改进的ISTA麦醇溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳方法在小麦品种真实性和纯度鉴定中的应用

本研究以小麦品种为材料,在ISTA麦醇溶蛋白的标准电泳程序基础上,对其进行了改进,凝胶浓度由10%增加为16.5%,既提高了分辨率,又使得剥胶容易。同时,凝胶交联度由4%降为3.3%,硫酸亚铁的浓度也有所降低,增加了胶的韧性。凝胶溶液中过氧化氢的量经过多次试验,也进行了定量,由原来的少量定量为70μl,从而形成了一套适合于一般实验室就可进行小麦品种真实性和纯度鉴定的方法,并将其应用于小麦种子的真实性和纯度的快速鉴定中。

柱花草RAPD品种鉴定方法

针对柱花草不易从种子表型进行品种区分、品种真实性缺乏有效的早期鉴定技术,尝试建立柱花草种子RAPD品种鉴别方法。选取11个柱花草品种,采用改良的CTAB法从种子中提取总DNA。在优化的RAPD反应条件下,从100条随机引物中筛选出4条构建指纹图谱。4条引物总扩增带45条,其中多态性带42条,多态带比率达93.3%。通过聚类分析,对指纹图谱进行可靠性评估。11个品种的聚类情况与其亲缘关系相符合,表明依据图谱上的DNA带进行品种鉴定是可信的。本研究首次为柱花草种子的品种鉴定提供了完整的分子标记检测方法。