丛枝菌根真菌联合拮抗菌对花椒根腐病的防治作用

【目的】探究丛枝菌根真菌联合2种拮抗菌对花椒根腐病的生物防治效果,为解决花椒根腐病提供理论依据。【方法】将丛枝菌根(Arbuscular mycorrhiza,AM)真菌异形根孢囊霉(Rhizophagus irregularis)、草酸青霉HB21⁃1(Penicilium oxalicum)、枯草芽孢杆菌HX11(Bacillus subtilis)以单独或联合接种的方式,开展花椒根腐病的盆栽防效试验,以评价不同组合处理下的防治效果,并以染色镜检法测定AM真菌侵染率,再分别测定花椒根部防御酶活性、土壤酶活性初步探究生防机制。【结果】病原菌单独处理下的花椒根腐病发病率为86.67%,AM真菌+HB21⁃1+HX11联合处理下的花椒根腐病发病率最低,为13.33%,防治效果达78.89%,其次为HB21⁃1+HX11、AM真菌+HB21⁃1处理,防治效果分别为62.78%和57.12%。AM真菌+HB21⁃1+HX11处理下的AM真菌侵染率最高,为52.22%,而AM真菌单独处理下的侵染率最低,为24.89%。60 d时AM真菌+HX11处理下的花椒根部SOD、PAL酶活性最高,AM真菌+HB21⁃1处理下的花椒根部POD酶活性最高,且植株防御酶活性随时间均呈上升趋势。AM真菌、枯草芽孢杆菌HX11能促进土壤酸性磷酸酶、脲酶活性随时间显著升高,草酸青霉HB21⁃1能促进土壤蔗糖酶活性显著升高。【结论】AM真菌+草酸青霉HB21⁃1+枯草芽孢杆菌HX113种生防菌联合处理对花椒根腐病的防治效果最好,且该菌株组合处理下的AM真菌侵染率最高。随时间推移,AM真菌和拮抗菌处理下的花椒根部POD、SOD和PAL酶活性均呈上升趋势,且土壤酸性磷酸酶、脲酶活性也呈上升趋势,土壤蔗糖酶活性稍有下降,但均高于病原菌处理组,表明AM真菌、HB21⁃1和HX11能不同程度地诱导花椒植株防御酶活性、土壤酶活性的升高,具备一定的生防应用潜力。

木醋液对小麦根腐病致病菌及小麦发芽的影响

本研究采用菌丝生长速率法测定不同浓度木醋液对小麦根腐病菌的抑菌活性,并采用不同浓度的木醋液培养小麦,测定小麦发芽势、发芽率及生长情况,旨在明确不同浓度木醋液对小麦根腐病3种致病菌(腐霉菌、平脐蠕孢菌和禾谷镰刀菌)的抑菌作用,以及对小麦发芽和生长情况的影响,最终筛选出防治小麦根腐病的最佳木醋液使用浓度。结果发现,0.80%以上浓度的木醋液能够完全抑制3种致病菌的菌丝生长。其中木醋液浓度为0.10%时对腐霉菌菌丝生长的抑制率达到84.28%;木醋液浓度为0.40%时,对平脐蠕孢菌菌丝生长的抑制率达到81.56%;木醋液浓度为0.60%时对禾谷镰刀菌菌丝生长的抑制率达到83.78%。不同浓度的木醋液对小麦发芽及生长也有影响,浓度大于0.50%时,小麦发芽势和发芽率均呈下降趋势,浓度大于1.00%时,小麦的根长和地上部分长度都显著减小。因此,采用木醋液防治小麦根腐病的最适浓度为0.60%。

成都平原豇豆根腐病菌的分离与鉴定

为明确四川成都平原豇豆根腐病的病原菌种群及其致病性,本研究采集6个不同县(市)豇豆苗期和成株期的根部病样,通过组织分离与单孢纯化,基于形态特征和分子鉴定,并采用柯赫氏法则测定其致病性.结果表明:从病组织共分离获得122株真菌单孢分离物,苗期105株,成株期17株;经病菌形态特征及基于rDNA ITS序列分析,将这些菌株鉴定为茄腐镰孢菌(Fusarium solani)、尖镰孢菌(Fusarium oxysporum)、轮枝镰孢菌(Fusarium verticillioides)、层生镰孢菌(Fusarium proliferatum)和木贼镰孢菌(Fusarium equiseti),其中尖镰孢菌(F.oxysporum)为优势菌种,分离频率为81.1%,但成株期病菌均为尖镰孢菌.采用孢子悬浮液浸根接种结果显示,各菌种代表菌株均可引起豇豆发病,表现为植株萎蔫、落叶、倒伏,根部开始出现褐色病变,根系坏死腐烂,且维管束呈红褐色.

秸秆还田与免耕对小麦根际线虫数量和根病的影响

2004年7月,从张掖地区秸秆覆盖和免耕的节水灌溉试验小区小麦田块采集土样进行根际土壤线虫的调查。对不同处理的线虫总数进行统计和比较,并进行差异显著性分析。结果表明,留茬高度和覆盖方式下的各处理间线虫数量差异不明显,但不同种植方式与灌水量搭配的处理间存在显著差异。表明不同的处理方法对土壤线虫数量存在一定的影响。同时,对不同留茬高度与覆盖方式下小麦根病的发生进行了调查,发现线虫数量与根病发病率之间呈正相关。

棘孢木霉JM-1菌株对麦根腐离蠕孢的拮抗机制

为了研究木霉菌JM-1菌株对麦根腐离蠕孢CY6菌株的拮抗机制,本研究结合形态学和分子生物学鉴定方法,明确JM-1菌株的分类地位,并采用平板对峙培养法和显微观察,分析JM-1菌株对CY6菌株的拮抗作用。结果表明,木霉菌JM-1菌株为棘孢木霉(Trichoderma asperellum),可通过空间和营养竞争抑制CY6菌株的生长,抑菌率为77.22%;显微观察发现,棘孢木霉JM-1对CY6菌株有明显的重寄生作用,同时,JM-1菌株可产生某些抗生物质,使CY6菌株的菌丝、分生孢子发生变形和消解。因此,棘孢木霉JM-1菌株可通过竞争作用、重寄生作用和抗生作用等多重生防机制抑制麦根腐离蠕孢的生长。

小麦腐霉根腐病原鉴定Ⅰ

2015年冬小麦返青期,山东省青岛市、临沂市的冬小麦出现缺苗断垄现象,叶片出现萎蔫症状,植株矮小,生长不良,毛细根上出现似开水烫过样水渍状病斑,重者小麦根系及茎基部变褐。本研究对其病原菌进行分离培养、致病性测定、形态学观察及分子生物学鉴定。结果表明,引起两地冬小麦根腐病(称为腐霉根腐病)的病原菌为刺腐霉(Pythium spinosum),该病原菌菌落白色,菌丝发达,分枝繁茂。该研究结果可为冬小麦腐霉根腐病防治提供科学依据。

定西地区小麦根部镰刀菌及其致病性研究

在甘肃定西李家堡乡,采集200株具有根腐症状的的小麦植株,经分离得到镰刀菌42株.根据Booth C.系统鉴定,确定它们分别属于镰刀菌的6个种,以春小麦品种定西35号为材料对其致病性进行了测定,结果发现尖孢镰刀菌(F.oxysporium)和茄病镰刀菌(F.solani)对小麦幼苗有强致病作用,它们的分离频率分别为31.00%和21.43%;黄色镰刀菌(F.culmorum)、串珠镰刀菌(F.moniliforme)和木贼镰刀菌(F.equiseti)的致病性属于中等强度,分离频率分别为9.52%1、4.29%和16.67%;禾谷镰刀菌(F.graminearum)致病性弱,其分离频率约为7.14%.

玛咖根腐病病原菌的形态和分子鉴定

玛咖是一种药食两用的十字花科草本植物,为明确玛咖根腐病的病原物,为病害的发生规律及防治奠定基础,调查云南省丽江市玛咖种植基地玛咖根腐病的发生情况,用组织分离法对病原物进行分离和纯化,并完成柯赫氏法则验证。结果表明,依据形态特征、脂肪酸组成分析以及r DNA内转录间隔区(r DNA-ITS)、翻译延伸因子(TEF)、RNA聚合酶Ⅱ第二大亚基(RPB2)序列分析,将其鉴定为燕麦镰刀菌,并命名为Fusarium avenaceum ROT-2。

含木醋液水溶肥对小麦根腐病的防治效果研究

本试验采用盆栽接菌法研究自制含木醋液水溶肥的小麦根腐病防效及对土壤酶活性、土壤速效养分含量、小麦生长和产量等的影响,并与具有抗病功能的两种市售水溶肥产品以及纯木醋液进行比较,以期为其田间应用提供理论依据。结果表明,自制含木醋液水溶肥对病原菌的抑制效果最好,对小麦根腐病的防效为51.62%,显著提高小麦根部土壤酶活性和速效养分含量,促进小麦生长,与对照相比,脲酶、中性磷酸酶、蔗糖酶活性分别提高9.24%、51.03%、5.44%,中性磷酸酶活性显著高于含腐植酸水溶肥和小麦专用水溶肥处理;碱解氮、有效磷和有效钾含量分别比对照增加20.95%、55.72%、29.69%,有效磷和有效钾的含量均显著高于小麦专用水溶肥处理。自制含木醋液水溶肥处理比含腐植酸水溶肥增产7.71%,比小麦专用水溶肥增产16.06%。综合来看,自制含木醋液水溶肥的小麦根腐病防效、改良土壤和增产作用最为明显。

小麦腐霉根腐病原鉴定Ⅱ

2015年冬小麦返青期,山东单县冬小麦出现叶片变黄、植株矮小,毛细根上出现开水烫过的水渍状,造成了部分死苗现象,点片发生。为明确病原和有效防治该病害,本研究对病原菌进行分离培养、致病性测定、形态学观察及分子生物学鉴定。结果表明,山东单县冬小麦根腐病(称为腐霉根腐病)由瓜果腐霉Pythium aphanidermatum引起。

山东小麦蠕孢根腐病病原鉴定及致病力分析

本研究首先利用形态学和分子生物学方法,对25株在山东采集分离的小麦根腐病菌进行了鉴定,后采用刺伤接种法对菌株的致病性进行了测定。鉴定结果表明,25个菌株均为麦根腐离蠕孢[Bipolaris sorokiniana(Sacc.)Shoemaker],属半知菌亚门离蠕孢属真菌。接种试验表明,25个麦根腐离蠕孢菌株均具有致病性,但从系统聚类图可以看出,不同菌株间存在致病力分化,可分为强、中、弱3种致病力类型,其中,中等致病力菌株为优势菌株。同时,菌株的致病力强弱与其地理来源没有相关性。

HSW-毒素诱发和筛选小麦抗根腐病变体的研究

以小麦根腐病菌００２号菌株产生的致病毒素（ＨＳＷ－毒素）为选择剂，选用春、冬小麦品种、品系以及杂种的花药和幼穗进行离体培养，并结合物理诱变技术，已获得抗根腐病的植株，用根腐病菌分生孢子接种鉴定。

小麦根腐病防治研究进展

近年来小麦根腐病越来越受到各方研究人员的重视,大量研究机构从不同角度着手研究对其防治的新方法。陈祥等人选取多种化学药剂对比试验,发现全消药肥防效最好;朱统泉等人化药对比研究表明,应用适量立克秀或禾果利,增产效果最明显;李会玲等人研究发现冬青卫矛内生真菌2QR1菌株代谢产物可抑制多种作物病原菌生长;郭荣君等人提出应用芽孢杆菌JPC-2与病原菌营养竞争拮抗;田雪亮等人提出可使用串珠镰刀菌毒素筛选小麦抗根腐病品种。

小麦β-1,3-葡聚糖酶性质及其对小麦根腐离蠕孢菌的抑菌作用

为了明确小麦根腐离蠕孢菌(Bipolaris sorokinianum)侵染小麦后被诱导表达的β-1,3-葡聚糖酶基因所编码的β-1,3-葡聚糖酶的性质及其与抗病性的关系,采用生物信息学的方法对β-1,3-葡聚糖酶的一级结构、信号肽和跨膜结构进行了预测分析。结果表明β-1,3-葡聚糖酶是一种分泌型碱性蛋白酶,主要存在于胞外。将克隆到的β-1,3-葡聚糖酶基因构建成重组质粒并转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导后,分离纯化得到了原核表达的β-1,3-葡聚糖酶,对其在体外对小麦根腐离蠕孢菌生长的抑制作用的研究发现,β-1,3-葡聚糖酶对小麦根腐离蠕孢具较强抑菌活性。

抗根腐病的TaMYB86过表达转基因小麦的创制与分子功能鉴定

小麦根腐病是一种难以防治的小麦土传病害。Ta MYB86是一个小麦中受根腐病菌诱导表达的MYB编码基因。本文构建了Ta MYB86的过表达转基因载体p Ubi:MYC-Ta MYB86,利用基因枪介导法将其转入推广小麦品种扬麦16。对转Ta MYB86基因小麦T0-T3代植株进行分子特征分析和抗病鉴定。PCR检测结果表明,外源Ta MYB86已转入3个转基因小麦株系中;q RT-PCR结果显示,Ta MYB86在3个转基因小麦株系中的表达量显著高于在未转基因扬麦16中的表达量,约为未转基因扬麦16中的5~6倍,表明Ta MYB86可在转基因小麦中过量转录;Western杂交结果表明,引入的Ta MYB86可在上述3个转基因小麦株系中翻译表达。对转Ta MYB86基因小麦与未转基因扬麦16进行根腐病菌接种与抗病鉴定表明,3个转Ta MYB86基因小麦株系在T1~T3代的根腐病病情指数分别为31.75、50.00、45.00;37.75、37.50、38.50;41.75、31.25、37.50;在3次鉴定中未转基因扬麦16的根腐病病情指数分别为75.04、54.17、65.38,转Ta MYB86基因小麦T1~T3代的根腐病抗性均显著高于未转基因扬麦16(P<0.01)。与未转基因扬麦16相比,转Ta MYB86基因小麦中3个下游防卫基因(PR10、PR17c和Chit1)的转录水平也显著上调。以上结果说明,Ta MYB86过表达可显著增强转基因小麦的根腐病抗性,在小麦防御根腐病过程中起正向调控作用。

小麦根腐线虫发生规律及其对小麦产量的影响

2008年10月至2009年6月,系统调查了田间小麦根组织和根围土壤中小麦根腐线虫群体密度随季节的变化规律,并研究其发生对小麦产量的影响。调查发现,小麦根腐线虫群体数量在郑麦004和豫麦70号的根组织中都出现了2个高峰期,分别是2008年12月1日(每克根组织中1 535条、290条)和2009年5月1日(每克根组织中2 180条、270条)。郑麦004根围土壤中的小麦根腐线虫数量在2008年12月1日和2009年6月1日出现2个高峰期,分别为每100 g土15.8条、18.9条;而豫麦70号根围土壤中的小麦根腐线虫数量在2008年11月15日和2009年6月1日出现2个高峰期,分别达到每100 g土11.2条、23.6条。铁灭克处理土壤能够显著减少侵入小麦根组织内根腐线虫的数量,增加小麦的穗粒数和千粒重,从而提高小麦的产量(增产13.6%)。其中,乳熟期的小麦线虫发生量与小麦产量之间的相关性最强,相关系数为-0.902。

利用外源基因抗小麦根腐病的研究进展

小麦根腐病是严重为害小麦产量的世界性病害之一,在我国东北、西北和华北等麦区广泛分布。小麦根腐菌是多种病原菌复合侵染导致的病害,病菌可寄生也可腐生,适应能力极强。将外源抗病基因转入小麦品种,提高小麦抗性成为提高小麦抗病性的1个重要研究方向。主要从β-1,3-葡聚糖酶基因和PGIP这2个方面,介绍了抗小麦根腐病的研究进展。

蜡样芽孢杆菌0-9对小麦根腐病菌的抑菌作用研究

采用平板对峙法,研究0-9菌株对引起小麦根腐病的致病菌尖孢镰刀菌的抑菌作用,抑菌率为50%,该菌株发酵代谢产物对小麦根腐病菌的抑菌作用达83%;0-9菌株代谢产物处理尖孢镰刀菌的分生孢子后,其萌发率降低61.2%;发酵代谢物质在高温和长时间紫外线照射下仍具有约80%的抑菌活性,且代谢产物的有效抑菌活性可以长达14 d。同时采用平板对峙法研究0-9菌株对5株植物病原真菌的抑菌作用,结果表明0-9菌株也具有广泛的抑菌效果。

阿克苏地区小麦根腐病发生规律及防控技术

近年来,随着小麦新品种的引进和果麦间套作面积的增加,小麦根腐病在阿克苏地区发生程度呈加重趋势。为进一步明确该病在阿克苏地区的发生侵染规律,探索病害防治的关键点,阿克苏地区农业技术推广中心自2013年开始,连续2年开展病害发生规律动态监测,对致病病原、发病因素进行准确鉴定和分析,并开展了相应的病害防控技术,为进一步制定小麦根腐病防控技术体系奠定了基础。

麦冬根部一种真菌性病原鉴定及其生物学特性研究

为麦冬病害防治和规模化种植提供理论基础,对绵阳麦冬根部病害进行分离、鉴定,研究其生物学特性。结果表明:分离的真菌性病原鉴定为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum),最佳生长温度为25~30℃,低温下不生长,高温下生长缓慢;在不同光照条件下生长趋势差异不大;在pH为4~12均能生长,pH为10时生长最好,适于偏碱性环境;在碳源为木糖、葡萄糖、果糖、甘露醇、淀粉、蔗糖中生长速率差异不大,蔗糖生长速率稍高,葡萄糖稍差;菌株在供试5种氮源硝酸钠、甘氨酸、L-胱氨酸、氯化铵、磷酸二氢铵中均能生长,在硝酸钠、甘氨酸、L-胱氨酸中生长速率较快,且差异不明显,在氯化铵、磷酸二氢铵中生长较为缓慢,差异不明显。