马铃薯StSuSy4基因转录调控因子的筛选及互作验证

【目的】探究马铃薯块茎高表达基因StSuSy4的转录调控机制。【方法】克隆StSuSy4的启动子,构建pAbAi-StSuSy4pro诱饵载体,并将其转化至酵母细胞Y1HGold中,获得诱饵酵母菌株;利用诱饵载体筛选马铃薯幼嫩块茎组织酵母文库,并对转录因子进行组织表达模式分析。【结果】经酵母单杂交筛选,获得1个候选转录因子StBBX25,该基因的开放阅读框为774 bp,编码258个氨基酸。生物信息分析显示:StBBX25的N端含有B-box蛋白的特征结构域B-box1。候选转录因子与启动子点对点的酵母单杂交验证结果显示:在200 ng/mL金担子素条件下,pGADT7-AD空载对照组酵母不能正常生长,而pGADT7-StBBX25试验组能正常生长,表明StBBX25与StSuSy4基因启动子存在互作。组织表达模式分析显示:StBBX25和StSuSy4均为在马铃薯块茎中表达较高的基因。【结论】StBBX25与StSuSy4启动子互作,暗示StBBX25可能在马铃薯叶片和块茎淀粉合成以及产量形成中发挥作用。研究结果为深入理解马铃薯淀粉合成调控网络提供了重要的理论依据。