苦豆子愈伤组织诱导及细胞悬浮培养体系的建立

以苦豆子子叶和胚轴为材料,对苦豆子愈伤组织诱导和继代增殖的最佳培养条件进行研究,旨在建立苦豆子悬浮细胞体系。结果发现,子叶和胚轴为愈伤组织生成的最佳外植体,愈伤组织最佳诱导培养基是MS+0.5 mg/L2,4-D+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA;最佳继代增殖培养基是MS+1.0 mg/L NAA+4.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L2,4-D。以胚轴诱导的愈伤组织是细胞悬浮培养的理想材料,初始接种量10%~20%,添加3%蔗糖,有利于悬浮细胞体系的生成。

吊瓜组培苗快繁技术体系的建立

为建立吊瓜组培苗快繁技术体系,实现大规模生产优质吊瓜种苗,本试验以"越蒌2号"为材料,探讨不同激素配比的初代培养基、继代培养基、生根培养基对离体茎段腋芽诱导、茎蔓生根的影响和炼苗移栽方式对组培苗成活率的影响。结果表明,初代培养基中6-BA、IAA组合浓度为0.5、0.2 mg/L时,腋芽诱导出苗率高达99%;生根培养基IBA浓度为0.5 mg/L时生根率为88%,平均侧根数最多;诱导苗炼苗后成活率可达90%,可以实现吊瓜苗的批量生产。

老瓜头离体根与毛状根的诱导培养

以老瓜头茎段为外植体筛选诱导离体根再生的最适培养基,以老瓜头茎段和叶片为外植体筛选发根农杆菌介导的毛状根诱导产生的最适条件,为老瓜头毛状根的大量培养及有效成分利用提供前期的试验参考。结果表明,添加NAA的MS培养基诱导老瓜头离体根再生的效果明显,带腋芽茎段的生根率可达到100%,不带腋芽的茎段生根率为67.5%;含有IBA的培养基上,带腋芽的茎段生根率低,只有3.9%,不带腋芽的茎段无根生出。以发根农杆菌A4菌株介导的老瓜头毛状根诱导过程中,用D600 nm=0.8的菌液侵染叶片15 min,诱导率及诱导密度最高,分别为100%和4.6;用D600 nm=0.8的菌液侵染茎段(不带腋芽)15 min时,诱导率最高达46.7%。老瓜头茎段在添加NAA的MS培养基上容易生根;最适转化条件为发根农杆菌A4菌液浓度D600 nm=0.8,侵染15 min,800 mg/L头孢噻肟钠除菌;叶片是遗传转化最适外植体。

植物的插条繁殖生理

插条繁殖是植物营养繁殖的一种重要方法,诱导不定根的形成是插条繁殖的关键。

蒙药达乌里芯芭组织培养快速繁育技术

以达乌里芯芭种子为外植体建立无菌材料,采用正交试验设计研究不同植物生长调节剂(6-BA、IAA和KT)组合对达乌里芯芭增殖培养的影响,以及NAA、IAA对组培苗生根诱导的影响。结果表明,达乌里芯芭种子消毒以0.1%HgCl_2溶液浸泡8 min后剥除种皮处理效果最佳;适宜增殖培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+0.2 mg/L KT,30 d增殖系数为20.5;最适生根培养基为1/2MS+1.0 mg/L IAA,生根率93.33%;生根苗炼苗后移栽沙床上,成活率为98%。

KT对黄独带芽茎段生长发育和离体保存的影响

以黄独试管苗为材料,采用植物组织培养和单因子试验的方法,对黄独带芽茎段生长发育和离体保存的影响因子(KT)进行了分析。结果表明:1～2 mg/L的KT可以促进黄独带芽茎段的生长发育,而4mg/L的KT可以提高黄独带芽茎段离体保存后的成活率。

三叶木通下胚轴愈伤组织诱导及分化

以三叶木通试管苗下胚轴为材料,研究不同激素配比对三叶木通下胚轴愈伤组织诱导、分化的影响,比较光照及不同抗褐化剂对防止愈伤组织褐化的影响。结果表明,当2,4-D浓度为2.0 mg/L、NAA 0.2 mg/L时,愈伤组织诱导率高达96.5%;黑暗处理比光照更有利于愈伤组织的诱导,0.6 g/L PVP对预防愈伤组织褐化具有较好的效果;TDZ的浓度对愈伤组织的分化有着重要的影响,适合愈伤组织分化的最佳培养基为:MS+TDZ 1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L+PVP 0.6 g/L。

金铁锁带腋叶嫩茎的组织培养研究

以MS为基本培养基,附加不同浓度的植物生长调节剂,将新萌发的带叶腋金铁锁茎段接种于其中,筛选金铁锁最佳组培快速繁殖方案。结果表明:金铁锁外植体消毒最佳方法为75%乙醇消毒0.5 min+0.1%Hg Cl2消毒7 min,污染率可降至35%且成活率可高达73%;金铁锁分化培养最优组合为MS+TDZ 0.01 mg/L+NAA0.5 mg/L,诱导率可达90%;丛生芽增殖培养基以MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L最佳,最大增殖苗倍数为22.3个。最适合金铁锁生根的培养为1/2 MS+NAA 0.15 mg/L+IBA 0.1 mg/L,生根率可达95%,且根系生长状况良好。试验结果可为金铁锁快速育苗、种质资源保存、遗传改良提供理论及实践指导。

鸡血藤的扦插育苗试验

以密花豆(Spatholobus suberectus)、喙果鸡血藤(Millettia tsui Metc)、常春油麻藤(Mucuna sempervirens)、小血藤(Dchisandra propinguavar.sinensis)、香花崖豆藤(Millettia dielsiana Harms)枝条为试材,采用对照试验以及正交实验的方法,研究了几种鸡血藤扦插繁殖的成活难易情况,并对影响密花豆成活率的条件:生根剂种类、浓度、浸根时间、枝条木质化程度进行优化。结果表明:不同种鸡血藤的成活情况存在较大差异,密花豆最易成活,常春油麻藤次之,小血藤最不易成活。并且不同的生根剂以及不同木质化程度对于扦插成活率存在影响,在对密花豆扦插育苗时,选择木质化程度高的枝条,并用浓度为300mg/L的NAA处理30min,能够较大程度的提高成活率。

苗药红禾麻(Laportea bulbifera)扦插繁殖试验

为筛选出适于红禾麻扦插繁殖的外源性生长调节剂类型与处理方法,提高红禾麻扦插成活率。以红禾麻新鲜中部茎条为试材,研究了3种生长调节剂(IAA、IBA、NAA),4种浓度梯度(0(CK)、50、100、150、200mg·L^(-1))与4个时长梯度(1、2、3、4h)对其扦插繁殖的影响。处理后经45d生长,观察记录其生根率、根数、根长、根系效果指数、叶片数、新茎数、新茎长等生长指标,并进行多重比较与主成分分析。结果表明:3种生长调节剂的不同浓度对红禾麻扦插繁殖的各指标均显著优于CK。但3种生长调节剂的不同浓度处理对红禾麻扦插繁殖的影响有一定差异。生根数随处理时间的增加而上升,但各处理间差异较小,生根数表现为NAA 200mg·L^(-1) 4h>IAA 200mg·L^(-1) 4h>IBA 200mg·L^(-1) 4h;根系效果指数随3种生长调节剂浓度(50~200mg·L^(-1))增加均呈显著上升趋势;主成分分析结果显示,NAA 200mg·L^(-1) 4h综合得分最高,为1.583 8,排序第一,CK综合得分最低,为-2.915 5。因此,NAA 200mg·L^(-1) 4h较利于红禾麻扦插繁殖。