大蒜不同组织总RNA提取与质量分析

以大蒜幼叶、蒜薹和鳞茎为试验材料,采用3种方法提取大蒜总RNA。通过1.2%非变性甲醛凝胶电泳和紫外分光光度计检测提取RNA质量。结果表明:3种方法能够从3个不同的组织中提取完整性较高的总RNA,但从蒜薹和鳞茎中提取的总RNA的纯度不高,可能是因为这2种组织中含有大量多糖或其它代谢产物。从叶片中提取的总RNA质量较好,产率较高,提取大蒜叶片总RNA的效果最好。

多效唑对大蒜试管微鳞茎形成和膨大的影响

以MS为基本培养基,用地方品种阿城紫皮大蒜茎尖为外植体进行离体培养试验。结果表明:在一定范围内,随着多效唑浓度的增加,抑制鳞茎的形成与分化,鳞茎发生数减少,地上部生长受抑制严重,叶片和根系变短增粗。添加6 mg/L多效唑为诱导鳞茎形成和促进膨大的最佳浓度,鳞茎形成率109.00%,鳞茎鲜重为307.07 mg,鳞茎指数1.15。

浅析现代居住区环境景观的塑造

随着社会进步,人们对居住区环境景观也有了更高的要求。现在分析居住区环境景观现状的基础上,阐述居住区环境景规划原则,以及如何运用现代的景观设计手法,将自然生态融入到居住环境中,使居住区环境各个要素相互协调,塑造美好的居住区环境景观。

秋水仙素诱导大蒜根尖多倍体的研究

以秋水仙素0、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0g/L 6个浓度梯度,分别处理大蒜根尖12、24、36、48和60h,研究不同浓度的秋水仙素及不同处理时间对诱导大蒜根尖产生多倍体的效果。结果表明:在0.5g/L处理浓度下,从24～48h,大蒜根尖的膨大率均在82%以上,综合效果较好。

麻江红蒜茎尖愈伤组织诱导及植株再生研究

采用不同激素配比对麻江红蒜茎尖愈伤组织诱导及植株再生进行研究。结果表明:茎尖愈伤组织诱导的适宜培养基为:B5+2,4-D 2.0 mg/L;不定芽诱导的适宜培养基为:B5+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.01 mg/L;不定芽增殖的适宜培养基为:B5+6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.1 mg/L;适宜的生根培养基配方为B5+6-BA 0.01 mg/L+NAA 0.1 mg/L。

大蒜茎尖脱毒及快繁研究

病毒是引起大蒜退化的主要原因,茎尖脱毒是解决此问题的唯一途径。通过实验,我们不仅克服了脱毒效果不明显,增殖倍数不显著的问题。而且对脱毒效果进行了科学的验证;对炼苗环节进行了大胆的改进,使移栽苗的成活率大大的提高了。

大蒜内参基因筛选及AsACO基因对盐胁迫和促生菌的响应分析

【目的】筛选大蒜在盐胁迫下的稳定内参基因,并分析1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶基因(AsACO)对盐胁迫和促生菌的响应表达特性,为深入探究促生菌的促生机制及大蒜对盐胁迫的响应机制研究提供理论参考。【方法】以乐都紫皮大蒜为试材,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测5个内参基因ACT、UBC、HIS3、18S rRNA、TUB在盐胁迫下的表达稳定性,结合GeNorm、NormFinder和BestKeeper筛选出最稳定的内参基因,并分析恶臭假单胞菌UW4对盐胁迫下AsACO基因表达的影响。【结果】5个候选内参基因引物的特异性强、无引物二聚体。GeNorm分析得出候选内参基因稳定性排名为18S rRNA=TUB>HIS3>UBC>ACT,NormFinder分析得出内参基因稳定性排名为18S rRNA>HIS3>TUB>UBC>ACT,BestKeeper分析得出内参基因稳定性排名为UBC>HIS3>18S rRNA>TUB>ACT,最终以几何平均数综合分析得出18S rRNA为最稳定的内参基因。以18S rRNA为内参基因,检测出AsACO基因表达具有明显的组织特异性,在叶片中的相对表达量明显高于根。整个处理过程中,盐胁迫明显诱导AsACO基因在不同处理时间及不同组织中表达上调,根和叶片中AsACO基因的相对表达量分别在2 d和12 h时达最高,较正常培养(CK)分别显著升高124.43%和238.34%(P<0.05,下同),与盐胁迫处理相比,盐胁迫+浇施恶臭假单胞菌UW4处理显著降低AsACO基因在不同处理时间根和叶片中的相对表达量,其中在2 d和12 h时降幅较大,分别降低了112.08%和343.34%。【结论】18S rRNA是盐胁迫下大蒜中最稳定的内参基因。盐胁迫可诱导大蒜根和叶片中AsACO基因的上调表达,从而间接促进ACO和乙烯水平升高,加速由乙烯调控的细胞衰老,甚至死亡,但盐胁迫下恶臭假单胞UW4具有抑制AsACO基因表达的作用,以减少ACO和乙烯的合成,从而延缓大蒜细胞衰老,提高逆境耐受性。

以鳞茎片为外植体构建大蒜微繁技术体系

以大蒜鳞茎片为外植体,利用植物组织培养技术,构建了一个新的大蒜微繁技术体系。结果表明:以MS+1.5mg/L 2,4-D+0.5mg/L KT为愈伤组织诱导和继代培养基,以MS+5mg/L 6-BA+1.0mg/L NAA为诱导不定芽分化培养基,增加以MS+1.0mg/L KT+1.0mg/L GA+0.2mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA为壮芽培养基的壮芽培养过程,以基础MS培养基为生根培养基的试管苗培养体系;试管苗经过室内和田间拱棚中2次练苗,越冬前移栽到土壤中。翌年在T0代收获分瓣率高达94%再生地下鳞茎。该技术体系为脱毒蒜种扩繁提供重要保障。

大蒜花序轴离体再生体系的建立

以大蒜花序轴为试材,采用植物组织离体培养方法,研究了不同激素、蔗糖浓度及培养基的种类对花序轴分化及继代培养的影响。结果表明:以MS为基本培养基诱导大蒜花序轴分化的最佳培养条件为MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L,30g/L蔗糖,pH 5.8,分化率可达100%,增殖系数达46.3;最佳的继代培养基为1/2MS+6-BA 0.1mg/L+NAA 0.5mg/L,成活率可达100%,且长势最强。