溴氰菊酯不同暴露时间对小鼠神经行为的毒性作用研究

目的:探究溴氰菊酯(DM)不同暴露时间对小鼠神经行为的毒性作用。方法:将32只成年雄性C57BL/6J小鼠随机分为30 d(对照组、DM组)和90 d(对照组、DM组)4组,每组8只。DM组经口灌胃4.5 mg/kg(1/20 LD_(50))30 d或90 d,对照组给予等容量玉米油。采用Morris水迷宫(MWM)检测小鼠的学习记忆能力;苏木精—伊红(HE)染色及尼氏染色观察小鼠皮层组织病理学变化;检测皮层组织还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)的含量。结果:MWM实验结果,30 d的DM组与对照组相比无显著性差异(P<0.05)。90 d的DM组小鼠在目标象限时间、目标象限路程和穿越平台次数均显著少于对照组(P<0.01)。大脑皮层组织GSH的含量,DM 90 d组低于对照组(P<0.05);SOD活力变化,DM 30 d组低于对照组(P<0.01);CAT活力变化,DM 90 d组低于对照组(P<0.01)。结论:低剂量DM不同暴露时间对成年雄性小鼠的学习记忆能力及抗氧化能力具有不良影响,且这种影响随暴露时间的延长而加剧,应重视DM长期低剂量暴露对神经行为的影响。

重金属肾损伤机制的研究进展(综述)

重金属被广泛应用于农业、工业以及医疗行业,如生产杀虫剂、电池、合金、纺织染料以及药物等。长时间、高强度或过度暴露于重金属会诱发相关的全身性疾病。肾脏具有过滤、重吸收和浓缩功能,是重金属毒性的重要靶器官。肾损伤的程度和表现取决于重金属的种类、剂量以及暴露时间。重金属造成的肾损伤不仅给社会、家庭带来沉重的负担,还常常危及患者的生命健康。因不同重金属肾损伤致病机制不同,所以增加了治疗难度。该文通过对几种常见重金属肾损伤机制的国内外新近研究成果进行论述,以便为临床治疗及研究提供参考。

HMS-01的遗传毒性评价

目的检测HMS-01的遗传毒性,并对其进行临床前安全评价研究,为后续该药物进入临床试验提供支持。方法采用鼠伤寒沙门氏菌进行细菌回复突变试验(Ames试验)评价HMS-01的遗传毒性。结果HMS-01在20.6、61.7、185.2、555.6、1666.7、5000μg/皿的6个剂量下,无论有无代谢活化条件,对鼠伤寒沙门氏菌均无致突变性。结论在本实验剂量范围内,HMS-01未见致突变性。

非商用(Q)SAR软件在药物遗传毒性杂质评估中的应用

目前国内外法规均要求对药物遗传毒性杂质进行控制,当缺乏致突变、致癌性数据时,制药企业大多以商业软件对杂质进行评估,评估费用高昂。FDA推荐了非商用的评估软件,并接受其评估结果,本文对非商用评估软件进行介绍,并以实例对商用与非商用软件预测结果进行对比评价,结果表明所测非商用软件预测结果具有一定参考价值,其参考使用或可节省成本。

百草枯中毒患者外周血对氧磷酯酶1、程序性死亡因子-1、γ干扰素诱导蛋白-10水平检测的意义

目的探讨百草枯中毒患者外周血对氧磷酯酶1(PON1)、程序性死亡因子-1(PD-1)、γ干扰素诱导蛋白-10(IP-10)水平对预后的价值。方法对2017年5月—2023年4月中国人民解放军联勤保障部队第九八〇医院120例百草枯中毒患者进行前瞻性研究,统计百草枯中毒患者30 d内死亡与生存情况,比较不同预后患者临床资料及外周血PON1、PD-1、IP-10水平。采用Pearson相关性分析探讨外周血PON1、PD-1、IP-10水平与中毒剂量、序贯器官衰竭估计(SOFA)评分、急性生理与慢性健康评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线评价外周血PON1、PD-1、IP-10水平预测百草枯中毒患者预后的价值。结果随访期间共35例患者死亡(29.17%)。死亡患者中毒剂量、SOFA评分、APACHEⅡ评分及外周血IP-10、PD-1水平均高于生存患者,外周血PON1水平低于生存患者,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,百草枯中毒患者外周血PON1水平与中毒剂量、APACHEⅡ评分及SOFA评分均呈负相关,PD-1、IP-10水平与中毒剂量、APACHEⅡ评分及SOFA评分均呈正相关(P<0.05);PON1、PD-1、IP-10预测百草枯中毒的曲线下面积(AUC)分别为0.738、0.774、0.770,三者联合预测的AUC为0.922,三者联合预测效能高于各指标单独预测。结论百草枯中毒患者外周血PON1、PD-1、IP-10联合检测对判断患者预后具有较高价值。

Notch1在对乙酰氨基酚诱导的肝损伤中的作用及机制

目的:探讨Notch1信号通过转化生长因子β激活激酶1(transforming growth factor-β-activated kinase 1,TAK1)调控对乙酰氨基酚(acetyl-para-aminophenol,APAP)诱导的肝损伤(APAP induced liver injury,AILI)的作用机制。方法:髓系特异性Notch1敲除(Notch1^(M-KO))和对照floxed Notch1(Notch1^(FL/FL))小鼠通过腹腔注射APAP构建AILI模型。留取小鼠血清标本,用全自动生化分析仪及酶联免疫反应分析法检测肝功能和细胞因子。留取小鼠肝组织标本,HE染色观察肝组织病理损伤情况,使用Suzuki评分评估肝组织损伤程度,免疫印迹法检测TAK1、磷酸化TAK1(p-TAK1)、p65、磷酸化p65(p-p65)、Caspase-8(Casp-8)、受体相互作用蛋白激酶1(receptor-interacting protein kinase 1,RIPK1)、磷酸化混合谱系激酶域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein,p-MLKL)的表达,免疫荧光染色观察CD11b、p-TAK1的表达及活性氧(reactive oxygen species ROS)水平。结果:小鼠腹腔注射APAP后,肝脏病理提示肝细胞体积增大,窦道淤血,出现广泛的坏死。与Notch1^(FL/FL)对照组相比,Notch1^(M-KO)小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)明显升高,血清炎性因子水平上升,HE染色显示肝细胞体积增大更明显,伴大面积坏死及炎性细胞浸润,DCF探针检测显示原代肝细胞内ROS增加。肝组织p-TAK1表达增加,Casp-8的表达减少,RIPK1、p-MLKL表达增加。结论:在AILI中,髓系特异性Notch1敲除可活化TAK1,降低Casp-8水平,激活RIPK1-MLKL坏死性凋亡通路,加重肝损伤的发生。

抗癌药物甲状腺毒性及其非临床评价的研究进展

近年来随着创新药物研发投入的不断增长,抗癌药物的种类愈发多样,其安全性问题也引起了更多的关注。然而,相比于常见的肝肾毒性及免疫原性和免疫毒性等,抗癌药物的甲状腺毒性未获得足够的重视。本文作者通过总结目前美国FDA已批准上市的明确具有甲状腺毒性的代表性抗癌药物及其毒作用机制,包括免疫检查点抑制剂、酪氨酸激酶抑制剂、沙利度胺同系物、贝沙罗汀等,探讨非临床毒理研究对于临床甲状腺相关不良反应的预测价值和不足,为后续抗癌药物甲状腺毒性的评价提供参考。

奥美拉唑杂质毒性预测及细胞毒性研究

目的通过基于定量结构-性质关系(QSPR)模型的毒性预测和细胞毒性试验研究,多方面评价奥美拉唑相关杂质的毒性。方法采用ADMET Predictor软件对奥美拉唑及其16个相关杂质(杂质A~P)进行心脏毒性、大鼠急性毒性、致癌性、肝脏不良反应和致突变性预测,并按打分规则计算出毒性风险系数,以评价各杂质毒性大小,再采用MTT法对奥美拉唑钠及7种杂质(杂质A~E、J、K)进行L-929细胞毒性试验研究。结果4个杂质的毒性风险系数高于奥美拉唑,杂质A有致突变性和肝脏毒性,杂质C有大、小鼠致癌性,杂质F、G有致突变性。杂质B的细胞毒性比奥美拉唑钠大。结论通过软件毒性预测结合细胞毒性试验可多方面快速评价奥美拉唑杂质的安全性。

CL-20的毒性及生物降解研究进展

六硝基六氮杂异伍兹烷(Hexanitrohexaazodoxane,CL-20)是一种新型的高能化合物,因优越的性能被广泛应用于军事和工业中,其在制造、组装以及爆炸后可进入环境,对土壤、沉积物和水造成污染,进而对环境和人类健康产生潜在的影响,因此CL-20带来的健康与环境危害也越来越受关注。该综述将从毒性与生物降解两方面对近年来CL-20的研究资料进行概述,为深入研究CL-20毒性机制奠定基础,促进含能材料的绿色合成与使用。

甲基叔丁基醚无铅汽油肝脏毒性的实验研究

[目的 ]探讨甲基叔丁基醚 (methyltertiarybutylether ,MTBE)无铅汽油对肝脏损伤的敏感指标及损伤机制。[方法 ]昆明种小鼠经呼吸道静式染毒 ,MTBE无铅汽油染毒剂量为 2 2 876.0、114 3 8.0及 2 2 87.6mg/m3 每天一次 ,连续 2h ,共 2 2d。全自动生化仪检测血清中谷丙转氨酶 (ALT)、谷草转氨酶 (AST)、碱性磷酸酶 (AKP)、γ 谷酰基转肽酶 (γ GT)含量 ;肝组织匀浆中丙二醛 (MDA)和超氧化物歧化酶 (SOD)含量分别用荧光法、苯三酚自氧化固定时间法测定 ;电镜观察肝细胞超微结构变化。 [结果 ]雌性小鼠各组酶活性及MDA、SOD含量差异不显著 (P >0 0 5 ) ;雄性小鼠 2 2 876.0mg/m3 染毒组AST、AKP和γ GT的活性高于阴性对照组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。SOD含量随吸入MTBE无铅汽油量的增加而减少 ,各染毒组与对照组及染毒组间差异均有显著性 (P <0 0 5 ) ;电镜观察到 2 2 876.0mg/m3 染毒组雄性小鼠肝细胞滑面内质网增生 ,粗面内质网扩张、囊泡样变性 ,肝细胞核周间隙扩张 ,线粒体及肝窦区无明显改变。 [结论 ]MTBE无铅汽油对小鼠肝脏的损伤可能与脂质过氧化作用有关 ,雄性小鼠可能较雌性小鼠敏感。

镍染毒大鼠睾丸生精细胞凋亡及其对Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨硫酸镍诱导大鼠睾丸生精细胞凋亡的类型及其对生精细胞Bcl-2、Bax蛋白表达和雌二醇水平的影响。方法健康性成熟Wistar雄性大鼠32只,随机分为4组,正常对照组,硫酸镍1.25、2.5、5.0 mg/kg 3个剂量组。腹腔注射染毒,1次/d,连续30 d。采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测睾丸生精细胞凋亡;免疫组化SABC法检测生精细胞Bcl-2和Bax蛋白表达;放射免疫法检测血清雌二醇(E2)水平。结果与对照组比较,各剂量组大鼠睾丸生精细胞凋亡增多(P<0.05),且凋亡细胞主要是生精早期和晚期阶段的精原细胞和精母细胞。各剂量组大鼠生精细胞Bcl-2阳性表达减少而Bax阳性表达增多,且血清E2水平降低(P<0.05)。结论硫酸镍可诱导大鼠睾丸精原细胞和精母细胞凋亡,其机制可能与生精细胞内Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调以及雌二醇水平降低有关。

邻苯二甲酸酯类毒理学效应及其机制研究进展

邻苯二甲酸酯类(PAE)作为塑料增塑剂广泛使用,根据分子量不同分为高分子量和低分子量PAE。由于塑料制品在生产和生活中的广泛应用,人体极可能直接或间接暴露于PAE。人体主要通过注射、经口、经皮及吸入4种方式暴露于PAEs。基于其对人体内分泌系统的影响,PAE被认为是一种环境内分泌干扰物。此外,PAE还具有生殖毒性作用,影响幼年个体生殖系统发育及成年个体生殖细胞发育分化。PAE通过活化过氧化物酶增殖物激活受体PPAR和DNA甲基化促进肝癌。PAE具有免疫毒性,抑制巨噬细胞免疫功能并促进过敏性哮喘。同时,PAE也是一种潜在致癌物质,对乳腺癌、卵巢癌等多种肿瘤的发生和发展具有促进作用。

有机镉染毒对小鼠免疫球蛋白及其亚类水平的影响

为研究有机镉化合物对体液免疫功能的影响。有机镉组采用分离纯化的镉金属硫蛋白 (CdMT)作为受试物给予低、中、高剂量 (Cd2 +0 2、0 5、1 0mg kg) ,无机镉组给予CdCl2 (Cd2 +0 5mg kg) ,BALB c小鼠经灌胃染毒 2周和 4周 ,检测血清中免疫球蛋白 (Ig)及其亚类的水平。结果显示染毒 4周后与对照组和脱金属硫蛋白 (Apo MT)组比较 ,CdCl2 组血清IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgA、IgM和IgLλ各指标均显著性降低 (P <0 0 5 ) ;CdMT组IgG2a和IgG2b明显降低 (P <0 0 5 ) ,但无剂量 反应关系 ,其余指标未见显著性差异 (P >0 0 5 )。结果表明有机镉CdMT可诱导体液免疫功能抑制 ,但明显轻于无机镉作用 。

高效液相色谱法测定多菌灵在油菜籽中的残留量

多菌灵是一种苯并吡唑类优良的广谱、内吸性杀菌剂,可有效防治多种农作物病害,在油菜的栽植过程中常常使用多菌灵控制病害.但它的化学性质稳定,能通过作物叶片和种子渗入植物体内,残效期长,并可通过食管引起中毒[1],因此,多菌灵的残留量分析越来越受到重视.多菌灵的残留分析目前主要有比色法、荧光分析法、薄层扫描法,高效液相色谱法(HPLC)法,气相色谱法(GC),紫外光谱法等.李桂凤等[2]报道了多菌灵在含油量多的花生中残留量的HPLC分析方法,但不适应于油菜籽的分析.本文报道油菜籽中多菌灵残留量的液相色谱分析方法及样品的前处理技术.

氰戊菊酯对细胞色素P450 2B1/2B2的诱导

１５只ＳＤ大鼠随机分为氰戊菊酯（Ｆｅｎ）组（１２０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１×７，ｉｇ），苯巴比妥（ＰＢ）诱导组（８０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１×３，ｉｐ）及溶剂对照组（给予Ｆｅｎ组等体积的二甲亚砜，处理同Ｆｅｎ组）．应用不连续ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳分离细胞色素Ｐ４５０，用ＣＯ差示光谱法和细胞色素Ｃ还原法测定Ｐ４５０含量及ＮＡＤＰＨ－细胞色素Ｐ４５０还原酶活性，用ＣＹＰ２Ｂ１／２Ｂ２抗体及ＣＹＰ３Ａ１／３Ａ２抗体进行Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法分析，用免疫组化和半定量ＲＴ－ＰＣＲ等技术观察Ｆｅｎ影响大鼠脑，肝组织细胞色素Ｐ４５０亚型的特异性．结果显示，与溶剂对照组相比Ｆｅｎ可使脑和肝中Ｐ４５０含量及ＮＡＤＰＨ－Ｐ４５０还原酶活性增高；Ｐ４５０２Ｂ１／２Ｂ２增加，Ｐ４５０３Ａ１／３Ａ２未见改变；Ｐ４５０２Ｂ１／２Ｂ２ｍＲＮＡ含量相应增加．由于正常大鼠脑，肝组织中Ｐ４５０２Ｂ１／２Ｂ２表达很低，Ｆｅｎ对该亚型Ｐ４５０的诱导可能会干扰机体对内，外源化合物的正常代谢，从而产生毒作用．

溴氰菊酯对大鼠神经细胞内游离钙的影响

目的 研究溴氰菊酯对大鼠神经细胞内游离钙 ([Ca2 +]i)的影响 ,并探讨其可能机制。方法 用溴氰菊酯处理分离的大鼠脑细胞 ,用Fura 2 AM为细胞内钙离子荧光指示剂 ,测定神经细胞内游离钙浓度 ;并利用NMDA受体竞争性拮抗剂AP5、非竞争性拮抗剂MK 80 1、Na+离子通道阻断剂TTX、电压依赖性钙通道阻断剂尼莫地平 ,探讨了溴氰菊酯影响胞内钙的可能机制 ;另外还观察了去除胞外钙时溴氰菊酯对胞内钙的影响情况。结果 溴氰菊酯浓度在 0～ 2 0 0nmol L范围内 ,可以显著提高大鼠皮层和海马细胞内游离钙的浓度 (P <0 0 1) ,并有良好的剂量 反应关系 (相关系数分别为r =0 96 4,r =0 981) ;AP5、MK 80 1和TTX可以有效阻断溴氰菊酯的升钙作用 ;而尼莫地平则无影响 ;去除胞外钙时 ,溴氰菊酯的升钙作用也消失。结论 溴氰菊酯导致的胞内钙升高 ,主要是由谷氨酸激活NMDA受体门控钙通道引起的胞外钙内流 ,和电压依赖性钙通道及胞内钙库释放无关。

甲醛对雌性大鼠卵巢储备功能的影响

目的:在亚慢性染毒的条件下,研究甲醛对SD雌性大鼠卵巢储备功能的影响。方法:将40只SD雌性大鼠随机分为正常对照组和3个不同浓度(0.2、2.0、20.0mg/kg)的甲醛染毒组。腹腔注射甲醛染毒,每天1次,连续染毒14d,14d后称体质量,并采用股动脉放血处死受试动物,取血清,用化学发光法测定血清雌二醇(E2)浓度;用酶联免疫方法测定抑制素B(inhibinB)浓度;用放射免疫方法测定卵泡刺激素(FSH)和黄体生成激素(LH)的浓度。并解剖摘取卵巢称重,计算脏器系数。结果:甲醛染毒组与对照组比较,各染毒剂量组大鼠血清E2、InhibinB水平明显降低(P<0.05),FSH水平显著升高(P<0.05);高、中剂量组大鼠血清LH水平均有所升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。各染毒剂量组卵巢脏器系数显著降低(P<0.05)。结论:在亚慢性染毒条件下,甲醛对SD雌性大鼠卵巢储备功能有一定损害作用。

黄芪拮抗镉诱导的大鼠脂质过氧化作用

目的 研究黄芪注射液拮抗氯化镉诱导的大鼠精子运动毒性及对脂质过氧化作用的影响。方法 将 4 8只SpragueDawley雄性大鼠随机分成低浓度黄芪组 (A1)、高浓度黄芪组 (A2 )、氯化镉组 (Cd)和对照组 (C)。连续 7d分别给A1组和A2 组大鼠腹腔注射黄芪注射液 5和 10g/(kg·d) ,Cd组大鼠腹腔注射等量蒸馏水作对照 ,然后再连续 7d给A1组、A2 组和Cd组大鼠分别同时腹腔注射氯化镉溶液 0 4mg/(kg d)。染镉后第 8d处死大鼠 ,用计算机辅助精子分析系统 (CASA)分析附睾精子运动参数 ,检测血清和睾丸组织总超氧化物歧化酶 (T -SOD)活力和丙二醛 (MDA)含量。结果 A2 组精子活率 (Mot)、前向运动精子百分率、曲线速度 (VCL)、平均路径速度 (VAP)和精子头摆幅度 (ALH)等参数明显高于Cd组 (P <0 0 5或P <0 0 1)。A2 组血清及睾丸组织MDA含量和T -SOD活力与Cd组比较均有显著性差异 (P <0 0 1)。结论 黄芪注射液对镉诱导的大鼠精子运动毒性有明显的拮抗作用 ,其机制可能与黄芪清除自由基作用有关。

环磷酰胺染毒小鼠精子形态及精细胞微核变化

目的探讨环磷酰胺对小鼠生殖毒性的影响。方法小鼠腹腔注射环磷酰胺溶液,连续5d染毒,染毒后28d取双侧睾丸和附睾,计数小鼠精子畸形率和生殖细胞微核发生情况,评价环磷酰胺对小鼠的生殖毒性作用。结果腹腔注射环磷酰胺实验组精子畸形率与对照组相比差异有显著性(P<0.01);实验组生殖细胞微核率与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。结论小鼠腹腔注射环磷酰胺对雄性小鼠生殖细胞和精子有损害作用。

二氯五氟丙烷的28天吸入毒性试验观察

[目的 ]研究二氯五氟丙烷 (HCFC 2 2 5 )的毒性及安全性。 [方法 ]通过实验动物急性毒性试验来确定该物质的急性毒性等级 ,通过大鼠 2 8天吸入毒性试验找出亚急性毒作用浓度阈值及靶器官。急性毒性用霍恩氏法计算 ;亚急性毒性用不同剂量的该物质对动物染毒 ,分别对各剂量组的动物进行血液生化测定 ,称量动物体重、脏器重量并进行组织病理学检查 (肺、肝、肾、心 )。 [结果 ]小鼠急性LD50 雌性为 2 0g/kg ,雄性为 14 7g/kg ;小鼠急性LC50 为 5 2 6670mg/m3 ;大鼠急性LD50 大于 2 1 5g/kg ;大鼠 2 8d吸入毒性试验结果提示 ,AK 2 2 5吸入毒作用的主要靶器官为动物的肺脏和肝脏 ,其次是肾脏。主要的毒性表现有血清中ALT、AST、CR、BUN含量升高 ;肺组织淤血、出血及炎症细胞浸润 ;肝组织轻度及水样变病理改变等。最小毒作用浓度 (LOEC)为 3 73 5 0mg/m3 ,未观察到毒作用浓度 (NOEC)为 12 45 0mg/m3 。 [结论 ]二氯五氟丙烷 (HCFC 2 2 5 )的急性毒性属于微毒 ;本次大鼠 2 8d吸入毒性试验结果提示 ,HCFC 2 2 5吸入毒作用的主要靶器官为动物的肺脏和肝脏 ,其次是肾脏。最小毒作用浓度 (LOEC)为 3 73 5 0mg/m3 ,未观察到毒作用浓度 (NOEC)为 12 45 0mg/m3 。