三七中5种重金属的风险评价及累积特征

【目的】评价三七种植农田土壤中5种重金属(Cd、As、Pb、Cr、Hg)的污染风险及植株对5种重金属的累积差异。【方法】采集来自10个三七种植地的250株三七植株及其根际土壤样品,通过电感耦合等方法检测土壤和植株中的5种重金属含量,进一步分析三七根际土壤及植株地上部、地下部5种重金属的超标率、富集系数和转移系数。【结果】10个采样地三七根际土壤重金属超标率为Cd(75.56%)>As(40.23%)>Cr(8.89%)>Hg(0.00%)=Pb(0.00%),超标重金属未超过管控值,4个采样地属于轻度污染。三七植株地上部及地下部均超标的重金属为Cd、Cr和Pb,地上部重金属超标率为Cd(67.90%)>Cr(22.22%)>Pb(10.84%),地下部重金属超标率为Cr(49.43%)>Cd(32.05%)>Pb(3.70%)。除了Hg,三七植株地下部对Cd、Pb、As和Cr的富集能力均强于地上部,且地上部和地下部对Cd的富集系数均大于1。【结论】大部分采样地属于轻污染等级,但三七植株地下部及根际土壤Cd、As和Cr有潜在的超标风险,三七对其累积情况均表现为地下部强于地上部,其中对Cd的富集能力最强。在选择三七种植地前应加强土壤重金属的监测并阻控主要药用部位对Cd、As和Cr的累积。

叶面喷施丝氨酸缓解三七热胁迫机制初探

【目的】探索叶面喷施丝氨酸对三七热胁迫的缓解效应及潜在机制。【方法】室内利用光照培养箱设置36℃高温处理盆栽三七15 d,期间每2 d分别喷施1次1、3和5 mmol/L的丝氨酸溶液,处理结束后调查三七病叶率。在田间利用自然高温环境胁迫三七,每3 d分别喷施1次与室内相同浓度的丝氨酸溶液,胁迫时间延长至30 d,调查三七病叶率以及高温对三七生物量和皂苷含量的影响。测定室内盆栽的三七抗氧化酶活性及代谢物含量变化,阐释丝氨酸缓解三七热胁迫的初步机制。【结果】喷施3和5 mmol/L丝氨酸可显著降低盆栽三七病叶率(P<0.05);1、3和5 mmol/L丝氨酸均可显著降低田间三七病叶率(P<0.05),增加其单株干质量以及人参皂苷Rg_(1)、Re、Rb_(1)和Rd含量。1和3 mmol/L丝氨酸可显著提高盆栽三七叶片超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05),3 mmol/L丝氨酸可显著提高其过氧化物酶(POD)活性(P<0.05)。KEGG富集分析表明:丝氨酸处理后一些非酶抗氧化代谢物如糖醇和氨基酸在叶片中大量积累;与植物耐热性相关的糖类物质如蔗糖和海藻糖积累量增加;三羧酸循环中重要代谢产物如柠檬酸、乌头酸和琥珀酸的积累也增加,有助于改善三七的能量供应。【结论】外源喷施丝氨酸能降低热胁迫下三七病叶率,提高三七生物量和皂苷积累,初步认为其机制与提高三七的抗氧化能力以及增强碳水化合物代谢相关。

醇溶超生提取法三七花中总甙的含量测定

研究不同产地、三年生三七花中总皂苷的含量,分析三七花中农药残留含量。采用大孔树脂吸附除去样品中大量的色素,比色法测定总皂苷的含量,采用毛细管气相色谱法测定农药残留六六六、DDT含量。

pH对三七块根花色苷颜色呈现和降解的效应(英文)

用分光光度法在体外研究了pH对三七块根花色苷呈色和降解的效应，结果表明：该花色苷在可见光区的吸收光谱和降解速率均具独特的pH依赖性。在pH2．0，该花色苷呈现最强烈的红色。随着pH从0增加到13．0，该花色苷在可见光区的最大吸收波长（λvis max）依次出现红移、蓝移，然后消失，在可见光区最大吸收波长处的吸光值（Aλvis max）呈现为一条单峰曲线，唯一的峰在pH2．0处。当原始pH值被恢复到2．0后，如果原始pH值≤6．0，花色苷的红色均被恢复得更浓烈，λvis max不同程度地趋向532nm，A州…。增加；如果原始pH值I〉7．0，花色苷的红色根本不能被恢复，λvis max几乎不变，Aλvis max仍然维持低水平。在15℃，黑暗中，该花色苷在pH0～6．0条件下均随时间而降解，在pH2．0时的降解速度最慢，当pH≤3．0时，该花色苷在总体上降解缓慢；此外，该花色苷的降解过程几乎符合一级反应动力学。本文可为三七块根颜色呈现的机理探索及其色素的开发、利用提供参考。

云南三七种植区土壤重金属分布特征及其与三七块根、叶片内含量的关系

以云南省三七主要种植区土壤及三七植物为研究对象,采用野外调查和室内分析相结合的方法,在云南省三七主要种植区域随机采集51个3年生三七及栽培土壤样品,对三七块根及土壤中铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)、铜(Cu) 4种重金属含量进行分析评价,对土壤重金属含量与三七块根、叶片中的重金属含量进行相关性分析。结果表明,(1)云南省三七主要种植区土壤重金属含量超标严重,其中以Cd、As、Cu 3种重金属超标最为严重,样品超标率分别为62. 7%、35. 3%、64. 7%。(2)文山、红河、昆明、曲靖综合污染指数分别为1. 27、1. 31、1. 76、2. 16,重金属污染程度依次表现为曲靖>昆明>红河>文山。(3)三七块根重金属累积量与土壤重金属浓度呈线性正相关,以铅、砷较为明显;三七叶片铅累积量与土壤铅浓度呈线性正相关,而镉、砷、铜3种重金属拟合性较差。

5种提取三七基因组DNA方法的比较

用高盐低pH值法、尿素法、CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）法、SDS（十二烷基磺酸钠）法、PVP（聚乙烯吡咯烷酮）法提取一年生三七叶的基因组DNA,用紫外分光光度法测定提取的DNA浓度,用琼脂糖凝胶电泳法测定提取的DNA质量。结果表明：用CTAB法提取的基因组DNA含量、得率最高,分别为41.434 3~43.233 6μg/mL、114.829 5~127.282 4μg/g,且D260 nm/D280 nm均在标准值范围内,D260 nm/D230 nm小于1.9,有RNA污染;SDS法、PVP法、尿素法也可以提取基因组DNA,但含量较低;高盐低pH值法提取的DNA浓度最低,电泳图基本看不到明显条带。将这5种方法进行对比,最终确定CTAB法为三七基因组DNA的最佳提取方法。

中药材景天三七DNA提取方法的比较分析

以景天三七药材为材料,分别采用改良CTAB法、SDS法、高盐低p H法对其DNA进行提取并检测,旨在建立一种适合中药材景天三七的DNA提取方法。结果表明,改良CTAB法提取的DNA浓度为290μg/m L,电泳条带最亮,无拖尾现象,在浓度和纯度方面均优于其他2种方法,并可用于ISSR-PCR扩增,改良CTAB法是中药材景天三七DNA提取的最佳方法。

三七原生质体的制备

原生质体因打破了细胞壁的限制,成为遗传转化和体细胞杂交的理想受体。为了以酶解法制备高产量、高活力的三七原生质体,基于组织培养技术,以三七的愈伤组织为试验材料,设置不同纤维素酶和果胶酶的浓度配比,同时探究三七愈伤组织不同培养天数、不同酶解时间、酶液不同渗透压以及离心纯化收集原生质体时不同离心力对原生质体制备的影响,确定三七愈伤组织原生质体分离的最佳条件,以获得较高产量和活力的原生质体材料。结果表明,三七愈伤组织继代培养15d,酶液组成为15mg/mL纤维素酶+7mg/mL果胶酶+CPW液+0.7mol/L甘露醇,酶解时间为7h,以800r/min离心收集原生质体时其产量和活力较高。

建立UPLC-MS联合HPLC方法探究外源物质对三七叶皂苷含量和生长的影响

【目的】为更加精确探究外源物质赤霉素(GA3)、6-苄基腺嘌呤(6-BA)、脱落酸(ABA)、茉莉酸甲酯(MeJA)、水杨酸(SA)、萘乙酸(NAA)、乙烯(ETH)、褪黑素(MT)、亚精胺(Spd)、一氧化氮供体硝普钠(SNP)和过氧化氢(H2O2)对三七[Panax notoginseng (Burk.) F.H.Chen]叶皂苷含量的影响。【方法】开发超高效液相色谱—四极杆串联飞行时间质谱(UPLC-MS)结合高效液相色谱(HPLC)的新方法,测定三七叶中7种皂苷单体含量和生长指标。【结果】(1)建立的HPLC法可在52 min内准确测出三七叶中人参皂苷Rb1、Rc、Rb2和Rb3、三七皂苷Fa、Fe及七叶胆苷XVII等7种皂苷单体含量;(2) MeJA显著提高三七叶人参皂苷Rb1、Rc、Rb2、Rb3、三七皂苷Fa、Fe及七叶胆苷XVII的含量和总含量,且对三七生长无显著影响;而NAA、6-BA、H2O2、SNP、Spd和ABA显著提高三七皂苷Fe含量,ABA显著提高七叶胆苷XVII含量,但总含量均显著减少,且对三七生长有显著影响。【结论】建立了三七叶皂苷单体快速简便、稳定可靠的新检测方法,基于该方法明确了外源物质MeJA能大幅诱导三七叶皂苷单体的积累。

三七不同器官稳定同位素变化规律

明确三七不同器官中碳、氮、氢、氧同位素的变化规律,以及年限对三七碳、氮、氢、氧稳定同位素的影响,为三七不同器官产地溯源提供理论依据。利用同位素比率质谱仪测定来自云南、广西44个3年生和7个2年生春三七各器官花、茎叶、芦头、块根、筋条、须根中的δ13 C、δ15 N、δ2H、δ18 O,利用独立样本均值检验以及Duncan’s法进行多重比较分析。不同年限间,三七各器官δ13 C、δ15 N、δ2H、δ18 O均无差异。不同器官间δ13 C、δ2H变化规律基本一致,均为地下部分极显著高于地上部分,即δ13 C表现为芦头、块根、筋条、须根>花、茎叶(P<0.01);δ2H表现为芦头、块根、筋条>须根>花、茎叶(P<0.01);δ15 N则表现为花、茎叶>芦头、块根、筋条>须根;δ18 O表现为块根>芦头>花、须根(P<0.01)。稳定同位素碳、氮、氢、氧在三七不同器官中的分馏效果是不一致的,在进行三七产地溯源时,可以不考虑年限因素。在进行三七各器官产地溯源时,应根据其同位素变化规律选择有差异的同位素指标。