样法模型,可以用于接受ASCT的淋巴瘤患者体内白消安AUC 0-t的估算,为临床合理应用白消安提供参考。

灵芝康爱芝宝增强环磷酰胺抑制小鼠乳腺癌肺转移的增效减毒作用

目的探讨灵芝康爱芝宝(GanoExtra)与环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)联用对抑制小鼠乳腺癌肺转移的增效减毒作用以及对免疫功能的影响。方法通过CCK-8实验验证GanoExtra对肿瘤细胞MCF-7和4T1的毒性;尾静脉注射4T1细胞建立小鼠乳腺癌肺转移模型,设立4T1模型组、CTX组、GanoExtra组和GanoExtra+CTX组,另设对照组。21 d后麻醉处死小鼠,记录小鼠体重、肺转移灶数;肺和脾脏系数;测定小鼠脾脏细胞的活性和NK细胞的活性;测定小鼠血样中各细胞数量;流式细胞术测定血样中CD4^(+)和CD8^(+)T细胞的含量;ELISA法检测血清中TNF-α和IL-6含量;HE染色法观察肿瘤及各组织病理形态学变化;CFSE染色测定GanoExtra对CD8^(+)T细胞的增殖作用。结果在体外,GanoExtra可明显抑制MCF-7和4T1肿瘤细胞活性;在乳腺癌肺转移模型中,与模型组相比,GanoExtra组小鼠脾脏系数和血液WBCs含量明显降低,RBCs、NK细胞、脾细胞活性、CD3^(+)和CD8^(+)细胞比例明显升高;治疗结束后,与CTX组相比较,GanoExtra+CTX组肺转移灶数和肺脏系数明显降低,小鼠血液HGB、CD8^(+)细胞、IL-6和TNF-α明显升高。在体外10 mg·L^(-1)的GanoExtra可明显促进CD8^(+)T细胞增殖。结论GanoExtra可以提高CTX对肿瘤转移的抑制作用,减少由于CTX导致的不良反应,具有促进CD8^(+)T细胞增殖以增强机体免疫疗效的保健功能。

奥沙利铂神经毒性机制及防治新进展

奥沙利铂的神经毒性是其常见不良反应之一,具有独特的临床特征,其发生机制至今尚不清楚并且缺乏有效的防治方法。近年来的研究发现,瞬时受体电位通道、间隙连接通道、烟碱型乙酰胆碱受体等在介导奥沙利铂神经毒性中发挥了重要作用,基因多态性也与其显著相关。此外,研究者们利用锰福地吡、单唾液酸神经节苷脂和黄芪根提取物等药物在防治奥沙利铂的神经毒性中进行了探索,并显示出了良好的疗效。该文就近年来奥沙利铂神经毒性的发生机制及防治研究进展做一综述。

替莫唑胺联合放疗治疗肺癌、乳腺癌脑转移临床观察

目的:探讨替莫唑胺联合放疗治疗肺癌、乳腺癌脑转移的临床疗效和安全性。方法:使用替莫唑胺联合放疗治疗肺癌、乳腺癌脑转移患者36例。头部放疗为常规全脑放疗,2Gy/次,5d/周,共4周,总量40 Gy,全脑放疗后,对部分局部病灶三维适形局部加量至50~56Gy。放疗过程中同步化疗,替莫唑胺75mg·m^(-2),Po,放疗当天同时服用。放疗结束后4周开始替莫唑胺治疗,第1周期150mg·m^(-2),po,连续5d,28d一疗程,耐受良好增量至200mg·m^(-2),Po,共化疗6个周期。评价患者疗效与不良反应。结果:36例患者全部完成同步化疗,26例患者完成4个周期化疗,10例患者完成6个周期化疗。放化疗结束后颅內病灶评价:完全缓解11例,部分缓解15例,稳定7例,进展3例,总有效率72.22%(26/36),疾病控制率86.11%(31/36)。主要不良反应为Ⅰ~Ⅱ度的消化道反应,Ⅰ~Ⅱ度骨髓抑制,患者均能耐受。结论:替莫唑胺联合放疗治疗肺癌、乳腺癌脑转移疗效较满意,不良反应可耐受,治疗依从性较好。

新型乳糖苯氮芥衍生物抑制肝癌细胞活性的研究

利用乙酰基保护的乳糖三氯乙酰亚胺酯作为糖基的供体,对硝基苯酚作为糖基的受体,合成了一种新型的乳糖苯氮芥衍生物,采用MTT、流式细胞术分析法探讨了其对肝癌7721细胞的生长抑制及其诱导凋亡的作用机制.结果表明,新合成的乳糖苯氮芥衍生物对正常细胞毒性较小,对7721细胞有明显的细胞毒性,能明显抑制肝癌细胞的生长;同时通过流式细胞术显示,诱导细胞凋亡是其抗肿瘤作用的主要机制之一.

人重组白介素2联合顺铂治疗恶性胸腔积液的临床疗效观察

目的:探讨人重组白介素2联合顺铂治疗恶性胸腔积液的疗效和安全性。方法:60例恶性胸腔积液患者随机分为观察组(30例)和对照组(30例)。观察组排尽胸水后经胸腔内注入白介素2联合顺铂进行治疗;对照组排尽胸水后经胸腔内注入顺铂进行治疗。观察两组疗效与药品不良反应,比较两组患者生活质量和治疗前后免疫功能指标变化。结果:观察组有效率(83.3%)明显高于对照组(56.7%),卡氏评分改善率(86.7%)也明显高于对照组(63.3%),差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组CD4水平及CD4/CD8明显升高(P<0.05),而对照组则明显降低(P<0.05),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:白介素2联合顺铂治疗恶性胸腔积液疗效肯定。

新一代铂类药物奥沙利铂的研究进展

奥沙利铂与其他抗癌药物的联用,可以提高疗效及减少因剂量过大导致的不良反应,分子靶向药物也陆续应用于抗肿瘤治疗,这对于实现肿瘤患者个体化治疗具有重要意义。在此从药动学特点、作用机制、耐药机制、不良反应及临床应用等方面综合论述新一代铂类抗癌药物奥沙利铂的研究进展,为奥沙利铂剂量个体化治疗提供一定的参考;从细胞周期来阐述其耐药机制,总结传统耐药机制的理论。

荧光光谱法研究顺铂与牛血清白蛋白的键合

目的:探讨在人体生理条件下顺铂与牛血清白蛋白(BSA)的结合作用。方法:采用荧光光谱法研究顺铂与BSA的作用机制;考察其结合常数、结合位点数和作用力类型;考察顺铂对BSA构象的影响。结果:顺铂对BSA的猝灭过程是形成基态复合物的静态猝灭,顺铂与BSA结合位点数和结合常数分别为1.36×10~4L·mol^(-1)和0.991,两者以氢键和范德华力为主。同步荧光表明两者结合作用影响色氨酸残基所处的微环境。结论:顺铂能与BSA结合并改变BSA的构象。

N-甲基血卟啉化合物的合成及抗癌性质

合成一种Ｎ－甲基血卟啉，并通过紫外可见光谱、红外光谱和元素分析等手段进行表征．研究它在金属离子存在条件下甲基自由基的性质．经过细胞培养实验证明，该化合物对癌细胞有良好的杀伤作用．对白血病的抑制率可达６３％以上．

异环磷酰胺的合成

3-氨基丙醇与三氯氧磷环合制得2-氯四氢-2H-1,3,2-氧氮磷杂环己烯-2-氧化物,然后与2-氯乙胺盐酸盐进行烷基化反应,继而经氯乙酰氯酰化得3-(2-氯乙酰基)-2-[(2-氯乙基)氨基]四氢-2H-1,3,2-氧氮磷杂环己烯-2-氧化物,最后经硼氢化钠/浓硫酸还原得到抗肿瘤药异环磷酰胺,总收率为30%(以3-氨基丙醇计)。

环磷酰胺在月经周期不同时间用药对卵巢抗苗勒管激素的影响

目的:初步探讨细胞毒性药物环磷酰胺在月经周期不同时间用药对卵巢抗苗勒管激素(AMH)的影响差异。方法:30例使用环磷酰胺治疗肾小球疾病的女性患者[平均年龄为(36±6.39)岁],按月经周期特点将环磷酰胺用药时间分为卵泡期组和分泌期组。卵泡期组:环磷酰胺于月经周期第1~8天内用药;分泌期组:环磷酰胺于月经周期排卵期后用药,约为月经期第14~16天后。每组患者分别于用药前,用药周期1次、3次、6次、10次后测定AMH值。结果:两组患者各周期用药后AMH值差异无统计学意义(P>0.05);与同组用药前相比,卵泡期组和分泌期组患者用药1个月后AMH值显著降低(P<0.05);不同年龄组患者AMH均值差异有统计学意义(P<0.05)。结论:环磷酰胺在月经周期不同时间用药对卵巢的AMH值无显著差异,但患者在使用一次0.8 g小剂量的环磷酰胺后就会出现卵巢功能受损,至少需停药半年以上才能逐步恢复。

奥沙利铂致过敏性休克1例

病例：患者，男，44岁。于2007年1月12日行直肠癌根治术。术后予化疗7个疗程（奥沙利铂＋5—氟尿嘧啶＋亚叶酸钙）。2011年5月17日行第8次化疗，化疗方案：奥沙利铂（江苏奥赛康药业有限公司，

国产阿莫西林/克拉维酸片人体生物等效性研究

目的 :以进口阿莫西林 /克拉维酸片为对照 ,考察国产制剂的人体生物等效性。方法 :10名健康受试者随机交叉单剂量口服 2种制剂 (阿莫西林 2 5 0mg ,克拉维酸钾 12 5mg)后 ,采用微生物法测定血浆中药物浓度。结果 :血药浓度数据经 3P97拟合 ,两者的体内过程皆符合血管外口服给药一室模型 ,采用梯形法计算的阿莫西林AUC0～t分别为 (12 .89± 1.0 3)和 (13.5 4± 0 .5 9) (mg·h) /L ,实测Cmax分别为 (5 .17± 0 .45 )和 (5 .2 5± 0 .46 )mg/L ;Tmax分别为 (1.0 5± 0 .16 )和 (1.0 8± 0 .2 3)h ,t1/ 2 分别为 (1.16± 0 .17)和 (1.37± 0 .2 3)h。克拉维酸钾的AUC0～t分别为 (8.2 5± 0 .92 )和 (8.18± 0 .5 1) (mg·h) /L ,实测Cmax分别为 (3 .94± 0 .5 2 )和 (4 .10± 0 .35 )mg/L ;Tmax分别为(1.10± 0 .2 1)和 (1.0 3± 0 .10 )h ,t1/ 2 分别为 (0 .98± 0 .11)和 (1.0 1± 0 .14)h。阿莫西林的相对生物利用度为 (95 .3±7.3) % ;克拉维酸钾的相对生物利用度为 (10 0 .6± 6 .0 ) %。结论 :经统计学分析 。

蒽环类药物的心脏毒性及其防治进展

蒽环类药物广泛用于治疗各种恶性肿瘤,其疗效显著,但心脏毒性却限制了给药剂量,对长期生存的肿瘤患者心脏功能亦是一个潜在威胁。本文就蒽环类药物心脏毒性的临床表现、发病机制、监测手段及防治措施作一综述。

二甲基亚砜对CAOV3细胞端粒酶活性的可逆性抑制作用

目的探讨卵巢癌细胞CAOV3经二甲基亚砜(Dimethylsulfoxide,DMSO)作用后及停止用药后端粒酶活性变化与细胞周期进展之间的关系。方法台盼蓝拒染法计数活细胞,流式细胞术观察细胞周期分布,端粒重复序列扩增法(TRAP)、聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法检测端粒酶活性。结果生长曲线显示DMSO对CAOV3细胞具有生长抑制作用,且具有浓度和时间依赖性。经1.4%DMSO作用96h后,CAOV3细胞主要受阻于G0/G1期,其端粒酶活性完全被抑制。去除药物后,细胞逐渐由G0/G1期向S期过渡,其端粒酶活性亦逐渐恢复,并于去除药物24h时,S期细胞百分率与端粒酶活性均明显高于用药前水平。结论DMSO对CAOV3细胞具有可逆性阻滞细胞周期进展,并下调其端粒酶活性的作用。CAOV3细胞端粒酶活性表达可能存在细胞周期依赖性调节。

盐酸苯达莫司汀的电喷雾串联质谱分析

目的:应用电喷雾串联质谱(ESI-MSn)技术对盐酸苯达莫司汀进行质谱裂解分析,通过主要特征碎片离子研究其裂解规律。方法:样品溶液进样后,采用ESI-MS1～4碰撞裂解方式,解析盐酸苯达莫司汀的特征碎片离子。结果:盐酸苯达莫司汀在正离子模式下,采用ESI-MS1获得了分子离子峰[M+H]+m/z 358;采用ESI-MS2获得了离子碎片m/z340;采用ESI-MS3获得m/z304、m/z276等离子碎片;采用ESI-MS4得到的主要离子碎片分别为m/z240、m/z268、m/z276等。负离子模式下采用ESI-MS1获得了[M-H]-m/z356,而采用ESI-MS2～4碰撞裂解,基本无响应。结论:盐酸苯达莫司汀在正离子模式下,主要通过脱去羧基中的H2O、CO碎片和5位N上的HCl、CH3Cl以及CH2=CHCl碎片的方式进行裂解。负离子模式下,只有一级电离产生的分子离子峰[M-H]-m/z356有一定响应。说明盐酸苯达莫司汀在负离子模式下比较稳定,而在正离子模式下容易裂解产生一系列碎片。本研究为盐酸苯达莫司汀的结构修饰及其代谢产物结构判断提供参考依据。

ERCC1及其基因多态性与铂类耐药的相关性

铂类化疗药物（顺铂、卡铂、奥沙利铂等）是肿瘤化疗领域的常用药物．其抗癌活性是通过在DNA双链中形成共价交联并与DNA绑定形成铂-DNA加合物．引起一系列细胞内事件的发生导致肿瘤细胞的死亡。核苷酸切除修复（nucleotide excision reDair,NER）与铂类耐药关系密切，其中切除修复交叉互补基因1（excision repair cross completion gene1．ERCC1）是参与该修复过程并导致铂类耐药的重要因子。ERCC1、ERCC1基因多态性与铂类疗效三者之间存在着紧密的联系．研究三者的相关性对指导肿瘤个体化治疗具有重要的意义。

注射用奥沙利铂致过敏性休克1例

注射用奥沙利铂（艾恒）,为新一代铂类化疗药物,用于经氟脲嘧啶治疗失败后的结、直肠癌转移的患者,可单独或联合氟尿嘧啶使用,奥沙利铂的不良反应有胃肠道反应、骨髓抑制,其最主要的aADR 是神经系统毒性,以末梢神经炎为主要表现,有时可有口腔周围、上呼吸道和上消化道的痉挛及感觉障碍.伴或不伴有痛性痉挛,遇冷加重.奥沙利铂可以引起过敏反应,出现皮疹甚至过敏性休克[1].本文报道1例因使用奥沙利铂导致的过敏性休克.

注射用奈达铂致严重过敏性休克1例分析

奈达铂是日本盐野义制药公司开发的新一代铂类抗肿瘤药物，主要用于头颈部肿瘤、非小细胞肺癌以及子宫癌等的化疗。有文献报道：对于晚期或复发的非小细胞肺鳞癌，奈达铂联合用药在总生存和不良反应方面均优于顺铂；并且奈达铂对鳞状细胞肺癌的反应性要比非鳞状细胞肺癌要高。虽然奈达铂在临床上特别是非小细胞肺癌的治疗中已得到广泛应用并取得了良好疗效，但不良反应也常有发生。本文报道1例左肺鳞状细胞癌患者行奈达铂化疗10min后出现的严重过敏性休克。