生物有机肥与茎部注射有益菌联合高效防控番茄土传青枯病

将有益菌引入土壤或植物可在一定程度上减少土传病害的发生,但防控效果常不稳定。为了提升有益菌防控土传病害的稳定性,本研究以有益解淀粉芽孢杆菌QL-18和皮氏罗尔斯顿菌QL-A6为研究对象,将含有菌株QL-18的生物有机肥与茎部注射菌株QL-A6两种防控方式相结合,通过温室盆栽试验与春季和秋季田间试验,探究了二者联合防控番茄土传青枯病的效果,并通过比较根际与茎部样品中有益菌芽孢杆菌和皮氏罗尔斯顿菌与病原青枯菌的数量比揭示潜在机制。结果表明:温室试验中联合防控处理的生防率为80.79%,春季田间试验中为71.88%,秋季田间试验中为81.47%,均显著高于单一防控处理。单独使用茎部防控和根际防控分别在春季和秋季的田间试验中防效下降。并且联合防控处理的番茄根际中芽孢杆菌与青枯菌和番茄茎部皮氏罗尔斯顿菌与青枯菌的数量比均高于单一防控处理。因此,生物有机肥与茎部注射联用可作为提高土传青枯病生物防治效果的有效途径。

不同土壤消毒剂和嫁接对设施番茄青枯病防治效果和土壤酶活性影响探究

为解决设施番茄连作障碍问题,以番茄“宝石捷—913”为材料,研究不同土壤消毒剂和嫁接9种处理方式对设施番茄青枯病发生和土壤酶活性的影响。结果表明,消毒剂中威百亩处理和棉隆处理对番茄青枯病防治效果优于其余消毒剂处理,防效分别达到52.73%和50.93%。嫁接苗处理番茄青枯病发病率最低,病程发病较慢,防治效果达到99.07%;与对照相比,不同土壤消毒剂会影响土壤酶活性,但是嫁接处理对土壤酶活性影响不大。由此可见,相比土壤消毒剂,以砧木嫁接番茄的方式防治青枯病效果好,对土壤酶活性无较大影响,是有效的防治设施番茄青枯病的方法。

番茄青枯病拮抗菌株B-6的诱变选育

青枯病是由青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)侵染引起,是设施番茄生产上一类重要的土传性病害,给种植户造成巨大的经济损失。筛选高效突变生防菌株成为目前青枯病防控的重要手段之一。为了给生防菌剂的进一步开发应用提供依据,研究以筛选出具有抑菌活性的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)B-6为出发菌株,采用紫外线和亚硝酸钠复合诱变处理,计算致死率和正突变率确定最佳诱变条件,利用平板初筛和摇瓶发酵复筛获得高效突变菌株,测定高效突变菌株抑菌活性的遗传稳定性,并与出发菌株进行生长曲线的对比。结果表明,在紫外照射时长为3 min和亚硝酸钠浓度为0.045 mol/L复合诱变条件下,获得1株抑菌活性最强的高效突变菌株UH-9;该菌株对番茄青枯病菌抑菌圈平均直径达到28.6 mm,抑菌活性与出发菌株相比提高了86.5%,菌株在传代培养7次后抑菌活性无显著变化,具有良好的遗传稳定性。复合诱变处理比单一紫外诱变处理及亚硝酸钠诱变处理抑菌活性分别提高39.1%和25.4%,复合诱变比单一诱变抑菌活性更好。通过对比菌株UH-9和B-6的生长曲线可知,生长时期相同,且13 h后UH-9的OD600高于B-6。

番茄青枯病的发生及防治

青枯病是危害茄科作物生产的毁灭性病害之一,在番茄上发病尤为流行。本文从病原、发生规律和发病症状等方面总结了番茄青枯病的发病特征,分析了番茄青枯病的发生原因、分子抗性机制等,并提出了综合防治措施,包括农业防治(选用抗逆品种、轮作嫁接、加强田间管理)、化学防治和生物防治等方面内容,以期为番茄青枯病防治提供一定的参考。

丛枝菌根真菌提高感染青枯菌番茄根际土壤细菌群落多样性和稳定性及有益菌属相对丰度

【目的】青枯病是由茄科雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum,亦称青枯菌)诱导产生的一种高温高湿型土传病害,土壤温度高、湿度大时易于青枯菌的繁殖进而引发青枯病。丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhiza,AM)可能通过调控根际微生物区系对病原体产生影响,我们研究了AM真菌对青枯菌入侵条件下土壤细菌群落的影响。【方法】以番茄(Solanum lycopersicum)为试材进行盆栽试验,供试AM真菌为摩西管柄囊霉(Funneliformis mosseae)M47V,供试病原菌为茄科雷尔氏菌QL-RS 1115(GenBank:GU390462)。催芽5日的番茄种子,接种AM菌剂的为菌根苗,未接种AM真菌的为非菌根苗。在番茄幼苗生长30天时,一半菌根苗和非菌根苗接种青枯菌,另一半不接种青枯菌,共4个处理。在接种青枯菌后1天和14天,采集番茄样品,采用抖土方法采集根际土壤,利用实时荧光PCR分析番茄根际青枯菌数量,采用16S rRNA高通量测序探究土壤细菌群落多样性和结构稳定性。【结果】在接种青枯菌初期(1天),非菌根苗接种青枯菌(TR–AMF)和菌根苗接种青枯菌(TR+AMF)两组处理的根际土壤细菌群落结构发生明显改变,Chao1指数、Shannon指数和Simpson指数显著降低(P<0.05),共现网络的节点数和连接数明显减少,模块化程度降低,共现网络简化表明细菌群落结构的稳定性降低。接种青枯菌14天后,不动杆菌属(Acinetobacter)、鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)、溶杆菌属(Lysobacter)、假单胞菌属(Pseudomonas)等有益细菌属在感染青枯菌的番茄根际富集,细菌共现网络的节点数和连接数增加,模块化程度提高,表明细菌群落稳定性得到恢复。与非菌根苗相比,菌根苗接种青枯菌(TR+AMF)和菌根苗未接种青枯菌(TN+AMF)两个处理番茄根际土壤中青枯菌丰度显著降低(P<0.05)。AM真菌显著提高Chao1指数和Shannon指数(P<0.05),提高了感染青枯菌番茄根际土壤中黄杆菌属(Flavobacterium)、黄色土源菌属(Flavisolibacter)、噬胞菌属(Cytophaga)和苔藓杆菌属(Bryobacter)的相对丰度,同时增加了共现网络的节点数和连接数,并促进番茄根际细菌物种之间的良性互作,提高细菌网络的复杂程度。【结论】感染青枯菌的番茄根际会富集不动杆菌属(Acinetobacter)、鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)、溶杆菌属(Lysobacter)、假单胞菌属(Pseudomonas)等有益菌属以提高其抗病性,恢复细菌多样性和群落稳定性。接种AM真菌可显著降低番茄根际土壤中青枯菌的丰度,特别是侵染青枯菌后提高番茄根际的黄杆菌属(Flavobacterium)、黄色土源菌属(Flavisolibacter)、噬胞菌属(Cytophaga)和苔藓杆菌属(Bryobacter)的相对丰度,进而抑制土壤中青枯菌的生长,并通过提高细菌的多样性和丰富度,促进番茄根际细菌物种之间的稳定共生和良性互作,从而提高细菌群落对青枯菌的抵抗能力。

番茄青枯病内生拮抗细菌的筛选

从广西一些市县采集番茄茎标本分离得到 5 5个细菌菌株 ,分属为芽孢杆菌 (Bacillusspp .)、黄单胞菌 (Xanthomonasspp .)、假单胞菌 (Pseudomonasspp .)和欧文氏菌 (Erwiniaspp.) ,其中芽孢杆菌为优势种群。经回接测试 ,有 36个菌株为番茄植株内生菌。这些内生菌只有 7个菌株对番茄青枯病菌有拮抗作用 ,芽孢杆菌B47菌株对番茄青枯病菌拮抗作用较强 ,经室内和田间初步防治测定 ,它对番茄青枯病有较好的防治效果。

番茄枯萎病和青枯病拮抗细菌的筛选、评价与鉴定

从宁夏银川、江苏沭阳和福建厦门的番茄、辣椒、西瓜等作物根际土壤中,分离纯化获得367株细菌菌株。以番茄枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.lycopersici和番茄青枯病菌Ralstonia solanacearum为靶标菌,从367株菌株中筛选出对两种病菌皆具有很强拮抗作用的菌株22株。拮抗细菌抑菌物质的研究结果表明:22株拮抗细菌均能分泌蛋白酶;不能分泌几丁质酶;3株细菌能分泌纤维素酶;3株细菌能分泌嗜铁素。盆栽试验结果表明:拮抗细菌PTS-394对番茄枯萎病和青枯病的防效最高,分别为77.4%和80%;菌株H-70、L-1和SJ-280对番茄枯萎病和青枯病的防效均大于60%。对上述4株拮抗细菌进行16S rRNA种属鉴定,均为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。

多粘类芽孢杆菌HY96-2对番茄青枯病的防治作用

室内测定了拮抗菌株HY96-2对番茄青枯病病原菌Nb-1的毒力。平板培养法和双层培养基法结果表明,HY96-2对Nb-1具有较好的拮抗作用,其抑制率分别为20.1%和24.7%。通过温室盆栽,确定了HY96-2发酵液及其制成的生防制剂KDLD对番茄青枯病的最佳防治方法为浸根法。番茄苗浸1×105cfu/ml的HY96-2发酵液0.5h,栽入灭菌土后浇入该HY96-2发酵液100ml,处理后30d防效仍高达69.7%。温室防治试验结果表明,采用浸根法HY96-2发酵液施用后21d对番茄青枯病防效可达77.8%。生防制剂KDLD稀释100倍施用后20d防效可达81.5%。大田防治试验结果表明,生防制剂KDLD稀释100倍后使用,在番茄整个生育期对番茄青枯病都具有很好的防效,在收获末期的防效仍可达81.8%。

内生枯草芽孢杆菌B47菌株入侵番茄的途径及其定殖部位

番茄内生枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B47菌株对番茄青枯病有较好防治作用。本研究对该菌株入侵番茄的途径及其定殖部位进行检测。用浸种、浸根、淋根、注射、喷雾、针刺伤茎和针刺伤叶等方法将B47菌的抗链霉素突变菌株从不同部位接种到番茄植株上,一个月后进行接种菌回收,结果发现除喷雾接种法外,用其他方法接种B47菌的番茄植株体内都有B47菌株存在。说明该菌能通过番茄根、茎、叶的伤口入侵番茄植株。将B47菌株接种到番茄苗上,20d后切取茎段,经固定、脱水、渗透、包埋、聚合等处理后,进行半薄切片,光学显微镜检测,结果表明:B47菌株入侵番茄植株后主要定殖在维管束的导管中。

青枯病原细菌无毒菌株诱导番茄防御酶系及粗提液抑菌活性的影响

用紫外诱变法获得的青枯无毒菌株诱导番茄 ,研究了诱导番茄细胞内防御酶系及组织粗提液抑菌活性的影响。结果表明 :番茄经无毒菌株处理后 ,体内与抗病反应相关的苯丙氨酸解氨酶 (PAL)、过氧化物酶 (POD)、多酚氧化酶 (PPO)及超氧化物歧化酶 (SOD)等防御酶系活性均显著增加。无毒菌株可诱导产生植株体外和体内对致病菌有抑制作用的抑菌物质。表明青枯无毒菌株产生诱导抗性的机制可能是激活了植物本身的抗病代谢过程。

蜡样芽孢杆菌ANTI-8098A在番茄内的定殖和对青枯病的防治研究

本文研究了生防菌ANTI-8098A在番茄植株内的定殖及其对青枯病的生防特性,采用激光共聚焦显微技术观察了GFP标记菌株ANTI-8098A：pCM20在番茄根系的分布。ANTI-8098A及其标记菌株可很好地定殖于番茄植株内,在根内定殖浓度最高,达10^4－10^5cfu.g-1,茎部、叶片内次之,达10^3－10^4cfu.g-1;ANTI-8098A处理后番茄根系PPO活性显著提高,对番茄叶绿素含量有短期效应;处理后5~15d番茄根际微生物数量略低于对照,其后逐渐与对照趋于一致;ANTI-8098A及其标记菌株对青枯病的防效存在一定差异,平均防效为57.1%-100%。

产脂肽菌株发酵生物有机肥的生物防治与促生作用研究

选取对番茄青枯菌有明显抑制作用的产脂肽菌株XZ-173,与有机肥混合发酵制成生物有机肥。通过温室盆栽试验,评价了该生物有机肥对番茄青枯病的防治效果及对番茄的促生效用。结果表明,生物有机肥能够显著降低青枯病发病率,相对防效达56.8%。与施用化肥和未添加XZ-173的有机肥处理相比,施用该生物有机肥能显著提高番茄植株叶绿素含量、番茄地上部和地下部生物量、根际土壤细菌和放线菌数量,显著降低根际土壤中真菌数量。生物有机肥的有益效果使其在作物种植中具有广阔的应用前景。

番茄青枯病罹病植株和健康植株根际土壤理化性状及生物学特性的比较

采用对比分析的方法,研究了广西主要番茄产区青枯病罹病植株和健康植株根际土壤的理化性状和生物学特性。结果表明:与健康植株相比,番茄青枯病罹病植株根际土壤pH值、有机质、全氮、全磷、全钾含量以及碱解氮、速效磷、速效钾含量等非生物因子均呈下降趋势,尤其是碱解氮、速效磷和速效钾含量的下降趋势尤为显著。另一方面,番茄青枯病罹病植株根际土壤中可培养细菌、放线菌数量极显著减少,而可培养真菌数量极显著增加;同时,涉及碳、氮、磷循环的相关酶(β-葡糖苷酶、磷酸酶、蛋白酶)活性和微生物生物量碳、氮显著或极显著降低。

两株植物根际促生菌对番茄青枯病的生物防治效果评价

研究了Erwinia persicinus RA2和Bacillus pumilus WP8浸种和拌土处理对番茄青枯病的实际防治效果,及其对番茄根际微生物群落的影响。结果显示,两株菌都具有防治番茄青枯病的作用,并能不同程度地促进番茄幼苗生长。主要体现在显著提高番茄幼苗健株率,病原菌处理的健株率最低,仅为22.4%,而RA2和WP8浸种处理分别达68.9%和62.8%;促进幼苗地上部增高、增粗和根部生长,如WP8浸种处理的茎叶干重和根干重分别达到4.87 mg·株-1和35.69 mg·株-1,分别比病原菌对照提高110.82%和205.83%。浸种处理的促进效应明显优于拌土处理;还能在一定程度上提高土壤水稳性团聚体(>0.25 mm)比例,WP8浸种处理尤为明显,分别比空白对照和病原菌对照提高269.91%和156.88%。DGGE指纹图谱表明根际微生物群落受番茄种植的影响最大,其次是青枯病菌,而受这两种菌施用的影响最小。

短小芽孢杆菌EN16诱导番茄对细菌性青枯病的抗性

采用盆栽试验法研究了短小芽孢杆菌EN16对番茄青枯病的诱导抗病效应.结果表明,菌株EN16诱导番茄产生对青枯病的防病效果达到49.45%-68.89%;分别在挑战接种间隔期为7-10 d、菌株灌根接种2种处理条件下,菌株EN16表现出较好的诱导抗病效果.测定EN16处理对番茄叶片中几种防御酶的影响,结果显示,在病菌挑战接种前后菌株EN16处理均能引起过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)等防御酶活性的显著增强.

茄果类蔬菜枯萎病及其综合防治

茄果类蔬菜是我国的主要蔬菜,它们在人类日常饮食中占据重要地位。枯萎病作为一种典型的土传真菌病害已经严重影响了茄果类蔬菜的产量与品质。本文综合国内外研究现状,对茄果类蔬菜枯萎病的危害现状、病原、发病症状和目前的防治策略作了全面总结,从而为枯萎病的研究进展奠定基础。

辣椒内生菌拮抗细菌的筛选

从广西一些县市采集辣椒茎标本,经分离得到41个细菌菌株,分属为土壤杆菌(Agrobacteriumspp.)、分枝杆菌(Mycobacteriumspp.)、微杆菌(Microbacteriumspp.)、欧文氏菌(Erwiniaspp.)和芽孢杆菌(Bacillusspp.),其中芽孢杆菌(Bacillusspp.)为优势种群。用抑菌圈法测定对茄青枯病菌有拮抗作用的有3个菌株,用浸种法和注射法测定具内生性的有17个菌株,具内生性同时又具拮抗作用的有2个菌株。

番茄抗青枯病育种(英文)

青枯病是重庆番茄生产主要障碍之一，为选育抗病品种，在病理研究基础上，进行了抗源材料选育及利用研究。2000～2003年分离出番茄青枯病病菌68株。经致病性测定、培养性状、生化测定等研究，明确重庆市番茄青枯病病原菌为：Ralstonia solanacearum，生理小种1。生化型Ⅲ。苗期室内人工接种抗性鉴定方法研究设伤根漫根接种法、灌注接种法、剪叶接种法三种处理，结果以伤根浸根接种法更为准确、可靠。经抗病性鉴定，结合农艺性状比较研究，筛选出四份抗源材料，并配组选出一个强优组合。

2株分泌型铁载体真菌对番茄青枯病的防效

为筛选对番茄青枯病防治效果好的天然产物,本文以分泌型铁载体产生菌云南木霉Trichoderma yunnanense 2-14F2和拟球孢白僵菌Beauveria pseudobassiana 2-8F2为材料,考察其铁载体活性物质对番茄青枯病的防效。采用CAS检测法及全波段紫外光吸收法判定铁载体化学结构类型及其活性。采用Sephadex-LH20凝胶划段法分离活性物质。采用平板扩散及96孔板倍半稀释法检测铁载体活性物质对青枯雷尔氏菌Ralstonia solanacearum的离体抑菌活性;采用盆栽法检测活性物质对番茄青枯病的防效。结果显示,菌株2-14F2和2-8F2产铁载体活性单位(SU)分别为62.02%和52.06%,铁载体化学结构类型均为异羟肟酸盐型(hydroxamates)。当铁载体活性物质浓度为0.15 mg/mL时,两菌株对青枯雷尔氏菌抑菌率分别为73.26%(2-14F2)和37.23%(2-8F2);对番茄青枯病的防治效果分别达到51.36%(2-14F2)与50.27%(2-8F2)。此外,当两菌株铁载体活性物质中含1 mol/L FeCl_(3)溶液时,抑菌率及防治效果均显著下降,表明其生物活性与铁载体及环境铁离子相关。研究结果将为分泌铁载体菌株在生物防治领域的开发利用提供理论依据。

青枯病抗性不同的番茄品种根际拮抗菌拮抗能力差异研究

以植物基因型影响根际微生物的多样性为依据,通过平板拮抗试验,从番茄的感病品种和抗病品种、感病品种的严重发病植株和轻微发病植株根际筛选到36株抬抗菌,不同来源的抬抗菌群落具有不同的特征。严重发病的感病品种植株根际的拮抗菌群落多样性低,仅筛选到1个拮抗菌株,而轻微发病的感病品种和未发病的抗病品种植株根际筛选到的拮抗菌株数较多;抗病品种根际桔抗菌表现出强拮抗能力,而感病品种根际拮抗菌的拮抗能力较弱。测定植株根面和根颈处导管内青枯菌的种群数量、3株拮抗菌的防病效果,发现导管内青枯茵数量与防病效果基本一致,探讨了导管内青枯菌数量作为拮抗菌防病效果指标的可能性。