洋葱AcSCL4的克隆及其功能分析

【目的】初步探讨AcSCL4在洋葱成花中的功能,为解析洋葱成花分子调控机制提供理论基础。【方法】以长日生态型洋葱品系SB2为试验材料,根据已有的洋葱转录组数据,通过qRT-PCR筛选目的基因AcSCL4后进行基因克隆,并对其进行生物信息学分析;构建AcSCL4基因的过表达载体pB221-3300-AcSCL4并转化农杆菌,采用花序浸染法浸染拟南芥,并对T_(3)代纯系转基因植株进行表型分析和开花相关基因表达量分析。【结果】洋葱AcSCL4基因CDS长1515 bp,编码504个氨基酸;AcSCL4蛋白N端高度变异,C端有GRAS结构域。聚类分析发现,AcSCL4与石刁柏和棉花的SCL4蛋白亲缘关系较近。与野生型拟南芥相比,AcSCL4过表达植株表现晚花表型。荧光定量PCR结果表明,与野生型拟南芥相比,AcSCL4过表达植株开花调控基因CO和FT的表达量极显著下降。【结论】AcSCL4通过调控CO及FT基因表达来抑制洋葱开花。

洋葱种子种质超干保存的效果及其对膜系统的影响

洋葱超干种子室温下抗老化能力增强，耐储性提高。能明显延缓衰老。超干种子直接吸胀会引 起胚根断裂和种子活力下降。但吸胀前回水处理可以减轻吸胀过程中造成的损伤；超干处理大大增加了 苏氨酸（Ｔｈｒ）的渗漏，回水处理可恢复到原来水平。经回水处理的老化超干种子较未超干的对照老化种 子氨基酸和无机离子泄漏量减少，洋葱种子漏失的氨基酸以组氨酸（Ｈｉｓ）和苏氨酸（Ｔｈｒ）为多，外渗离子 以钾最多，超干还增加Ｃａ２＋和Ｍｇ２＋的渗漏，但回水后恢复到超干前的水平。

洋葱育种的探索与实践

本文对激光诱变洋葱的生物效应、生理效应进行了综述,并对通过激光诱变方法选育出的洋葱品种西葱1号、西葱2号、西葱3号及西葱4号的育种实践进行阐述为激光诱变选育洋葱新品种提供了理论和实践。

洋葱品种资源营养成分比较及杂种优势分析

对洋葱不同品种资源进行了营养成分的测定分析,旨在探讨不同品种资源之间、杂交组合和亲本之间营养成分的差异性及杂种优势,为洋葱育种及品质改良提供理论依据。结果表明,1号白皮品种干物质含量较高;3种皮色洋葱的蛋白质含量差异不明显;红皮品种多酚、多糖、类黄酮含量明显高于白皮品种,优于黄皮品种。洋葱矿物元素含量表现为钾最高,其次是硫、磷、钙;白皮品种矿物元素含量较高,除锰、铁外,其他均高于黄皮、红皮品种。试验中测出16种氨基酸,各品种氨基酸含量依次为2号>4号>6号>3号>5号>1号。洋葱中类黄酮、干物质、多糖、氨基酸、铁、锰、锌、钾、磷含量在F 1代中表现出较强的杂种优势;蛋白质、多酚、硫、镁、钙含量在F 1代中基本无杂种优势或为负向优势。

激光辐照洋葱L_1代的生理效应研究

采用 CO2 和 He Ne两种激光的三种剂量 ,分别辐照两个洋葱品种的湿种子 ,采用生理生化的方法 ,从过氧化氢酶、叶绿素、总糖总量等三个方面考查研究洋葱 L1各处理的生物学效应。结果表明 :He Ne激光辐照洋葱 L1代的过氧化氢酶、叶绿素、总糖含量的变异大于 CO2 激光辐照 。

不同消毒方法在洋葱组织培养中的应用

使用几种不同的消毒方法和杀菌剂,以及不同的消毒时间,对洋葱种子进行处理,结果是用不含洗涤剂的温水浸泡12h后,经过70%酒精体表消毒1min,0.1%HgCl2和Tween20按比例10000:1的混合溶液消毒10min的效果最好,而且不影响种子发芽。

生漆对洋葱根尖分生组织细胞有丝分裂影响的研究

生漆（ＣｈｉｎｅｓｅＬａｃｑｕｅｒ）作为一种优质天然涂料人们已经有数千年的应用历史，并进行了广泛深入地研究［１～３］；生漆会引起人的皮肤过敏也早已被人们所认识［４，５］。生漆对植物分生组织细胞有丝分裂的影响，国内外还从未报道过。本文作者就生漆对植物分生组织细胞有丝分裂的影响进行了详细地观察研究。研究结果表明，生漆会引起植物分生组织细胞有丝分裂的高度异常。特别是细胞有丝分裂的后期和末期变化最大。后期主要表现为部分染色体滞后、染色体桥和断片的出现以及染色体不均等的多极分布。末期的主要变化是细胞质的分裂受阻而形成多核体（多核细胞）。由此推断，生漆作为一种植物细胞分裂的诱变剂是行之有效的。同时把生漆作为一种诱变因子，运用于植物的人工诱变也是有可能的。因此，深入开展生漆对植物的遗传变异生理代谢等方面影响的研究是十分必要的。

光质对红树莓组培苗生长及部分生理生化特性的影响

以红树莓‘海尔特兹’继代组培苗为试材,研究了不同光质处理下红树莓生根组培苗的形态、抗氧化酶活性以及碳氮代谢,以确立红树莓组培生根苗生长的适宜光质。结果表明:随着R/B(红蓝比)的增加,红树莓生根组培苗的株高由1.514cm逐渐增加到最大值1.638cm,在4R/B(红∶蓝=4∶1)处理下表现为最大值,但与对照W(白光)之间差异不显著,随后株高又随着R/B的增加而减小,在10R/B(红∶蓝=10∶1)处理下表现为最小值0.681cm,显著小于对照W;茎粗则随着R/B的增加由最大值0.101cm逐渐减小到最小值0.076cm,R/4B(红∶蓝=1∶4)处理下表现为最大值,与对照W之间差异显著,10R/B处理下表现为最小值,与对照W之间差异不显著;叶面积、生根率以及根长与茎粗呈现相同的变化趋势,均随着R/B的增加而减小,在R/4B处理下表现为最大值,分别为0.751cm2、0.786、1.369cm,在10R/B处理下表现为最小值,分别为0.211cm2、0.357、0.369cm;SOD及CAT活性均随着R/B的增加逐渐由R/4B处理下的最小值(1.832μg·g^(-1)FW、H_2O_25.902mg·g^(-1)FW)增加到10R/B处理下的最大值(10.953μg·g^(-1)FW、H_2O_246.978mg·g^(-1) FW);POD活性随着R/B的增加先由R/4B处理下的最小值(5.511μg·g^(-1)FW)逐渐增加到4R/B处理下的最大值(20.934μg·g^(-1)FW),随后又随着R/B的增加逐渐减小;MDA含量随着R/B的增加逐渐由R/4B处理下的最小值(7.357nmol·g^(-1)FW)逐渐增加到10R/B处理下的最大值(10.880nmol·g^(-1)FW),极显著高于对照W;碳水化合物含量随着R/B的增加由200.204mg·g^(-1)增加到最大值313.917mg·g^(-1),在R/B处理下表现为最大值,且极显著高于对照W,随后又随着R/B的增加逐渐减小到最小值154.172mg·g^(-1),显著低于对照W;游离氨基酸含量随着R/B的增加逐渐由R/4B处理下的最小值(16.903mg·g^(-1))增加到10R/B处理下的最大值(33.180mg·g^(-1));可溶性蛋白质含量随着R/B的增加逐渐由R/4B处理下的最大值(12.507mg·g^(-1))减小到10R/B处理下的最小值(2.147mg·g^(-1))。

葱属植物离体培养研究进展

就近30年来葱蒜类组织培养各方面研究作了归纳总结,包括分生组织培养、器官培养、胚培养、单倍体培养和试管受精、原生质体培养和体细胞融合。并对建立再生体系的影响因素进行了综述,特别对可控因素如培养基营养,生长调节剂等作了详细的论述,同时总结了目前该领域存在的问题。

洋葱雄性不育性及其应用研究进展

概述了洋葱雄性不育系发现及利用的演化过程,介绍了S型和T型不育细胞质的特点及在全世界的利用情况;在质核互作不育类型利用上,介绍了洋葱和细香葱的最新研究进展;并对利用不育系进行大面积制种生产过程中可能出现的风险进行了分析。最后提出了我国南方各省洋葱育种的方向。

洋葱品质育种研究进展

本文对洋葱品质育种目标和主要品质性状的遗传特性及品质性状的分子标记辅助选择进行了综述,从鳞茎皮色、鳞茎形状和大小、可溶性固形物含量、紧实度、独心率、耐贮性等方面对品质性状的遗传特性进行了阐述,并对今后洋葱品质育种进行了展望。

影响洋葱愈伤组织及胚性愈伤组织诱导的因素研究

以洋葱雄性不育系种子(10-8F)为外植体,研究了蔗糖浓度、暗处理及取材时间对洋葱愈伤组织及胚性愈伤组织诱导的影响,以期优化胚性愈伤组织的形成条件,为转基因提供良好受体并为建立高频再生体系奠定基础。结果表明:40g/L蔗糖及光培养最适合愈伤组织的诱导;50g/L蔗糖及暗培养最适合胚性愈伤组织的诱导,最适宜的取材时间为45d。

镉离子诱导对洋葱根尖及表皮细胞凋亡的影响研究

以洋葱根尖细胞和鳞茎内表皮细胞为试材,用不同浓度氯化镉溶液为诱导剂,研究Cd2+对洋葱根尖凋亡的影响。结果表明:Cd2+能诱发根尖细胞凋亡和染色体畸变,且凋亡现象随着Cd2+处理浓度的增加和处理时间的延长而严重,有微核出现和细胞核逐渐解体等现象;洋葱表皮细胞随Cd2+浓度增高及处理时间的延长,表皮细胞逐渐发生质壁分离,而且越来越严重,并且细胞核发生偏离,逐渐靠近细胞壁等现象。

洋葱可视化多重标记遗传转化研究

以"凤凰白皮"洋葱种子为试材,采用转基因方法,将载体pBAC9075转入愈伤组织,研究花青素合成转录因子Bi和C1对转基因植株的影响。结果表明:经再生培养和草甘膦筛选,获得189棵再生植株,PCR检测发现5棵再生植株表现阳性,田间草甘膦筛选有7棵植株存活,其中2棵植株鳞茎有花青素积累,试验结果以期为花青素作为一种可视化跟踪系统用于洋葱转基因植株早期筛选提供依据。

洋葱新品种“昌激99-14”的激光诱变选育与栽培

采用CO2和He-Ne 2种激光的3种剂量,分别辐照2个洋葱品种的湿种子,从激光辐照洋葱的变异后代中,经8 a多的选育,培育出红皮洋葱新品种“昌激99-14,”2004年经四川省品种委员会审定通过(川审蔬2004021),定名为西葱2号。该新品种表现出早熟、耐贮存、株形紧凑、早期抽薹率低、产量高、抗病性好等优良性状,符合生产和市场要求,可作为目前生产上种植推广品种。

洋葱雄性不育系101A的杂优利用

用洋葱雄性不育系101A配制了15个杂交组合,经综合熟性、丰产性、抗病性、品质等经济性状考察,筛选出0212(101A×547)、0218(101A×419)、0224(101A×61)等3个新品系(组合)进一步推广示范,并介绍其栽培。

γ-射线辐照洋葱花序结合组织培养获突变株

用γ-射线的六个剂量照射黄皮洋葱(品种为No.8205)离体佛焰苞,然后接种在MS+6一BA10mg/l+NAAlmg/l培养基中培养。结果经20—50GY照射的花序不产生幼苗,对照和经5GY、10GY照射的花序幼苗诱导率分别为75％、41.7％和16.7％。在5GY照射的花序上产生了一株突变株。该突变株表现叶片多(9张),根多(7条)、叶片细。对照植株为3张叶,2—3条根,叶片粗。突变株鳞茎形状出现变异,球形指数为1:0.

红皮洋葱新品种“科威红7号”的激光诱变选育

对红皮洋葱品种"西葱2号"的湿种子,采用五种剂量的He-Ne激光进行辐照,并从激光诱变"西葱2号"的变异后代中选育出早期抽薹率低、极早熟、较高产的红皮洋葱新品种(系)"昌激09-2"(科威红7号),与亲本相比早期抽薹率下降4个百分点,成熟期提前18天。

洋葱雄性不育系再生体系的建立及优化

以茎尖为材料,对洋葱雄性不育系再生体系的建立及优化进行研究。利用茎尖培养诱导芽,一般继代培养2～3次,即可得到大量丛生芽。结果表明,芽增殖的最佳培养基是MS+4 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,增殖系数为5.3,芽诱导率为100%。筛选出2个适合生根的培养基是1/2MS+0.1 mg/L PP333+1.5 mg/L IBA和1/2 MS+1.0 mg/L IBA,生根率均为100%。

洋葱Ms位点多重PCR标记的开发与优化

以本课题组已获得的洋葱Ms位点侧翼序列为基础,设计、筛选引物获得了一个兼容的多重PCR分子标记,并对其反应体系和反应程序进行了优化。优化后的扩增体系:10×PCR buffer(Mg2+free)2.5μL、25 mmol/L MgCl24μL、2.5 mmol/L dNTP 6μL、DNA模板1μL(约50 ng)、10μmol/L引物各1μL、5 U/μL rTaq聚合酶0.6μL、用灭菌双蒸水补齐至25μL;反应程序:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,65.4℃退火45 s,72℃延伸1 min,35个循环;最后72℃延伸10 min。优化后的体系和程序可以检测到清晰的目的条带,通过一次PCR反应即可鉴定Ms位点的3种基因型(MsMs、Msms、msms),操作简单,稳定性好。