基于SRAP标记的花椒种质资源遗传多样性及群体结构分析

为探讨花椒种质资源的遗传多样性和群体结构特征,用SRAP分子标记技术对采自陕西、山西、云南、四川、甘肃5个种源地的269份花椒属样品的遗传多样性进行了研究。结果表明:从120对引物组合中筛选出了16对图谱带型清晰、丰富、重复性好的引物组合;269份花椒属样品用这些引物组合共扩增出169条清晰可重复的条带,其中多态性条带151条,多态性比率为93.8%;通过UPGMA分子系统聚类法,将269份花椒属种质划分为2个类群,即竹叶椒类群和花椒类群;在所研究的5个种源中,陕西花椒的遗传多样性水平最高,陕西和甘肃花椒的遗传距离最小,陕西和云南花椒的遗传距离最大;AMOVA分子变异分析显示,在花椒总的遗传变异中,种源内占74%,而种源间仅占26%;Structure群体遗传结构和UPGMA聚类结果一致,且种源间存在明显的基因交流现象。结果为花椒资源的收集、分类和鉴定工作以及育种工作提供了理论依据。

基于花椒转录组序列SSR分子标记开发及花椒种质鉴定

为拓展分子标记在花椒种质资源分析中的应用、开发花椒EST-SSR功能性分子标记、分析花椒DNA指纹图谱,利用凤县大红袍花椒的茎尖节点转录组c DNA数据库中45 057条长度大于200 bp的非冗余Unigene序列,使用MIcro SAtellite(MISA)软件搜索SSR位点,分析花椒c DNA序列中SSR位点的频率和密度、SSR重复基元种类及比例、SSR重复次数与数量等分布特征;用Primer 3.0软件在线设计SSR引物并经PCR扩增筛选适合的多态性引物;用Quantity One软件统计多态性条带和分子量大小;NTsys 2.0软件分析12份花椒种质的遗传距离、构建树状聚类图及DNA指纹图谱库。结果表明,45 057条序列中有3 315条Unigene序列包含SSR位点,共3 814个,3 315条序列中SSR位点出现频率为7.07%;在检索出的SSR位点中,二核苷酸、三核苷酸是主要重复类型,分别占29.42%和58.58%,二核苷酸重复中以AG/TC、CT/GA出现频率最高,三核苷酸重复中GAA/CTT、AGA/TCT出现频率最高;二、三、四、五、六核苷酸重复基元总数随着重复次数的增加呈明显下降趋势。利用Primer 3.0设计的64对EST-SSR引物中,55对引物能产生预期片段大小的PCR产物,其中18对引物具有多态性;利用18对引物对12份花椒种质进行PCR扩增,共产生81条扩增条带,其中多态性条带73条,多态率为90.12%;各花椒种质的遗传相似系数为0.552 6~0.894 7,平均为0.725 0;经UPGMA聚类分析在相似系数0.70处12份花椒种质共分为3类,即顶坛花椒为Ⅰ类、竹叶椒为Ⅱ类、其他花椒为Ⅲ类;指纹图谱分析中,8对引物在5份种质中能扩增出特征带型,最少用3对引物进行组合即可将12份花椒种质区分开。成功在凤县大红袍花椒的茎尖节点转录组c DNA序列中开发SSR标记,设计并筛选出8对能扩增出特征带型的引物,最少用3对引物进行组合即可将12份花椒种质区分开,这为今后花椒遗传多样性分析、遗传图谱构建等方面提供新的引物序列并奠定了基础。

美洲商陆核基因组抗病毒蛋白基因的克隆及序列分析

通过ＰＣＲ扩增，从美洲商陆（Ｐｈｙｔｏｌａｃａａｍｅｒｉｃａｎａ）核基因组中克隆了商陆抗病毒蛋白基因，序列分析表明，该基因含８８５个核苷酸，与已报道的序列比较，核苷酸同源性为９９．３％。

香料植物选育的有效方法

香料和药物研究所已完成了薄荷、玫瑰、薰衣草、香紫苏、芫荽和小茴香六种主要香料植物的选育工作。我们利用综合的种间杂交方法，获得了一大批高产的品种，如薄荷（Simferopolskaya－200，Zagrava，Ukrainskayaperechnaya），玫瑰（Raduga，Lan，Romantsa）和小茴香（Mertsishor）。新品种的使用，使薄荷油的产量提高到120公斤／公顷，玫瑰油的产量提高到5公斤／公顷，小茴香油的产量提高到100公斤/公顷。

抗病毒转基因烟草研究进展

病毒病素有烟草"癌症"之称。选育具有抗病毒能力的烟草品种是解决病毒病的根本途径,与传统育种相比,利用基因工程手段进行抗病毒育种可利用更为丰富的抗病毒基因资源。抗病毒基因资源主要有病毒来源基因(外壳蛋白基因、运动蛋白基因、复制酶基因等)和非病毒来源基因(病程相关蛋白基因、核糖体失活蛋白基因、N基因、干扰素基因等)。目前,在烟草的抗病毒研究中,对病毒来源基因介导与非病毒来源基因介导的抗性已开展了广泛的研究,并取得了显著进展。本文就病毒来源基因介导的抗性与非病毒来源基因介导的抗性在转基因烟草中的研究进行了综述。

嘉禾烟区不同烟草品种(系)的苗期生理活性和干物质积累变化

分析一批烟草品种(系)在嘉禾烟区生态条件下苗期的生理活性和干物质积累的变化,结果表明:与云烟87相比,粤烟98苗期的硝酸还原酶活性显著高于其他品种(系),其次为NC71和CZ-43;CZ-43的蔗糖转化酶活性最高,其次为NC71;NC-297的根系活力最强,NC71次之;CZ-43、NC71在苗期对环境抗逆性最强,有利于在相对较差环境下培育壮苗;干物质在整株烟苗中的重量以NC71最高。据此,CZ-43、NC71可初步作为嘉禾烟区的备选品种进行推广和示范。